Диссертация (1151541), страница 8
Текст из файла (страница 8)
et al., 2007). Эту смесь давали либо только с кормом (1 г/кг), либо в той же дозе с кормом плюс периодически добавляли ее в38питьевую воду. Оба способа приводили к одинаковым изменения в составе кишечных микробных популяций, который, надо отметить, определяли классическим методом высева: у бройлеров, получавших пробиотик, отмечено достоверное повышение концентрации в помете бифидобактерий, лактобацилли Грам-положительных кокков (таких как Enterococcus или Pediococcus) посравнению с контролем, не получавшем пробиотик. При этом в группе сравнения, получавшей кормовой антибиотик (авиламицин, 2,5 мг/кг), увеличениепопуляций кокков и бифидобактерий было несколько меньшим, а популяциялактобацилл была даже меньше, чем в контроле.
Общий ростостимулирующий эффект пробиотической смеси был на уровне группы, получавшей антибиотик, хотя конверсия корма при этом была несколько хуже.В другом опыте изучали разные концентрации (0,005-0,02%) смеси, содержащей ряд аналогичных пробиотических микроорганизмов, а также Streptococcus thermophilus, Aspergillus oryzae и Candida pintolopesii (Pourakbari M.et al., 2016). Установлено, что все уровни пробиотика снижали количество E.coli в химусе слепых кишок бройлеров. Обнаружены линейные корреляциимежду уровнем ввода в рацион пробиотика и рядом гематологических показателей: концентрации в плазме крови глюкозы и альбумина повышались, атриглицеридов и холестерина – наоборот, понижались с ростом дозы препарата.
Влияния дозы пробиотика на массу иммунных органов и на интенсивность иммунного ответа обнаружено не было.Подобные смеси пробиотических культур также используются для улучшения конкурентного вытеснения патогенов за счет расширения спектра видов-«конкурентов». В исследовании греческих авторов изучали эффективность вытеснения Salmonella enteritidis многоштаммовым пробиотиком приэкспериментально индуцированном сальмонеллезе. Показано, что пробиотикоказывает примерно такой же эффект на популяцию сальмонеллы, как и кормовой антибиотик (авиламицин), снижая ее размер на 2-7 порядков, причемесли в положительном контроле (зараженном сальмонеллой, но не получавшем добавок) в 42 дня жизни патоген обнаруживался в химусе слепых кишок39у 100% особей, то у групп, получавших пробиотик или антибиотик – только у50%.
При этом специфические к сальмонелле иммунные ответы IgA и IgG (какна уровне кишечника, так и всего организма бройлеров) достоверно усиливались только в положительном (зараженном) контроле (Mountzouris K.C. et al.,2009).В России в ООО «БИОТРОФ» (Санкт-Петербург) разработан аналогичный многоштаммовый пробиотик Целлобактерин-Т, содержащий ряд микробных видов, выделенных из рубца жвачных.
В исследовании, где его сравнивали с антибиотиком (Стафак-110), было установлено, что данный пробиотикв полнорационном пшеничном комбикорме в дозе 1 кг/т повышает общий размер микробных популяций кишечника, популяции отдельных благотворныхгрупп (целлюлолитические бактерии, лакто- и бифидобактерии, бациллы, селеномонады), снижает размеры популяций патогенов (например, патогенныхэнтеробактерий).
В группе, получавшей пробиотик, в слепых кишках было в10-100 раз больше лактобактерий и других благотворных видов, меньше клостридий и представителей транзитной флоры (состав микробных сообществизучали методами T-RFLP и RT-PCR) (Грозина А.А. 2014).Подводя итог вышесказанному, можно сделать заключение, что исследования влияния структуры комбикормов на микрофлору кишечника бройлеров являются актуальными, причем в настоящее время особенно актуальныметагеномные исследования, дающие более полную картину микробных популяций по сравнению с классическими методами микробиологии. Эти исследования расширят знания о взаимосвязи рационов, микрофлоры, физиологиии продуктивности бройлеров, и в будущем помогут расширить спектр добавок,эффективно модулирующих кишечную микрофлору птицы и улучшающих еепродуктивность. Дальнейшие исследования также помогут в разработке прецизионных решений вопроса о том, какие добавки и в какой дозировке следуетиспользовать при разной структуре рациона бройлеров, чтобы обеспечить более эффективное взаимодействие микрофлоры с организмом хозяина.40В связи с этим целью работы является: изучение состава микрофлорыжелудочно-кишечного тракта цыплят-бройлеров на фоне применения комбикормов различной структуры и питательности.
