Диссертация (1140411), страница 13
Текст из файла (страница 13)
рисунки 33 – 40). Несколько хондроцитов влакуне формируют изогенную группу, однако встречаются и пустые лакуны.Внутрикаждогохондроцитаопределяетсяпо1гиперхромномуядру,окруженному умеренно выраженным ободком цитоплазмы с вакуолями, часть изкоторых представлена липидными каплями, что видно на полутонких срезах,окрашенных MAFT (см. рисунки 37 и 40). Количество и размеры вакуолей вклетках вариабельны. Клетки имеют неровные, но четкие границы, в большинствепрепаратов не занимают полностью объем лакун. В части лакун определяютсярезко вакуолизированные клетки или клеточный детрит без выраженнойклеточной реакции, что приводит к формированию пустых лакун.88Рисунок 36 – Строение реберного хряща у детей с ВД: хрящевой канал (К);кровеносные и лимфатические сосуды (С), центральная зона хряща (ЦЗ):а) окраска гематоксилином и эозином, × 200; б) окраска пикросириусомкрасным, × 200; в) окраска по Маллори, × 400; г) окраска толуидиновым синим,× 400.Хондроциты и лакуны в субперихондрии и, местами, вблизи хрящевыхканалов имеют вытянутую форму, практически параллельную ходу надхрящницыили канала, каждая лакуна содержит по 1 хондроциту.
В центральной зонеотмечается увеличение количества и размеров хондроцитов в лакунах, а также –размеров лакун, форма клеток и лакун меняется на округлую, формируютсяизогенные группы хондроцитов (см рисунки 33 – 40).В матриксе реберных хрящей отмечается неравномерное расположениехрящевых лакун (см. стр. 59): видны как гипер-, так и гиполакунарные зоны, впоследних видны бесклеточные участки (см. рисунок 34).89Рисунок 37 – Строение реберного хряща у детей с ВД (поверхностные отделысубперихондрия): нативный матрикс (НМ); хрящевой канал (К); хондроциты(ХЦ) с липидными каплями (красная стрелка); хрящевая лакуна (Л);кровеносные и лимфатические сосуды (С); в просвете кровеносных сосудоввидны форменные элементы (желтая стрелка); бесклеточный участок –звездочка (*), полутонкий срез, окраска MAFT, × 1 000.Нативный матрикс реберного хряща у детей с ВД грудной клеткихарактеризуется гомогенностью и, в зависимости от топографии, различается потинкториальным свойствам (см.
рисунки 33 – 43).В субперихондрии матрикс, преимущественно эозинофилен, при окраскепикросириусом красным он дает желтовато-красное окрашивание, при окраске поМаллори – преимущественно синее, а при окраске MAFT – бледно-голубое. Приокраскетолуидиновымсинимматрикссубперихондрияпрактическинеокрашивается. Следует подчеркнуть, что сходные тинкториальные свойстваматрикса характерны и для отдельных участков центральной зоны, но тольковокруг хрящевых каналов (см.
рисунок 36).90Рисунок 38 – Строение реберного хряща у детей с ВД (поверхностные отделысубперихондрия): хондроциты (ХЦ); хрящевая лакуна (Л) без хондроцитов(пустая лакуна); в цитоплазме хондроцитов видны вакуоли (желтыестрелки), окраска гематоксилином и эозином, × 1 000.Рисунок 39 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):хондроциты (ХЦ); в цитоплазме хондроцитов видны вакуоли (желтыестрелки), окраска гематоксилином и эозином, × 1 000.91Рисунок 40 – Строение реберного хряща у детей с ВД (граница субперихондрияи центральной зоны): хондроциты (ХЦ); пустая хрящевая лакуна (Л); вцитоплазме хондроцитов видны вакуоли (часть представлена липиднымикаплями (красные стрелки), другие – оптически пустые (желтые стрелки);территориальный матрикс (ТМ), интертерриториальный матрикс (ИМ),полутонкий срез, окраска MAFT, × 1 000.Исключение составляет лишь окраска MAFT: характеристики матриксавокруг хрящевых каналов практически идентичны другим участкам центральнойзоны (см.
