Диссертация (1140411), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Ядра содержат эу- игетерохроматин, ядрышки четко не определяются. В цитоплазме видны элементысинтетического аппарата (гранулярная эндоплазматическая сеть, комплексГольджи), гранулы гликогена и липидные капли. В цитоплазме частихондроцитов видны вакуоли разных размеров (см. рисунок 26).75Рисунок 25 – Строение реберного хряща в норме: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, центральная зона – ЦЗ, хрящевой канал – К, нативныйматрикс – НМ (территориальный матрикс – ТМ, интертерриториальныйматрикс – ИМ), хондроциты - ХЦ; 4 типа фибриллизации матрикса (Ф1 –Ф4), гигантская лакуна – звездочка (*), а –г, НЛОМ, режим ГВГ + ДФФ, × 600.Нативный матрикс хряща представлен фибриллами толщиной до 120 нм,имеющими поперечную исчерченность с периодом 55 – 70 нм.
Фибриллы имеютразнонаправленный ход и расположены среди фибриллярно-гранулярногоматрикса (протеогликаны). Местами коллагеновые фибриллы приобретаютпараллельную ориентацию, не сближаясь друг с другом и не утолщаясь (см.рисунок 26 а – г).В очагах фибриллизации матрикса всех типов определяются фибриллы спериодом поперечной исчерченности 55 – 70 нм и толщиной более 100 – 120 нм,расположенные среди матрикса с неравномерным распределением фибриллярногранулярного вещества (см. рисунок 27). Так, в очагах Ф1 и Ф2 типов толщинафибрилл достигает 700 и 500 нм соответственно. В очагах Ф1 типа эти фибриллы76имеют параллельный ход, а в очагах Ф2 типа – располагаются под углом друг кдругу (см. рисунки 27 а – в).Рисунок 26 – Строение реберного хряща в норме: хондроциты – ХЦ, вакуоли –красные стрелки, липидные капли – желтые стрелки, гранулы гликогена –звездочка (*), ТЭМ: а) субперихондрий, × 6 000; б) центральная зона,хондроцит слева в состоянии вакуолизации, справа – апоптоза, × 8 000;в и г: интертерриториальный матрикс с фибриллами коллагена (диаметр до100 нм, период поперечной исчерченности – 60 – 70 нм) и грануламипротеогликанов, × 40 000.В очагах Ф4 типа определяются фибриллы толщиной 100 – 200 нм саналогичным периодом поперечной исчерченности (см.
рис. 27 г). В очагах Ф3типа среди волокон толщиной 100 – 200 нм, местами определяются хондроциты скрупными липидными каплями (см. рисунок 28).77Рисунок 27 – Строение реберного хряща в норме, ТЭМ: а и б: Ф1 типфибриллизации: а) коллагеновые фибриллы диаметром 130 – 500 нм, × 15 000;б) параллельные коллагеновые фибриллы с периодом 60 нм и диаметром 10 –200 нм, признаки латеральной агрегации фибрилл с формированием фибриллыдиаметром 700 нм (стрелка), неравномерное распределение гранулпротеогликанов, × 50 000; в) Ф2 тип фибриллизации: коллагеновые фибриллыдиаметром до 400 нм с периодом 55 – 60 нм, неравномерное распределениегранул протеогликанов, × 50 000; г) Ф4 тип фибриллизации: коллагеновыефибриллы диаметром 100 – 200 нм с периодом 55 – 60 нм, равномерноераспределение гранул протеогликанов, × 25 000.В отдельных участках нативного матрикса и очагов Ф1 – Ф4 типовфибриллизации матрикса определяются признаки латеральной агрегации: в частифибрилл видны субфибриллы, из которых они и состоят, а сами фибриллыобразовывают более крупные агрегаты, общей толщиной до 1,5 мкм.
Толщинасубфибрилл значительно меньше, чем у фибрилл, однако периоды поперечнойисчерченности полностью совпадают.78Рисунок 28 – Строение реберного хряща в норме: хондроцит (ХЦ) слипидными каплями (красные стрелки), по периферии коллагеновыефибриллы Ф3 типа толщиной до 200 нм; вверху фрагменты разрушенногохондроцита, ТЭМ, × 10 000.При СЭМ нативный матрикс хряща представляет собой трехмерную сеть изтонких, разнонаправленных, анастомозирующих между собой коллагеновыхфибрилл диаметром до 100 – 120 нм (см. рисунок 29). В участках фибриллизацииматрикса всех 4 типов определяются фибриллы толщиной более 100 нм (см.рисунок 30).79Рисунок 29 – Ультраструктура нативного матрикса реберного хряща, СЭМ× 50 000.Рисунок 30 – Ультраструктура фокусов фибриллизации реберного хряща внорме, СЭМ: а) Ф1 тип фибриллизации; агрегаты фибрилл толщиной до1500 нм (красная стрелка), × 50 000; б) Ф2 тип фибриллизации; агрегатыфибрилл толщиной до 1500 нм (красная стрелка), × 50 000; в) среди фибриллФ2 типа скопления фибрилл Ф3 типа (красная стрелка), × 5 000; г) Ф4 типфибриллизации; агрегаты фибрилл диаметром до 1000 нм (стрелка), × 50 000.80В очагах Ф1 и Ф2 типов толщина фибрилл достигает 350 – 400 нм.
