Диссертация (1141302), страница 18

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 18)

Разработка аналитической методики количественногоопределения амбена в таблетках с пролонгированным высвобождениемДля качественного и количественного анализа таблеток амбена спролонгированным высвобождением изучена возможность примененияметода спектрофотометрии в ультрафиолетовой области спектра (УФспектрофотометрии). Для этого были изучены спектральные характеристикиамбена, его извлечения из таблеток, а также смеси вспомогательных веществ,используемых для получения таблеток.На рисунке 35 приведены спектры 0,005 мг/мл раствора амбена в среде0,1 Мрастворахлористоводороднойкислоты,полученныхпутемрастворения ФС в данном растворителе и извлечения амбена из таблеточноймассы, а также спектр поглощения смеси вспомогательных веществ-плацебо.Спектр поглощения ФС амбена в области длин волн от 200 до 300 нмхарактеризуется наличием максимумов поглощения при длине волны232±2 нм и 274±2 нм.

Наибольшее аналитическое значение для проведенияколичественногоанализаимеетмаксимумпри232±2 нм,величинапоказателя поглощения в котором имеет более высокое значение. Спектрыпоглощения растворов субстанции амбена и извлечения данной ФС из ЛПсовпадают. При этом поглощение вспомогательных веществ, входящих в118состав таблетки, не значительно и не оказывает влияния на положениемаксимумов в спектре поглощения амбена, что обуславливает отсутствиенеобходимости измерения спектров компонентов таблетки при каждомпроведении анализа. Таким образом, определение содержания амбенацелесообразно проводить, измеряя величину оптической плотности в областимаксимума поглощения 232±2 нм.1 23Рисунок 35 – Спектр поглощения 0,005 мг/мл раствора ФС амбена ( ; 1);0,005 мг/млвспомогательныхрастворавеществамбена(;2);вприсутствиисмесиплацебовспомогательных веществ (; 3) в среде 0,1 М растворахлористоводородной кислоты.Для оценки возможности использования данного метода, а такжемаксимума поглощения 232±2 нм, для анализа содержания амбена втаблетках изучена зависимость интенсивности поглощения амбена от егоконцентрации в растворе.

На рисунке 36 видно, что данная зависимостьсохраняется на протяжении всего диапазона концентраций от 0,001 мг/мл до0,017 мг/мл.119Оптическая плотность раствора, А1,51,2510,750,50,25000,0050,010,0150,02Концентрация амбена (С), мг/мл– Зависимость оптической плотности раствора амбена (А) отРисунок 36его концентрации (С) при max 232±2 нм.Для предложенной методики количественного определения амбена впрепарате «Амбен, таблетки пролонгированного действия, покрытыекишечнорастворимой оболочкой, 100 мг» на образцах таблеток и модельныхсмесяхамбена соаналитическиеправильность,вспомогательнымихарактеристикисходимостьивеществами определяликакспецифичность,воспроизводимостьтакиелинейность,согласноосновнымнормативным документам, влючая ГФ XIII, т.1.

ОФС. 1.1.0012.15. [13, 37,60].Специфичность методики заключается в способности однозначноопределятьанализируемоевеществоприналичииврастворевспомогательных веществ. Специфичность определяли по совпадениюспектров поглощения растворов ФС и извлечения ФС из препарата.Результаты анализа приведены на рисунке 35.Линейностьметодикиопределялипутемизмерениявеличиныоптической плотности растворов с различной концентрацией амбена впределах аналитической области методики, включающей область от 70% до130%.

Регрессионный анализ данных проводили с помощью методанаименьших квадратов с использованием линейной модели y = bx+a (где х –количество определяемого вещества, у – величина отклика, b – угловой120коэффициент, а – свободный член) и рассчитывали коэффициент корреляцииr по экспериментально измеренным значениям переменной у для заданныхзначенийаргументах.Установлено,чтолинейностьзависимостисохраняется при работе в диапазоне 70%-130% от номинального содержанияамбена в таблетке, а величина коэффициента корреляции r составляет 0,9992(рисунок 37).Оптическая плотность раствора, А0,70,6y = 98,786x - 0,0631R² = 0,99920,50,40,30,20,100,0025Рисунок 370,00350,00450,00550,0065Концентрация амбена (С), мг/мл0,00750,0085– Регрессионная прямая для количественного определениясодержания амбена в таблетках методом спектрофотометриипри max 232±2 нм.Правильность методики подтверждали анализом серии модельныхсмесей, изготовленных из вспомогательных веществ с добавлением навескиамбена, соответствующей 70, 80, 100, 120, 130% от номинальногосодержания в препарате.

