Диссертация (1140411), страница 14
Текст из файла (страница 14)
рисунок 54).102Рисунок 54 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, центральная зона – ЦЗ, хрящевой канал – К, нативныйматрикс – НМ (территориальный матрикс – ТМ, интертерриториальныйматрикс – ИМ), хондроциты – ХЦ; 4 типа фибриллизации матрикса (Ф1 –Ф4), гигантская лакуна – звездочка (*), а – г, НЛОМ, режим ГВГ + ДФФ,× 600.ГВГ-сигнал полностью отсутствует в хондроцитах, однако определяется внадхрящнице, в нативном матриксе (в виде нежной сеточки) и в очагахфибриллизации Ф1-Ф4 типов. При этом очаги фибриллизации дают болеевыраженный сигнал ГВГ по сравнению с нативным матриксом, а хондроцитыхарактеризуются наибольшей интенсивностью ДФФ-сигнала.
Также ДФФопределяется во всех остальных компонентах реберного хряща.При ТЭМ реберного хряща у детей с ВД грудной клетки определяютсяодноядерные хондроциты, которые характеризуются различной формой иразмерами. В ядрах находится, эу- и гетерохроматин, ядрышки четко неопределяются. В цитоплазме видны элементы синтетического аппарата, гранулы103гликогена и липидные капли. Часть хондроцитов в своей цитоплазме содержитвакуоли разных размеров (рисунок 55).Рисунок 55 – Ультраструктура реберного хряща у детей с ВД, ТЭМ:а) глубокие отделы субперихондрия: хондроциты – ХЦ, вакуоли – красныестрелки, × 15 000; б) нативный матрикс с гранулами протеогликанов иколлагеновыми фибриллами диаметром до 100 нм с поперечнойисчерченностью 60 – 70 нм, × 40 000.Нативный матрикс хряща представлен разнонаправленными фибрилламитолщиной до 120 нм с периодом поперечной исчерченности 55 – 70 нм, которыерасположенысредифибриллярно-гранулярногоматрикса(протеогликаны)(рисунок 55).
В отдельных участках коллагеновые фибриллы приобретаютпараллельную ориентацию без сближения друг с другом и утолщения.В очагах фибриллизации матрикса Ф1 – Ф4 типов видны фибриллы спериодом поперечной исчерченности 55-70 нм и толщиной более 100 – 120 нм,достигающей 900 нм, которые расположены среди матрикса с неравномернымраспределением фибриллярно-гранулярного вещества (рисунок 56). В частифибрилл нативного матрикса и очагов фибриллизации Ф1 – Ф4 типовопределяются признаки латеральной агрегации: в составе фибрилл определяютсясубфибриллы, которые сливаются между собой, при этом фибриллы, сливаясьмежду собой, могут сами образовывать агрегаты фибрилл.104Рисунок 56 – Ультраструктура реберного хряща у детей с ВД, ТЭМ: а и б: Ф1тип фибриллизации: а) коллагеновые фибриллы диаметром 140 – 500 нм,× 12 000; б) параллельные коллагеновые фибриллы с периодом 60 нм идиаметром 300 и 900 нм, × 20 000; в) Ф2 тип фибриллизации: коллагеновыефибриллы диаметром до 300 нм с периодом 55 – 60 нм, неравномерноераспределение гранул протеогликанов, × 20 000; г) Ф4 тип фибриллизации:коллагеновые фибриллы диаметром 100 – 200 нм с периодом 55 – 60 нм,неравномерное распределение гранул протеогликанов, × 40 000.При СЭМ нативный матрикс хряща у детей, страдающих ВД груднойклетки, представляет собой трехмерную сеть из тонких, разнонаправленных,анастомозирующих между собой коллагеновых фибрилл диаметром до 100 – 120нм (см.