В очагахФ1 типа эти фибриллы имеют параллельный ход, а в очагах Ф2 типа –переплетаются друг с другом (см. рисунки 30 а, б). В этих участках в частифибрилл также определяются субфибриллы, из которых они состоят и диаметркоторых значительно меньше, а сами фибриллы образовывают более крупныеагрегаты, общей толщиной до 1,5 мкм.Среди очагов Ф1 и Ф2 типов также определяются очаги типа Ф3. На СЭМони представлены фибриллами диаметром до 100 – 250 нм, переплетающимисямежду собой (см. рисунок 30 в).
В очагах Ф4 типа матрикс представляет собойтрехмерную сеть разнонаправленных фибрилл диаметром до 300 нм сархитектоникой, аналогичной архитектонике нативного матрикса (см. рисунок30 г).В вышеуказанных типах фибриллизации также встречаются признакилатеральной агрегации (субфибриллы в составе фибрилл и крупные агрегатыфибрилл толщиной до 1,5 мкм).При АСМ нативный матрикс хряща также представляет собой трехмернуюсеть из тонких, анастомозирующих между собой коллагеновых фибрилл спериодом поперечной исчерченности 60 – 70 нм и диаметром до 100 нм, а вматриксе встречаются единичные агрегаты фибрилл, суммарной толщиной до1 мкм (см. рисунок 31).При АСМ в участках фибриллизации матрикса всех 4 типов определяютсяфибриллы толщиной более 100 – 120 нм, формирующие агрегаты суммарнойтолщиной до 1,5 мкм (см. рисунок 32).
Период поперечной исчерченности уфибрилл полностью совпадает с периодом фибрилл нативного матрикса. Приэтом, каждая фибрилла состоит из субфибрилл меньшего диаметра с аналогичнымпериодом поперечной исчерченности.81Рисунок 31 – Ультраструктура нативного матрикса реберного хряща внорме: агрегат тонких фибрилл (диаметр до 100 нм) суммарной толщиной 1мкм – звездочка (*), АСМ, размер скана 5 × 5 мкм.Морфометрическое исследование показало, что среднее относительноечисло лакун в 10 полях зрения в норме составляет 198,64 лакуны (95 % ДИсоставляет +/- 20,8), средняя относительная доля пустых лакун – 0,622 лакуны(95 % ДИ составляет +/- 0,011).
Таким образом, в реберном хряще в норме нижняяграница 95 % ДИ для среднего равна 177,74 лакун, а верхняя – 219,54 лакун.Таким образом, можно считать, что поле зрения, где количество клетоксоставляет менее 177 является гиполакунарной зоной, а более 220 –гиперлакунарной.82Рисунок 32 – Ультраструктура матрикса реберного хряща в норме, АСМ:а) Ф1 тип фибриллизации; агрегаты фибрилл толщиной до 1 500 нм (краснаястрелка), размер скана 3 × 3 мкм; б) Ф2 тип фибриллизации; агрегатыфибрилл толщиной до 1 500 нм (красная стрелка), размер скана 3 × 3 мкм;в) Ф3 тип, агрегаты фибрилл толщиной до 1 500 нм, размер скана 5 × 5 мкм;г) Ф4 тип фибриллизации; агрегаты фибрилл диаметром до 1 000 нм(стрелка), размер скана 3 × 3 мкм.Частота встречаемости гиперлакунарных зон в группе контроля составляет36,70 % (95 % ДИ составляет +/- 6,50 %), гиполакунарных – 42,50 % (95 % ДИсоставляет +/- 6,70 %).
