Диссертация (1154362), страница 52
Текст из файла (страница 52)
35].2.3. Подготовка объекта к деятельности:В некоторых случаях объект исследуют целиком без приготовления срезов и,следовательно, без предварительного уплотнения. Обычно такими объектами являютсятонкие структуры – серозные, мозговые, зародышевые оболочки, тонкостенные сосуды ит.д. Препараты объектов, исследуемых целиком, называются тотальными.
Приизготовлении тотальных препаратов сальника, брыжейки, мозговых оболочек из нихвырезают кусочки и опускают в фиксатор. При изучении зародышевых оболочек можноввести фиксатор шприцем в амнион. Если орган может при фиксации изменить своюформу и деформировать покрывающую его оболочку, его прикалывают стекляннымииглами оболочкой вверх к пластинке пробки [Там же, с. 223].3. Указание субъектов деятельности:3.1.
Идентификация субъекта (субъектов) деятельности:275Диспансеризация. Больные с заболеваниями печени ставятся на диспансерныйучет. Их два раза в год, а при необходимости и чаще, наблюдает врач, чтобысвоевременно предупредить обострение и прогрессирование болезни, появление ееосложнений [VII, с. 336]. Очень важной задачей является психологическая реабилитациябольных.
Она включает меры, направленные на более быструю адаптацию к болезни,ликвидацию чувства тревоги, неуверенности в себе в связи с заболеванием. В этомзначительная роль принадлежит медицинской сестре [Там же, с. 366].3.2. Характеристика полномочий субъектов деятельности (указаниеих прав и/или обязанностей):В повышении эффективности лечения значительная роль отводится медицинскойсестре. Она обязана внимательно следить за состоянием больного, его кожей, посколькуна отечной коже быстрее образуются пролежни. Медицинская сестра ведет наблюдение задеятельностью кишечника и состоянием пульса, выделением мочи кишечника исостоянием пульса, выделением мочи (определяет количество и проводит осмотрвыделенной мочи на предмет изменения цвета, прозрачности).
Обо всех измененияхнеобходимо докладывать врачу [Там же, с. 357].4. Указание результата (результатов) деятельности.4.1. Идентификация результата деятельности:В результате окрашивания ядра клеток должны быть темно-коричневыми(или темно-фиолетовыми при окрашивании гематоксилином Эрлиха), коллагеновыеволокна – красными, мышечная ткань, цитоплазма различных клеток и эритроциты– желтыми [VI, с.
223]; Методика проведения реакции. Результат: белки окрашиваютсяв цвета от розового до красно-фиолетового [Там же, с. 34]; Методика окрашиванияцеллоидинированных срезов. Результат: гликоген и другие углеводные компонентыокрашиваются в красный цвет. Исчезновение краски после перевариваниягликогена α-амилазой, забуфренной 4 мл ацетата до рН 5,5 – 6,0 30 мин – 1 ч при 37 ͦС, свидетельствует о том, что окрашенный продукт был гликогеном [Там же, с. 35].4.2.Качественная(втомчислекачественно-оценочная)характеристика результата деятельности:В некоторых случаях проводят аускультацию брюшной полости для выслушиванияшумов на сосудах брюшного отдела аорты. Выявляющиеся при этом неясные звуки, неимеющие означенной периодичности, обусловлены перистальтикой кишечника. Притяжелых заболеваниях брюшной полости, когда перистальтика кишечника резкоослабевает или отсутствует, эти звуки не прослушиваются.
Это характерно длякишечной непроходимости, воспаления брюшины (перитонит). Иной развыслушиваются звуки, обусловленные трением брюшины, которая покрываетселезенку. Это явление называется шумом трения селезенки и возникает приинфарктах селезенки, реактивном воспалении брюшины в ее области [VII, с. 42].5. Указание возможного нежелательного результата деятельности:Иногда в процессе заливки на поверхности целлоидина образуется пленка. В этомслучае его глубокие слои уплотняются неравномерно. Чтобы этого избежать, необходимоудалить пленку. При плохом обезвоживании целлоидин может помутнеть. В этом случаеследует повторить процедуру, освободив материал от целлоидина в спирте с эфиром [VI,с.
208].5.1. Идентификация нежелательного результата деятельности:276Если осмиевый фиксатор приобретает коричневую окраску, значит он пришел внегодность [Там же, с. 231]; Если пропустить промывку в воде – обсушить срезфильтровальной бумагой, что иногда делают, мышечная ткань может быть окрашена врозовый цвет, а не в желтый, как полагается [Там же, с. 223].5.2.Характеристикапричиннежелательногорезультатадеятельности:Если материал крошится, то это может зависеть от слишком большого наклонаножа или от слишком тугоплавкого парафина и низкой температуры окружающейсреды… Если залитый материал отделяется от парафина или выпадает из него, причинаможет заключаться в недостаточном удалении из материала спирта или в использованиипри заливке слегка охлажденного парафина… Если срезы разрываются или покрываютсябороздками, это означает, что на ноже есть зазубрины… Закручивание срезов и ихприлипание к ножу встречаются при очень мягком парафине и высокой температуреокружающей среды… [Там же, с.
215];5.3.Указаниеспособовкоррекциинегативногорезультатадеятельности:Если на поверхности целлоидина образуется пленка, ее следует удалить, чтобыглубокие слои целлоидина равномерно уплотнялись [Там же, с. 208]. Если полногообесцвечивания не наступает, количество карболена можно увеличить [Там же, с. 32].6.