Основные задачи исследований:– изучить основные зоотехнические показатели цыплят-бройлеров на фонеприменения комбикормов различной структуры;– определить переваримость и использование питательных веществ комбикорма организмом цыплят-бройлеров;– исследовать состояние микробиоты кишечника цыплят-бройлеров на фонеприменения комбикормов различного состава и питательности с использованием различных молекулярно-генетических подходов (T-RFLP-анализ, NGS,ПЦР в реальном времени);– определить экономическую эффективность использования кормовой добавки Целлобактерин-Т в рационе цыплят-бройлеров для нормализации микрофлоры кишечника и повышения переваримости компонентов комбикормов.412. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ2.1. Методика проведения научно-хозяйственных опытовДля достижения поставленных задач в 2012-2016 гг.
в отделе питанияптицы ФНЦ «ВНИТИП» РАН и в условиях вивария СГЦ «Загорское ЭПХ»было проведено 3 научно-хозяйственных опыта и одна производственная проверка на цыплятах-бройлерах кросса «Кобб 500», всего на 8 группах (1500гол.)В период опытов цыплят выращивали в клеточных батареях типа Р-15 ссуточного до 36-дневного возраста. Опытные и контрольные группы комплектовались цыплятами-аналогами по живой массе в суточном возрасте по 70 голов в каждой группе и по 35 цыплят в одной клетке. Технологические параметры выращивания соответствовали рекомендациям ВНИТИП, 2013 г.
Доступ птицы к корму и воде был свободным. Для кормления птиц опытных иконтрольных групп использовали полнорационные комбикорма в виде россыпи с питательностью согласно рекомендациям по работе с кроссом «Кобб500», 2010 г.Параметры микроклимата, плотность посадки, фронт кормления и поения во всех группах были одинаковыми.Целью исследования являлось изучение состава микрофлоры желудочно-кишечного тракта цыплят-бройлеров на фоне применения комбикормовразличной структуры и питательности.
В качестве корректирующего микрофлору кишечника фактора использовали ферментативный пробиотик Целлобактерин-Т.В качестве пробиотика использовался Целлобактерин-Т (производствоООО «БИОТРОФ», Россия) – препарат комплексного действия, созданный наоснове ассоциации микроорганизмов, выделенных из рубца жвачных. Содержит целлюлозолитические и молочнокислые бактерии и обладает свойствамипробиотика профилактического назначения и ферментного препарата. Бактерии, входящие в состав ассоциации, образуют ферменты, способные гидролизировать некрахмалистые полисахариды – ксиланазы, целлюлазы, пектиназы42и бета-глюканазы (Руководство по применению…, 2013).
Это позволяет использовать препарат в рационах животных и птицы с повышенным уровнемнекрахмалистых полисахаридов. Дозировку препарата осуществляли в соответствии с «Методическими наставлениями по использованию в комбикормахдля птицы новых биологически активных, минеральных и кормовых добавок»(ВНИТИП, 2011).Для исследования микрофлоры кишечника проводили убой цыплятбройлеров в суточном,7-,14-,21-,36-дневном возраста. Для этого отбиралицыплят-аналогов по живой массе, по 6 голов из каждой группы. При этом дляполучения более полной картины микробного фона брали особей с заполненным зобом, а суточных цыплят – через сутки после кормления.