Частота встречаемости хрящевых каналов составляет15,40 % (95 % ДИ составляет +/- 5,0 %), а их средняя относительная площадь –21 639,44 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 11799,50 мкм2).Средняя частота встречаемости фокусов фибриллизации в 10 полях зрения внорме составляет: для Ф1 типа: 17,1 % (95 % ДИ составляет +/- 5,2 %); для Ф2 типа: 45,0 % (95 % ДИ составляет +/- 6,7 %); для Ф3 типа: 5,8 % (95 % ДИ составляет +/- 3,3 %);83 для Ф4 типа: 77,9 % (95 % ДИ составляет +/- 5,6 %).Средняя относительная площадь фокусов фибриллизации в 10 полях зренияв норме составляет: для Ф1 типа: 72 303,01 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 39 111,01 мкм2); для Ф2 типа: 76 744,96 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 42 552,45 мкм2); для Ф3 типа: 714,46 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 554,64 мкм2); для Ф4 типа: 251 328,60 мкм2 (95 % ДИ составляет +/- 93 774,46 мкм2); суммарная площадь: 401 091,03 мкм2 (95 % ДИ составляет +/120 920,90 мкм2).Проведенный корреляционный анализ выявил следующие статистическидостоверные корреляции (даны коэффициенты корреляции): между общим количеством лакун и возрастом: минус 0,615 (p =0,002306); между долей пустых лакун и средней относительной площадьюхрящевых каналов: минус 0,796719 (p = 0,000009) между общим количеством лакун и очагами фибриллизации: для Ф1 типа: минус 0,486111 (p = 0,021800); для Ф2 типа: минус 0,521322 (p = 0,012843); между возрастом и площадью различных типов фибриллизации: всех типов (суммарно): 0,467 (p = 0,001), Ф1 тип: 0,868 (p < 0,001); Ф3 тип: 0,557 (p = 0,005); Ф2 тип: 0,422 (p = 0,04); между площадью различных типов фибриллизации: между Ф2 и Ф1: 0,48 (p = 0,018); между Ф3 и Ф1: 0,594 (p = 0,002); между Ф3 и Ф2: 0,513 (p = 0,01).В норме строение реберных хрящей, в целом, одинаково у всех детей вгруппе контроля независимо от их возраста и пола.
Однако, с возрастом в84центральной зоне хрящей уменьшается количество мелких, веретеновидныхлакун, при этом количество крупных, овальных лакун с 3 – 4 клетками, а такжегигантских лакун вблизи очагов Ф1 и Ф2 типов фибриллизации матриксаувеличивается. При увеличении возраста хрящевые лакуны в матриксе хрящавстречаются несколько реже, в то время, как увеличивается количество и площадьочагов фибриллизацииматриксаФ1–Ф3типов фибриллизации, чтоподтверждается данными корреляционного анализа.Заключение (по главе)Описанное строение реберного хряща, в целом, соответствует даннымлитературы (см. главу «обзор литературы»), однако в матриксе хряща впервые вмире были обнаружены и выделены различные типы фибриллизации, каждый изкоторых характеризуется особыми свойствами.
При этом все типы очаговфибриллизации содержат коллагеновые фибриллы II типа, диаметр которыхзначительно превышает диаметр фибрилл нативного матрикса.85Глава 4. Морфологическая характеристика реберных хрящей у детей своронковидной деформацией грудной клеткиПри гистологическом исследовании реберные хрящи у детей, страдающихВД грудной клетки, представлены гиалиновой хрящевой тканью, покрытойснаружинадхрящницей.Толщинанадхрящницывариабельна,поднейрасполагается субперихондрий, который плавно переходит в центральную зону,имеющую хондронную структуру (рисунки 33 – 35).Рисунок 33 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н,субперихондрий – СП, хрящевой канал – К, кровеносные сосуды – С,центральная зона хряща – ЦЗ: а) окраска гематоксилином и эозином, × 50;б) окраска пикросириусом красным, × 100; в) окраска по Маллори, × 50;г) окраска толуидиновым синим, × 100.Надхрящница состоит из фиброзного и хондрогенного слоев и формируетхрящевые каналы с кровеносными и лимфатическими сосудами (см.
рисунки 34 –37). В фиброзном слое определяются немногочисленные зрелые фибробласты имногочисленные, толстые коллагеновые волокна, формирующие пучки иимеющие характерные тинкториальные свойства (эозинофильны, красные приокраске пикросириусом красным и темно-синие – при окраске по Маллори, синие86при окраске MAFT). При этом надхрящница не окрашивается толуидиновымсиним, что свидетельствует об отсутствии в ней ГАГов. В хондрогенном слоеопределяются хондробласты, содержащими гиперхромные ядра и узкий ободокцитоплазмы.Рисунок 34 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н (1 –фиброзный слой с коллагеновыми волокнами (КВ) и фибробластами (ФБЛ);2 – хондрогенный слой с хондробластами (ХБЛ)); нативный матрикс (НМ);субперихондрий (СП) и центральная зона (ЦЗ) с хондроцитами (ХЦ) внутрихрящевых лакун (Л); хрящевой канал (К); кровеносные и лимфатическиесосуды (С), бесклеточный участок – звездочка (*) окраска гематоксилином иэозином, × 200.Хрящевые каналы являются инвагинациями надхрящницы вглубь матриксахряща и содержат рыхлую волокнистую соединительную ткань с болеемногочисленными, чем в надхрящнице кровеносными и лимфатическимисосудами, которые берут из нее начало.87Рисунок 35 – Строение реберного хряща у детей с ВД: надхрящница – Н (1 –фиброзный слой с коллагеновыми волокнами (КВ) и фибробластами (ФБЛ);2 – хондрогенный слой с хондробластами (ХБЛ)); нативный матрикс (НМ);субперихондрий (СП) и центральная зона (ЦЗ) с хондроцитами (ХЦ) внутрихрящевых лакун (Л), полутонкий срез, окраска MAFT, × 200.В матриксе гиалиновой хрящевой ткани находятся хрящевые лакуны,содержащие по 1 – 4 хондроцита (см.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
