Диссертация (1141395), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Дляулучшения растворимости гидрофобных соединений используют различныеметоды и подходы, среди которых выделяют: физические, химические ифизико-химические методы, а также некоторые технологические приемы.Немаловажным процессом при создании инъекционного ЛП являетсястерилизующаяфильтрация,длякоторойвосновномиспользуют49мембранные фильтры с размером пор 0,22мкм.Длястабилизацииполученного инъекционного ЛП применяют лиофилизацию, что позволяетполучить легко растворимый в воде препарат, у которого практическиполностью сохранены все характеристики исходного вещества.50ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬГлава 2.
Материалы и методы исследования2.1. Материалы и реактивыПрипроведениитехнологическихихимико-фармацевтическихисследований ИЛФ-лио ЛХС-1208 использовали химические субстанции иреактивы, которые соответствовали требованиям НД(ГОСТов, ТУ,фармакопейных статей ГФ XIII, Ph Eur, USP30-NF25).Действующее вещество (ДВ):ЛХС-1208(6-амино-12-(1-α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3a]-пирроло[3,4с]карбазол-5,7-дион) – аморфный порошок оранжевого цвета беззапаха, Мм = 472 г/моль; не растворим в воде, мало растворим в спирте 95%и ацетоне, растворим в ДМСО и ДМФА.ВВ и растворители:Cremophor ELP (polyoxyl-35-castor oil) USP, NF (BASF The ChemicalCompany, Германия) – Mм = 1200 г/моль, маслянистая вязкая жидкостьжелтоватого цвета со слабым характерным запахом. Хорошо растворим вводе и органических растворителях (спирт 95% , н-пропанол, изопропанол,этилацетат, хлороформ, тетрахлорид углерода, трихлорэтилен, толуол иксилол).
В воде формирует мицеллы (ККМ=0,02%). Имеет значение рН 10%водного раствора 6-8, значение гидрофильно-липофильного баланса (ГЛБ)составляет 12-14.Kolliphor HS15 (polyoxyl-15-hydrooxystearate) Ph Eur, USP (BASF TheChemical Company, Германия) – белая паста, с желтоватым оттенком.Хорошо растворим в воде и органических растворителях (спирт 95% , 2пропанол), не растворим в жидком парафине. В воде формирует мицеллыразмером около 10-20 нм (ККМ=0,005-0,02%). Имеет значение рН 10%водного раствора 6-7, значение ГЛБ составляет 14-16.Kollidon 17 PF (ПВП, повидон) Ph Eur, USP, JP (BASF The ChemicalCompany,Германия)–средняяMм = 7000-11000г/моль,белый51гигроскопичный порошок с нерезким характерным запахом.
Растворим вводе, хлороформе, спирте 95%, глицерине, метаноле, изопропаноле и нпропаноле. Практически не растворим в циклогексане, диэтиловом эфире иэтилацетате. Водный 5% раствор имеет значения рН 3,0-5,0.Kollisolv-PEG 400 и Lutrol E-400 Ph Eur, USP, NF (BASF The ChemicalCompany, Германия) – Мм = 370 г/моль, при комнатной температурепредставляет собой жидкость без цвета и практически без запаха и вкуса,растворим в воде, этиловом спирте, ацетоне, хлороформе, не растворим вэфире, парафине, маслах и жирах.ДМСО ХЧ (Химмед, Россия) является высокополярной, смешиваемой сводой органической жидкостью со слабым специфическим «чесночным»запахом, Мм = 78 г/моль. ДМСО обладает низким уровнем токсичности иявляется диполярным апротонным растворителем, плотность –1,0955 г / см3при 25°C.ДМФА ЧДА (Химмед, Россия) является довольно вязкой бесцветнойжидкостью со слабым специфическим «рыбным» запахом, Мм = 73 г/моль.Онсмешиваетсясбольшинствоморганическихрастворителей,заисключением углеводородов. ДМФА является полярным апротоннымрастворителем с высокой точкой кипения, плотность 0,9445 г/см3 при 25°C.Обладает довольно сильным раздражающим действием на слизистыеоболочки и кожные покровы, ПДК в воздухе рабочей зоны – 10 мг/м3.Вода очищенная (ФС.2.2.0019.15).Вода для инъекций (ФС.2.2.0020.15).Растворители для проведения ТСХ:Аммиак водный 25% ОСЧ (Химмед, Россия);Ацетон ЧДА (Химмед, Россия);Бензол ЧДА (Химмед, Россия);н-Бутанол ЧДА (ЗАО Экос-1, Россия);н-гексан ЧДА (Химмед, Россия);Диметилсульфоксид ЧДА (Химмед, Россия);52ЛУК (ледяная уксусная кислота) ХЧ (ЗАО Мосреактив, Россия);Метанол ХЧ (Химмед, Россия);Пропанол-2 (изопропиловый спирт) ОСЧ (Химмед, Россия);Спирт этиловый 95%-й (ФС.2.1.0036.15, РосБио, Россия);Хлороформ (трихлорметан) стабилизированный ХЧ (Химмед, Россия);Этилацетат (этиловый эфир уксусной кислоты) ХЧ, (Химмед, Россия).Иные реактивы:Йод кристаллический Ч (Химмед, Россия).Вспомогательные материалы для проведения ТСХ:Пластинки «Sorbfil» ПТСХ-АФ-А.