На каждом уровне концентрации ФС проводили по3 определения. Критерии правильности спектрофотометрической методикиопределяются величиной относительной ошибки среднего результата,которая не должна превышать 2,0 %, и характеризоваться отсутствиемзначимойсистематическойсравниваяполученныеошибки.данныесРезультатыожидаемыманализаоценивали,значениемвеличинысодержания амбена в модельной смеси. Полученные данные приведены втаблице 18.Как видно из данных, приведенных в таблице 18 относительная ошибкасреднего результата (ε = 0,454 %) не превышает 2,0%; результаты лежат121внутри доверительного интервала среднего результата анализа (±Δx),который составил 100,268 ± 0,998, и приближаются к истинному значению.Таблица 18– Результаты оценки правильности методики количественногоспектрофотометрического определения содержания амбена в таблеткахПроцент отноминальногосодержания708090100110120130ЧисленноеСодержание№пророксанап/пв пробе, мг123123123123123123123значениеНайденопророксанамг%Метрологическиехарактеристики среднегорезультата анализа приоценке правильности6,987,18 102,91 m=217,026,97 99,35 f=207,017,07 100,82 ̅,%=100,2688,017,95 99,22 S2=0,9968,038,06 100,67 S=0,9988,028,13 101,41 ̅ =0,2188,988,90 99,08 P,%=959,018,94 99,27 t(p,f)табл.=2,0909,009,03 99,35 t(p,f) выч.=1,23210,0110,01 100,00 Δх=0,455;10,029,96 99,44 ε,%=0,45410,0210,13 101,0611,1011,15 100,4111,0511,03 99,8111,0211,08 100,5112,0111,91 99,1711,9812,03 100,3812,0311,96 99,3912,9813,14 100,2213,0112,95 99,5613,0013,21 101,59t коэффициента (коэффициента Стьюдента),рассчитанное по результатам анализа, составило 1,23.

Табличное значениекоэффициента Стьюдента при 95 % доверительной вероятности и степенисвободы f = 20 равно 2,09, т. е. t выч. < t табл. (95 %, 20), что позволяетсчитать результаты, полученные нашим методом, правильными и неотягощенными систематической ошибкой.Сходимостьметодикиопределяливодинаковыхусловияхсиспользованием одного и того же прибора и одним и тем же специалистом в122короткий промежуток времени на 1 образце таблеток амбена в 9повторностях с использованием навесок таблеточной массы, содержащих0,01 г (10 мг) ФС.Для полученных значений была проведена статистическая обработка,результаты которой представлены в таблице 19.

Относительная ошибкасреднего результата составила 0,92 %. При доверительной вероятности 95 %для проанализированных образцов пророксана доверительный интервалрезультата отдельного определения (среднее ± Δx) составил 10,054±0,013 мгсоответственно. Численное значение коэффициента Стьюдента t (p, f),рассчитанное по результатам анализа составил 1,418. Общие результатывалидации данной методики приведены в таблице 1 приложения 5.Таблица 19 – Результаты определения сходимости аналитической методикиколичественного спектрофотометрического определениясодержания амбена в таблетках№ п/пНайденоМетрологические характеристики среднегоамбена, мгрезультата анализа при оценке сходимости110,080m=9f=829,963̅,%=10,054310,149S2=0,013410,242S=0,11459,894̅ =0,03869,986P,%=95710,010t(p,f)табл.=2,31810,172t(p,f) выч.=1,41899,987Δх=0,093ε,%=0,924Таким образом, предложенная методика количественного определениясодержания основного действующего вещества в лекарственном препарате«Амбен,таблеткипролонгированногодействия,покрытыекишечнорастворимой оболочкой, 100 мг» с помощью спектрофотометрииобладаетспецифичностью,обеспечена123приемлемойправильностью,сходимостью и линейностью как при нормальных рабочих концентрациях,так и в экстремальных точках диапазона концентраций.Однако, при проведении теста «Растворение» с помощью on-lineсистемы, состоящей из тестера растворения с аппаратом типа «лопастнаямешалка»испектрофотометра,соединенныхпроточнойсистемой,количество ФС амбена, высвободившейся из исследуемых таблетокопределяли при длине волны 274±2 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.Измерение величины оптической плотности используемого при проведениитеста«Растворение»вкачествестандартногораствораамбенасконцентрацией, соответствующей 100% количеству ФС, высвободившемусяв среду растворения из таблеток, а также самих растворов образцов таблетокпри 232±2 нм приводит к получению значений оптической плотности,которые находятся в области предела чувствительности прибора, чтоуказывает на необходимость работы в области более низких концентраций.Поскольку использованиезамкнутойпроточнойсистемыon-lineнепредусматривает возможности прямого разбавления проб, в связи с этимизмерение оптической плотности ФС в пробах осуществляли при 274±2 нм,где величина оптической плотности ниже.Проведение теста «Растворение» для таблеток амбена предусматриваетиспользование двух 0,05 М солянокислого и 0,05 М фосфатного буферныхрастворов.