рисунок 57).105Рисунок 57 – Ультраструктура нативного матрикса реберного хряща у детейс ВД, СЭМ × 100 000.В то же время, фибриллы в участках фибриллизации матрикса Ф1-Ф4 типовхарактеризуются диаметром, превышающим 100 нм (см. рисунок 58). Так, вочагах Ф1 и Ф2 типов диаметр фибрилл достигает 350 – 500 нм. В очагах Ф1 типаотмечается параллельный их ход, в то время как в очагах Ф2 типа – фибриллыпереплетаются друг с другом.
В части препаратов определяются агретатыфибрилл суммарной толщиной до 3 000 – 5 000 нм (см. рисунок 58 а и б).Среди очагов Ф1 и Ф2 типов также определяются очаги типа Ф3,представленные фибриллами толщиной до 100-250 нм, переплетающимися междусобой (см. рисунок 58 в). Диаметр фибрилл в очагах Ф4 типа фириллизацииматрикса достигает 400 нм, а архитектоника, аналогична архитектоникенативного матрикса (см.
рисунок 58 г).Признаки латеральной агрегации в вышеуказанных типах фибриллизациитакже проявляются в виде наличия субфибрилл в фибриллах и крупных агрегатовфибрилл размерами до 1,5 мкм.106Рисунок 58 – Ультраструктура фокусов фибриллизации реберного хряща удетей с ВД, СЭМ: а) Ф1 тип фибриллизации; агрегат фибрилл толщиной до5 000 нм (красная стрелка), × 8 000; б) Ф2 тип фибриллизации; агрегатыфибрилл толщиной до 3 000 нм (красная стрелка), × 8 000; в) среди фибриллФ2 типа скопления фибрилл Ф3 типа (красная стрелка), × 2 000; г) Ф4 типфибриллизации; агрегаты фибрилл диаметром до 800 нм (стрелка), × 10 000.При АСМ нативный матрикс хряща и фокусы фибриллизации матрикса Ф1Ф4 типов представлены коллагеновыми фибриллами с периодом поперечнойисчерченности 60 – 70 нм, имеющими трехмерную структуру, идентичнуюструктуре, описанной при СЭМ (см.
рисунки 59 и 60). Максимальный диаметрфибрилл нативного матрикса достигает 120 нм, в то время как диаметр фибрилл всоставе Ф1 – Ф4 типов фибриллизации значительно его превышает, при этомсуммарная толщина агрегатов фибрилл может доходить до 1 500 нм.107Рисунок 59 – Ультраструктура нативного матрикса реберного хряща у детейс ВД: агрегат тонких фибрилл суммарной толщиной 1 мкм – звездочка (*),АСМ, размер скана 3 × 3 мкм.Морфометрическое исследование реберных хрящей у детей с ВД груднойклетки показало, что среднее относительное число лакун в 10 полях зрения внорме составляет 144,61 лакуны (95 % ДИ составляет +/- 35,4), средняяотносительная доля пустых лакун – 0,791 лакуны (95 % ДИ составляет +/- 0,022).Частота встречаемости гиперлакунарных зон в реберных хрящах у детей сВД составляет 15,00 % (95 % ДИ составляет +/- 5,80%), гиполакунарных – 72,80 %(95 % ДИ составляет +/- 7,10 %).