рисунок 37).Матрикс центральной зоны в других участках характеризуется наличиемчеткой хондронной структуры (см. стр. 26) с формированием территориальнымматриксом «картовидных» областей или «короны» (см. рисунки 33 – 43).92Рисунок 41 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):хондроциты (ХЦ); территориальный матрикс (ТМ) в виде «картовидныхобластей», интертерриториальный матрикс (ИМ), окраска пикросириусомкрасным, × 400.Рисунок 42 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):хондроциты (ХЦ), формирующие изогенные группы; территориальныйматрикс (ТМ), интертерриториальный матрикс (ИМ), окраска по Маллори,× 400.93Рисунок 43 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):хондроциты (ХЦ), формирующие изогенные группы; территориальныйматрикс (ТМ) в виде «короны», интертерриториальный матрикс (ИМ),окраска толуидиновым синим, × 400.У детей, страдающих ВД грудной клетки, во всех препаратах реберныххрящей, преимущественно, в их центральной зоне среди нативного матриксаопределяются мозаично расположенные очаги фибриллизации матрикса четырехтипов – Ф1 – Ф4 (см.
рисунки 44 – 46), выделенные и описанные ранее в группеконтроля (см. стр. 64).При окраске гематоксилином и эозином волокна очагов фибриллизацииэозинофильны (хотя встречаются очаги Ф1 – Ф3 типов характеризующиесябазофилией – см. рисунок 44г), окрашиваются в красный цвет пикросириусомкрасным, в различные оттенки синего – при окраске по Маллори (за исключениемФ4 типа, который не дает окрашивание – см. рисунок 45 в). При окраскетолуидиновым синим в очагах Ф1-Ф4 типов отмечается более неравномерная, чемв нативном матриксе, метахромазия. При окраске MAFT волокна Ф1 – Ф4 типовокрашиваются идентично нативному матриксу.94Рисунок 44 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):нативный матрикс (НМ); 4 типа фибриллизации матрикса (Ф1 – Ф4);щелевидные полости (желтые стрелки), окраска гематоксилином и эозином:а) × 200; б – г) × 400.В фокусах фибриллизации Ф1 и Ф2 типов часто встречаются крупныелакуны с многоклеточными изогенными группы хондроцитов (см.
рисунок 46 а).Внутри этих лакун, как отдельные хондроциты, так и их крупные кластерынаходятся в состоянии апоптоза или выраженной вакуолизации, приводящей краспаду цитоплазмы; в результате внутри лакуны определяется клеточный детрит(см. рисунок 46 б). В ряде участков фрагменты детрита видны среди волокон Ф3типа (см. рисунок 46 в).При этом в очагах Ф1 и Ф2 типов некоторые лакуны приобретаютщелевидную форму и нередко достигают крупных размеров (см. рисунки 44 а – г,45 а и г). В отдельных участках при разрушении стенок лакун их содержимоесливается с волокнами Ф1 и Ф2 типов.95Рисунок 45 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):нативный матрикс (НМ); 4 типа фибриллизации матрикса (Ф1 – Ф4);а и б) окраска пикросириусом красным, × 200; в) окраска по Маллори, × 400;г) окраска по Маллори, × 1 000; д и е) окраска толуидиновым синим, × 400.Прииспользовавниифазово-контрастной,темнопольнойиполяризационной микроскопии, более четко видно волокнистое строениенадхрящницы, хрящевых каналов и очагов фибриллизации матрикса Ф1 – Ф4типов, а также – неоднородное строение нативного матрикса реберного хряща(см.