Отбор содержимого двенадцатиперстной и слепых кишок проводили с соблюдением условий асептики в одноразовые пробирки типа эппендорф. До транспортировки вООО «БИОТРОФ» пробы помещали в камеру при –20оС, перевозка материалаосуществлялась в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами.Для удобства учета зоотехнических параметров роста, для отбора пробна микробиологию цыплят брали только из одной и той же клетки в каждойгруппе. Для получения наиболее полной картины влияния пробиотика на организм цыплят-бройлеров, в возрасте птицы 28-36 суток был проведен физиологический (балансовый) опыт, в котором определяли переваримость протеина, жира, клетчатки и использование азота, кальция и фосфора.
Опыт проводили в соответствии с Методикой проведения научных и производственныхисследований по кормлению сельскохозяйственной птицы, ВНИТИП, 2013.Задачей первого научно-производственного опыта являлось определение состояния микрофлоры кишечника бройлеров на фоне замены кукурузыпшеницей.В возрасте 6 дней были сформированы две группы бройлеров по 35 голов в каждой, аналогичных по живой массе.43Балансовый опыт проведен на 21–36-суточных цыплятах-бройлерах.Проведение физиологического опыта осуществлялось согласно рекомендациям ВНИТИП, 2013 г.
Общая схема опыта приведена в таблице 1.Таблица 1. – Схема первого научно-производственного опытаГруппа1 контрольная2 опытная3 опытнаяХарактеристика кормовКомбикорм с питательностью согласно рекомендациямпо работе с кроссом «Кобб-500», без включения пшеницы, содержащий 60% кукурузы по массе комбикормаКомбикорм с питательностью согласно рекомендациямпо работе с кроссом, с включением 60% пшеницы помассе комбикорма.Комбикорм с питательностью согласно рекомендациямпо работе с кроссом, с включением 60% пшеницы помассе комбикорма + Целлобактерин-Т в дозе 1кг/т кормаСостав и питательность комбикормов опыта 1 приведены в таблице 2.Таблица 2. – Состав и питательность комбикормов (опыт 1)КомпонентПериод выращивания, днистарт (6-21 день)финиш (22-36дней)1к2о3о1к2о3о1234567Кукуруза60,060,0Пшеница63,58 65,5960,0 61,92Соевый шрот26,21 16,63 16,52 17,12 17,52 17,43Кукурузный глютен3,50 7,17 6,87 7,52 5,44 5,18Мука рыбная4,594,04,0Шрот подсолнечный6,98 4,92 4,86Масло подсолнечное2,04,46 2,76 3,83 7,53 5,92Известняк1,46 1,58 1,58 1,49 1,53 1,53Монокальцийфосфат0,91 0,82 0,82 1,35 1,23 1,23Монохлоргидрат лизина0,23 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50DL-метионин0,29 0,31 0,31 0,25 0,30 0,30Треонин0,09 0,17 0,17 0,12 0,15 0,15Соль0,22 0,28 0,28 0,34 0,38 0,38Целлобактерин-Т0,10,1Премикс0,50,50,50,50,50,5Итого100100 100 100 100100В 100 г комбикорма содержится, %Обменной энергии, ккал310310 310 320 320320441Сырого протеинаСырой клетчаткиКальцияФосфора общегоФосфора усвояемогоНатрияХлораЛизинаМетионинаМетионина+ЦистинаТреонинаТриптофанаЛизина усвояемогоМетионина усвояемогоМетионина+Цистина усвояемогоТреонина усвояемогоТриптофана усвояемого2233,81,00,70,40,160,251,370,681,030,930,251,230,650,930,810,213233,261,00,70,40,160,341,360,701,030,930,261,230,650,930,810,214233,291,00,70,40,160,341,360,701,030,930,261,230,650,930,810,215214,580,90,70,40,160,351,210,620,960,830,211,090,570,840,710,176213,980,90,70,40,160,371,220,630,950,830,251,090,580,840,710,207214,00,90,70,40,160,371,220,630,950,830,251,090,580,840,710,21Задачей второго научно-производственного опыта являлось определение состояния микрофлоры кишечника бройлеров на фоне замены кукурузыячменем.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