Изучение спектров поглощения амбена в 0,1 М растворехлористоводородной кислоты и 0,05 М солянокислого буферного раствора невыявило их значимых отличий. Спектр поглощения данной ФС в обоихрастворителяххарактеризуетсяналичиемвыраженногомаксимумапоглощения при 232±2 нм (рисунок 38). Тогда как спектр поглощения амбенав 0,05 М фосфатном буфере характеризуется смещением данного максимумавобластьболеекороткихдлинволн(226±2 нм),болеенизкойинтенсивностью поглощения и более пологой формой пика. Наблюдаемыеразличия в спектрах поглощения, по-видимому, обусловлены особенностями124ионизации амбена в полученных растворах [178]. Следует отметить, что вданномслучаелинейностьзависимостиоптическойплотностиотконцентрации амбена сохраняется в широком диапазоне концентраций от0,02 до 0,26 мг/мл (рисунок 39). Таким образом, в зависимости от типаиспытания («Количественное определение», «Однородность дозирования»,«Растворение») количественное определение амбена в таблетках с помощьюУФ-спектрофотометрии возможно проводить при использовании двухрекомендованных длин волн - 232±2 нм и 274±2 нм.232,001,500Abs.226,001,0000,5001274,00320,000200,00Рисунок 38220,00240,00nm.260,00290,00– Спектр поглощения 0,01 мг/мл раствора амбена в 50 мМсолянокислом буфере (; 1); 0,01 мг/мл раствора амбена в50 мМ фосфатном буфере (  ; 2);смеси плацебовспомогательных веществ (; 3) в 50 мМ фосфатномбуфере.Оптическая плотность раствора, А1,401,201,000,800,600,400,200,000Рисунок 390,050,10,150,20,25Концентрация амбена (С), мг/мл0,30,35– Зависимость оптической плотности раствора амбена (А) в50 мМ фосфатном буфере от его концентрации (С) приmax 274±2 нм.1254.6.2.

Количественное определение примесей в таблетках спролонгированным высвобождением амбенаСодержание технологических примесей и продуктов деградации ФС влекарственномпрепаратеопределяютприпроведениииспытания«Посторонние примеси». В таблетках амбена допускается присутствиепримеси 4-формилбензойной кислоты, которая изначально содержится в ФСамбена и имеет нормируемый предел не более 0,25%. Анализ содержания 4формилбензойной кислоты проводили при оценке влияния технологииполучения гранулята на стабильность ФС, а также при изучении срокагодностиизготовленныхсодержащейтаблеток.ион-парныйреагентИспользованиенаосновеподвижнойфазы,алкилсульфоната1-гептилсульфоната натрия, обусловлено его способностью модифицироватьповерхность колонки и обеспечивать наличие на ее поверхности заряда, чтоспособствуетудерживаниюамбена,которыйявляетсяамфолитнымсоединением.Для определения рабочей длины волны получены спектры поглощенияамбена и 4-формилбензойной кислоты. На рисунке 40 видно, что полученныеспектры амбена, схожи с представленными на рисунке 35.

Характеристики

Список файлов диссертации