рисунки 47 – 51).96Рисунок 46 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):нативный матрикс (НМ); 3 типа фибриллизации матрикса (Ф1 – Ф3);фрагменты разрушенных хондроцитов (желтые стрелки): а) гигантскиелакуны с многочисленными хондроцитами - звездочка (*), окраскатолуидиновым синим, × 400; б) полутонкий срез, окраска MAFT, × 1 000;в) окраска по Маллори, × 1 000; г) окраска толуидиновым синим, × 1 000.Рисунок 47 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, хрящевой канал – К, центральная зона хряща – ЦЗ;фазово-контрастная микроскопия, окраска пикросириусом красным, × 100.97Рисунок 48 – Строение реберного хряща у детей с ВД: в матриксе виднатонкая сеточка коллагеновых волоконец (стрелки), фазово-контрастнаямикроскопия, окраска пикросириусом красным, × 1 000.Рисунок 49 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, хрящевой канал – К, центральная зона хряща – ЦЗ;темнопольная микроскопия, окраска пикросириусом красным, × 100.98Рисунок 50 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, хрящевой канал – К, центральная зона хряща – ЦЗ;полярационная микроскопия, окраска пикросириусом красным, × 100.При фазово-контрастной микроскопии, по сравнению с обычной световой,набольшихувеличенияхвнативномматриксеболеечетковиднынемногочисленные скопления мельчайших, тонких волоконец (см.
рисунок 48).При темнопольной и поляризационной микроскопии матрикс глубоких слоевреберного хряща дает неравномерное свечение, менее интенсивное, чем унадхрящницы (см. рисунки 49, 50). Поляризационная микроскопия срезов,окрашенных пикросириусом красным, дает анизотропию надхрящницы соранжево-красным спектром и нежную желтовато-зеленую в нативном матриксе.Использование вышеуказанных методов также позволяет более четковидеть волокнистое строение фокусов фибриллизации Ф1 – Ф4 типов (см.рисунок 51). При темнопольной и поляризационной микроскопии матрикс всехтипов фибриллизации дает более выраженное свечение, чем нативный, при этомнаибольшая интенсивность свечения отмечается в очагах Ф1 – Ф3 типов, близкаяк таковой у надхрящницы (см.
рисунки 49 и 50).99Рисунок 51 – Строение реберного хряща у детей с ВД (центральная зона):нативный матрикс (НМ); 4 типа фибриллизации матрикса (Ф1 – Ф4),окраска пикросириусом красным: а и б – фазово-контрастная микроскопия:а) × 1 000; б) × 200 в и г – темнопольная микроскопия, д и е – поляризационнаямикроскопия: в – е) × 200.Наблюдаемая анизотропия очагов Ф1 – Ф3 типов характеризуется,преимущественно, желто-оранжевым и оранжево-красным спектрами, в то время,Ф4 – нежным желтовато-зеленоватым и более ярким, чем у нативного матрикса.При ИГХ-исследовании (рисунок 52) в надхрящнице и в периферическойчасти хрящевых каналов отмечается экспрессия коллагена I и III типов, при этомматрикс гиалиновой хрящевой ткани и хондроциты его не экспрессируют.Коллаген II типа экспрессируется в матриксе гиалиновой хрящевой ткани и100встречается в цитоплазме хондроцитов, в то время, как в надхрящнице и каналахон отсутствует.Рисунок 52 – Иммуногистохимическая характеристика реберного хряща удетей с ВД: надхрящница – Н, субперихондрий – СП, центральная зона хряща– ЦЗ; хрящевой канал – К; иммунопероксидазный метод: а и б) антитела кколлагену I типа: а) × 100; б) × 50; в) антитела к коллагену II типа, × 100;г) бесклеточный участок – звездочка (*), антитела к коллагену III типа,× 200.ИГХ-исследование очагов фибриллизации Ф1 – Ф4 типов показало, чтоколлагеновый состав волокон идентичен составу нативного матрикса: волокнасостоят из коллагена II типа, при этом коллагены I и III типов в их составе необнаруживаются (рисунок 53).101Рисунок 53 – Иммуногистохимическая характеристика реберного хряща удетей с ВД: нативный матрикс (НМ); 4 типа фибриллизации матрикса (Ф1 –Ф4); гигантские лакуны – звездочка (*); иммунопероксидазный метод:а и б) антитела к коллагену I типа, × 400; в) антитела к коллагену II типа,× 400; г) антитела к коллагену II типа, × 200; д и е) антитела к коллагену IIIтипа, × 200.При НЛОМ надхрящница, хрящевые каналы и гиалиновая хрящевая тканьдают два типа сигнала: ГВГ, свидетельствующий о наличии коллагеновыхмолекул в составе морфологической структуры, и ДФФ, свидетельствующий оналичии флуорофоров (см.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