Тип сорбента – силикагель СТХ-1ВЭ.Зернение – 8-12 мкм. Толщина слоя – 100 мкм. Связующее вещество –силиказоль. Тип подложки – алюминий. Размер пластин – 10х15 см.Стеклянные камеры размером 20 х 10 х 10 см с притертыми крышками.Вспомогательные материалы для спектрофотометрии:Кюветы с крышкой для спектрофотометрии (Россия).Вспомогательные материалы для стерилизующей фильтрации:Нейлоновые мембранные фильтры PALL N66 диаметром 25 мм с размеромпор 0,22 мкм (Pall Corporation, США; ООО Палл Евразия, Россия).ФильтрационнаясистемаStericupGPMilliporeExpressPlusсполиэфирсульфоновыми фильтрами, имеющими размер пор 0,22 мкм.Фильтрационная система Corning с фильтрами из ацетилцеллюлозы,имеющими размер пор 0,22 мкм.2.2. ОборудованиеВесы Sartorius LA 1200 S (Sartorius AG, Германия);Весы аналитические Sartorius 2405 (Sartorius AG, Германия);Водяная баня BUCHI Heating Bath B-490 (BÜCHI Labortechnik AG,Швейцария);Экструдер LipexTM Thermobarrel Extruder 10 мл (Northern Lipids Inc.,Канада);Сублимационная сушка Minifast 10 (BOC Edwards Tianli pharmaceutical53system, Китай);Низкотемпературная камера NZ 280/75.A (Frigera, Чехия);Спектрофотометр Cary 100 (Varian, Inс., Австралия);pH-метр HANNA pH 211 (Hanna Instruments, Германия);Мешалка верхнеприводная механическая RZR 2021 Heidolph с пропеллернымперемешивающим элементом PR 30 Heidolph (Heidolph, Германия);Шейкер вибрационный Vibramax 100 Heidolph (Heidolph, Германия);Дозатор Dispensette (BRAND, Германия);Полуавтомат ПЗР-34-ВИПС-МЕД для укупорки флаконов колпачками К-2-20и К-3-34 (ООО «Фирма «ВИПС-МЕД»).2.3.
Методы исследований2.3.1. Метод получения ИЛФ ЛХС-1208Массу субстанции ЛХС-1208 растворяли в точно отмеренномколичестве ДМСО, получали прозрачный раствор желтого цвета (раствор А).Отдельно готовили раствор Kollidon 17 PF в воде для инъекций (раствор Б).Затем в раствор Б приливали по каплям, постоянно перемешивая, раствор А.Подробно метод изложен в разделе 3.2.1.2.3.2. Стерилизация ИЛФ ЛХС-1208С целью стерилизации полученный раствор ЛХС-1208 фильтроваличерез полиэфирсульфоновые фильтры, имеющие размер пор 0,22 мкм.Стерильный раствор дозировали по 3 мл во флаконы и помещали на полкисублимационной сушки.2.3.3. Лиофилизация ИЛФ ЛХС-1208Замораживание проводили при температуре (-40÷-45) °С.
Последостижения заданной температуры препарат выдерживали в течение 2,5-3,5ч. Контролировали температуру и продолжительность замораживания порегистрирующему устройству.Далее включали вакуумный насос. После включения вакуумногонасоса и выравнивания вакуума препарат выдерживали около 12 часов иначинали нагрев полок. Максимально возможная скорость подъема54температуры 2°С/ч. Через 1 ч после достижениятемпературыполок+20°С, включали инжекцию воздуха и доводили остаточное давление вкамере до значения 40-50 Па. Температура препарата при досушивании недолжна превышать +20°С.
Продолжительность досушивания – от 2-х до 3-хчасов. Общее время сублимационной сушки препарата 70-72 часа. Поокончании сушки вакуум в сублимационной камере гасили чистым,профильтрованным воздухом, который поступал в камеру через системуфильтров. Кассеты с препаратом выгружали из сублимационной камеры,закрывали крышками и передавали на укупорку.2.3.4. Методы анализа ИЛФ-лио ЛХС-1208Качественный хроматографический анализ ИЛФ-лио ЛХС-1208Для установления подлинности компонентов разработанной ИЛФ-лиоЛХС-1208 применяли метод ТСХ. Методика ТСХ-анализа ИЛФ-лио ЛХС1208 представлена в разделе 4.1.Количественный спектрофотометрический анализ ЛХС-1208 в ИЛФ иИЛФ-лиоКоличественноесодержаниепрепаратаопределялиметодомспектрофотометрии с использованием стандартного образца (СО) при длиневолны 320±2 нм на спектрофотометре Cary 100. Оптическую плотностьрастворов ИЛФ-лио ЛХС-1208 и СО измеряли относительно ДМФА(растворитель и раствор сравнения).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