Характеристика методики выполнения деятельности может бытьпредставлен такими разновидностями:6.1. Идентификация метода:Выявление дезоксирибонуклеиновой кислоты по методу Фёльгена [Гистология1995: 31]; Выявление нуклеиновых кислот с использованием галлоцианина и хромовыхквасцов по Эйнарсону [Там же, с. 33].6.2. Указание сущности метода:Метод основан на том, что при кислотном гидролизе в ДНК освобождаютсяреакционноспособные альдегидные группы, которые затем реагируют с реактивомШиффа [Там же, с.
31]; Метод основан на окислении полисахаридов перйодатом калияили натрия с образованием альдегидных групп, дающих реакцию с фуксинсернистойкислотой [Там же, с. 34].6.3. Указание алгоритма деятельности:Профилактика. Для профилактики желчнокаменной болезни важное значениеимеют общий гигиенический режим, систематические занятия физической культурой,спортом, правильное питание (употребление овощей, нежирных, бедных холестерином ибогатых белком продуктов, регулярный прием пищи), борьба с ожирением, инфекциями,заболеваниями и нарушениями функции органов пищеварения, своевременная ликвидациязастоя желчи, отсутствие психического и физического перенапряжения [VII, с.
336].6.4. Сфера применения метода:Реакция на РНК по Браше не подходит для количественного анализа. Знаительнонадежнее выявление нуклеиновых кислот с помощью галлоцианина и хромовых квасцовпо Эйнарсону [VI, с. 33]; Заливка в парафин или целлоидин невозможна, так как прииспользовании этих методов уплотнения жиры экстрагируются [Там же, с.
35].6.5. Оценка метода (и ее обоснование):277Особое место занимают цитохимические и гистохимические методы исследованияхимического состава и метаболизма клеток и тканей, позволяющие выявлять в клеткахДНК, РНК, белки, жиры, углеводы, ферменты и др. [Там же, с.
8 – 9]. Эхокардиографиямалоинформативна в диагностике нестабильной стенокардии, так как патологическоедвижение стенок левого желудочка, выявляемое этим методом, можно обнаружить тольково время болевого эпизода [VII, с. 31].6.6. Ограничения на использование метода:К фиксации особых требований нет, но не следует употреблять фиксаторы,содержащие ртуть или бихромат [VI, с.
34]; Как до, так и после фиксации следует избегатьконтактов кусочков с водой, та как она растворяет гликоген [Там же, с. 34];7. Качественно-количественные характеристики деятельности:7.1. Локальные характеристики деятельности:Организация рабочего места лаборанта-гистолога. Рабочий стол должен бытьдостаточно устойчивым, чтобы на нем можно было работать на микротоме, и хорошоосвещенным. Его поверхность должна быть покрыта стеклом или пластмассой. На участкестола, где непосредственно производится окраска препаратов, под стекло целесообразноположить по одному листку белой и черной бумаги. На белом фоне лучше видныокрашенные срезы, на черном – неокрашенные [Там же, с.
199].7.2.Темпоральные(временные)характеристикидеятельности,действий, операций:7.2.1. Длительность (продолжительность) процедуры, действия илиоперации:Биопсийный материал обрабатывают в течение 3 – 4 дней. Однако во времяоперации по поводу опухоли неизвестной природы нередко бывает необходимопроведение срочной (экстренное) биопсии, когда на основании данных морфологическогоисследования хирург решает вопрос о необходимом объеме операции: удалить ли толькоопухоль или значительную часть окружающей здоровой ткани, а может быть, и весьпораженный орган с региональными лимфатическими узлами. В этом случае за 15 минматериал должен быть зафиксирован, нарезан, покрашен и заключен [Там же, с. 224].7.2.2. Скорость выполнения процедуры, действия или операции:Быстро переворачивают покровное стекло так, чтобы срез со средой оказалсявнизу [Там же, с.
219]. Методика окрашивания: 1) депарафинированные срезы издистиллированной воды переносят в метиловый зеленый – пиронин на 1 – 2 ч и более (до1 сут); 2) срезы быстро споласкивают водой, быстро обсушивают фильтровальнойбумагой; 3 быстро (10 – 15 с) обезвоживают и дифференцируют в абсолютном спирте илив безводном ацетоне; 4) помещают в ксилол, заключают в бальзам [Там же, с.
33].7.2.3. Кратность проведения процедур, действий, операций:Помутнение целлоидина свидетельствует о плохом обезвоживании, при этомпроцедуру следует повторить, освободив материал от целлоидина в спирте с эфиром[Там же, с. 208].Как показало исследование, основными разновидностями реализациипредписывающих тактик в АМД являются:2781.Регулятивное предписание (оформленное каксистема правил,которые должен соблюдать адресат при выполнении действия илидеятельности):Существует ряд общих правил фиксации:(1) объем фиксирующей жидкости должен не менее чем в 20 раз превышать объемфиксируемого кусочка ткани;(2) фиксатор должен иметь доступ к фиксируемому материалу со всех сторон;(3) продолжительность фиксации зависит от свойств фиксатора, прежде всего отскорости его проникновения в фиксируемые ткани;(4) различные фиксаторы сохраняют различные структурные и химическиекомпоненты клетки, поэтому при подборе фиксатора необходимо исходить из целейисследования;(5) в фиксирующие жидкости, содержащие сулему или осмий, опускатьметаллические инструменты нельзя [Там же, с.