Частота встречаемости хрящевых каналовсоставляет 10,00% (95 % ДИ составляет +/- 4,9 %), а их средняя относительнаяплощадь – 15682,31 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 10947,16 мкм2).108Рисунок 60 – Ультраструктура матрикса реберного хряща у детей с ВД,АСМ: а) Ф1 тип фибриллизации; агрегаты фибрилл толщиной до 1 500 нм(красная стрелка), размер скана 3 × 3 мкм; б) Ф2 тип фибриллизации;агрегаты фибрилл толщиной до 1500 нм (красная стрелка), размер скана 5 × 5мкм; в) Ф3 тип, фибриллы толщиной до 2 000 нм, переплетающиеся междусобой, размер скана 5 × 5 мкм; г) Ф4 тип фибриллизации; фибриллыдиаметром до 300 нм формируют агрегаты до 1 000 нм (стрелка), размерскана 5 × 5 мкм.Средняя частота встречаемости фокусов фибриллизации в 10 полях зрения внорме составляет: для Ф1 типа: 25,3 % (95 % ДИ составляет +/- 7,1 %); для Ф2 типа: 81,2 % (95 % ДИ составляет +/- 6,7 %); для Ф3 типа: 4,7 % (95 % ДИ составляет +/- 3,8 %); для Ф4 типа: 91,8 % (95% ДИ составляет +/- 4,7 %).Средняя относительная площадь фокусов фибриллизации в 10 полях зренияв норме составляет: для Ф1 типа: 92 371,31 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 48163,35 мкм2);109 для Ф2 типа: 260 343,60 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 118936,80 мкм2); для Ф3 типа: 338,57 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 277,42 мкм2); для Ф4 типа: 489 277,00 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 156163,00 мкм2); суммарная площадь: 842 330,50 мкм2 (95 % ДИ составляет +/135612,50 мкм2).Проведенный корреляционный анализ выявил следующие статистическидостоверные корреляции (даны коэффициенты корреляции): междуобщимколичествомлакунивозрастом:минус0,620(p = 0,010429); между общим количеством лакун и очагами фибриллизации: для Ф2 типа: минус 0,636739 (p = 0,004490); между возрастом и площадью различных типов фибриллизации: для Ф2 типа: 0,644 (p = 0,01); для Ф3 типа: 0,652 (p = 0,008); между площадью различных типов фибриллизации: между Ф4 и Ф1: минус 0,576 (p = 0,016), между Ф4 и Ф2: минус 0,554 (p = 0,021); между степенью внешних признаков ДСТ и: площадью Ф2 типа: 0,639 (p = 0,013); площадью Ф3 типа: 0,603 (p = 0,02); между степенью висцеральных признаков ДСТ и: площадью Ф2 типа: 0,537 (p = 0,023); площадью Ф3 типа: 0,515 (p = 0,045).Строение реберных хрящей у всех детей из группы с ВД грудной клетки, вцелом, одинаковое, независимо от их возраста и пола.
При сравнительномизученииреберныххрящейвыявляютсявозрастныеизмененияввидеуменьшения количества мелких, веретеновидных лакун в центральной зоне,увеличения крупных, овальных лакун, содержащих по 3 – 4 хондроцита игигантских лакун вблизи Ф1 и Ф2 типов фибриллизации матрикса, а также –110более редкого расположения лакун в матриксе и увеличения частотывстречаемостиочаговфибриллизацииматриксаФ2иФ3типов,чтоподтверждается данными корреляционного анализа. Корреляционный анализтакже подтверждает взаимосвязь между площадью Ф2 и Ф3 типов фибриллизацииматрикса и степенью выраженности клинических признаков ДСТ.Заключение (по главе)Строение реберного хряща у детей, страдающих ВД грудной клетки, вцелом, соответствует данным литературы (см. главу «обзор литературы»), однако,также, как и в группе контроля, в матриксе хряща были обнаружены Ф1 – Ф4типы фибриллизации, состоящие из коллагеновых фибрилл II типа с диаметром,значительно превышающим диаметр фибрилл нативного матрикса.111Глава 5.
Морфологическая характеристика реберных хрящей у детей скилевидной деформацией грудной клеткиРеберные хрящи у детей, страдающих КД грудной клетки состоят изгиалиновой хрящевой ткани, которая снаружи покрыта надхрящницей разнойтолщины; под надхрящницей определяется субперихондрий, который без четкихграниц переходит в центральную зону с хондронной структурой (рисунки 61 –63).Рисунок 61 – Строение реберного хряща у детей с КД: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, хрящевой канал – К, кровеносные сосуды – С,центральная зона хряща – ЦЗ, бесклеточные участки – звездочки (*): а)окраска гематоксилином и эозином, × 100; б) окраска пикросириусом красным,× 100; в) окраска по Маллори, × 50; г) окраска толуидиновым синим, × 100.В надхрящнице определяются два слоя: фиброзный слой с коллагеновымиволокнами и фибробластами, а также – хондрогенный, содержащий хондробласты(см.