Диссертация (1151541), страница 13
Текст из файла (страница 13)
5. Распределение доли микрофлоры в ЖКТ цыплят по данным T-RFLPанализа при включении в рацион комбикорма с 60% кукурузы (группа 1к),комбикорма с 60% пшеницы (группа 2 о) и комбикорма с включением 60%пшеницы и ферментативного пробиотика Целлобактерин-Т (группа 3 о)69С помощью T-RFLP-анализа в составе бактериофлоры слепых кишкокцыплят обнаружено 20 таксонов, включая некультивируемые виды. Среди автохтонных и аллохтонных бактерий выделено по 9 таксонов, среди транзитных бактерий обнаружены только бактерии псевдомонадного комплекса. Соотношение Гр(+), Гр() бактериофлоры и преобладание видов с анаэробнымтипом дыхания – осталось неизменным и соответствовало результатам, полученным при NGS секвенировании. Результаты исследований показали, чтодоля лактобактерий в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров при добавлении в рацион 60% пшеницы уменьшилась на 2,06%, а в комбинации спробиотиком увеличилась на 8,71%.Доля бацилл в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров при введении в рацион 60% пшеницы увеличилась на 1,71% по сравнению с контролем.
Показано, что бифидобактерии практически не выявлялись в слепых отростках ЖКТ контрольной и опытной групп.Установлено, что содержание селеномонад в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров выросло на 0,4% при включении в рацион 60% пшеницыи снизилось в присутствии пробиотика на 2,02%. В присутствии пробиотика вразы сократилась доля условно-патогенных бактерий, а патогенных уменьшилась почти в 3 раза. Доля транзитных бактерий увеличилась по сравнениюс контролем до 5,8% (группа 2) и до 5,66% (группа 3). Совокупная доля некультивируемых видов в опыте и контроле не изменялась и составила 9,69%(группа 1), 10,5% (группа 2) и 9,31 % (группа 3).Исходя из полученных данных и проведя сравнительный анализ результатов, полученных обоими методами, можно сделать вывод, что применениеT-RFLP-анализа дает более полную картину микробиоты кишечника в сравнении с NGS. Это объясняется более полными базами данных для T-RFLP посравнению с NGS.
Замена кукурузы на пшеницу в комбикормах для бройлеровоказала влияние на микробное сообщество цыплят, увеличив долю патогенных клостридий и кампилобактера. Также отмечено увеличение доли патоген-70ных листерий и пептококков и уменьшение доли полезных бактерий. Использование Целлобактерина-Т способствовало нормализации микрофлоры кишечника.3.2. Продуктивность, переваримость и использование питательных веществ корма бройлерами, состояние микрофлоры желудочно-кишечноготракта при использовании в рационе кормов, содержащих кукурузу и ячмень (опыт 2)Следующим этапом наших исследований стало изучение микрофлорыслепых отростков цыплят-бройлеров при использовании в рационе кормов,содержащих кукурузу и ячмень, а также обогащение ячменного Целлобактерином-Т. Среди используемых для кормления птицы злаковых у ячменя гораздо ниже энергетическая ценность, содержание протеина – около 9-12%, асырой клетчатки незначительно больше, чем у кукурузы.
Крое того, по сравнению с кукурузой в ячмене выше уровень растворимых (4,5%) и нерастворимых НПС (12,2%). По сравнению с пшеницей в ячмене выше на 2,1% растворимых и на 3,2% нерастворимых НПС (Choct, M,1997).Причем преобладают в нем β- глюканы (3,6% против 0,4% в пшенице иотсутствие их в кукурузе). Основные зоотехнические результаты опыта 2представлены в таблице 12.Таблица 12. – Основные зоотехнические показатели опыта 2Группа13Показатель2контрольопытнаяопытнаяная1234Сохранность поголовья, %100,097,1100,0Живая масса бройлеров (г),в возрасте: суточные42,0±0,3142,0±0,4442,0±0,3821- дневные842±20,22839±21,14848±16,6Средняя живая масса в20751943204336- дневном возрасте, гв том числе: петушки2310±32,14 2169±34,17** 2275±28,54*курочки1840±29,22 1717±32,24** 1812±25,23*711Среднесуточный прирост живоймассы, г (за 1–36 суток)Потреблено корма всего, кгЗатраты корма, на 1 кг приростаживой массы, кг:23456,473,4361,6952,813,3841,7855,583,4271,71Из данных, представленных в таблице, следует, что сохранность птицыв опытной группе 2 была ниже, чем в контроле, на 2,9%, однако отход не былсвязан с кормовыми факторами.
Живая масса цыплят зависела от состава комбикорма. Так, в 21- дневном возрасте она была ниже, чем в контроле, в опытной группе 2 на 0,4%, опытной группе 3 – выше на 0,7%. К концу выращиваниясредняя живая масса бройлеров в опытной группе 2, получавшей ячмень, быламеньше, чем в группе 1, на 6,4%, в том числе петушков – на 6,1% (Р≤0,01),курочек – на 6,7%(Р≤0,01). Обогащение аналогичного комбикорма Целлобактерином-Т способствовало увеличению средней живой массы 36-дневныхцыплят на 5,1%, в том числе петушков – на 4,9% (Р≤0,05), курочек – на 5,5%(Р≤0,05) по сравнению с опытной группой 2.Разница по средней живой массе птицы в опытной группе 3 по сравнению с контролем составила 1,5% в пользу группы 1, в том числе различия попетушкам были равны 1,5%, курочкам – также 1,5%.Полученные результаты согласуются со среднесуточным приростом живой массы, который был выше в контрольной группе, чем в опытных.
Бройлеры опытной группы хуже потребляли комбикорма: на 1,5% и 0,3% по сравнению с контрольной группой 1 и опытной группой 3.При этом затраты корма на 1 кг прироста живой массы были минимальными в контрольной группе 1, в опытных группах 2 и 3 – выше на 5,3 и 1,2%соответственно.
Следовательно, используемый в опыте пробиотик Целлобактерин-Т, способствовал улучшению рост бройлеров и конверсии корма.Об этом свидетельствуют и данные балансового (физиологического)опыта (табл. 13).72Таблица 13. – Переваримость и использование питательных веществ кормабройлерами, % (опыт 2)ПоказательПереваримость: органического веществапротеинажираклетчаткиБЭВИспользование: азота1к75,195,076,012,686,458,6Группа2о66,792,272,24,775,655,23о72,193,373,211,282,356,8Согласно приведенным в таблице данным, замена легкопереваримогокомпонента рациона кукурузы на ячмень оказала отрицательное влияние напереваримость и использование питательных веществ корма. Так, бройлерыопытной группы 2 хуже, чем сверстники контрольной группы, переваривалиорганическое вещество корма (на 8,4%), протеин (на 2,8%), жир (на 3,8%),клетчатку (на 10,8%).
Использование азота было также хуже на 3,4%.Использование Целлобактерина-Т в комбикормах, содержащих ячмень,позволило улучшить показатель переваримости и использования питательных веществ рациона цыплятами-бройлерами, хотя они и были несколькониже, чем в контроле (рис.6).Рис.6. – Переваримость и использование питательных веществкорма бройлерами, % (опыт 2)73Замена кукурузы на ячмень отразилась на состоянии микрофлоры желудочно-кишечного тракта цыплят (табл.14).Таблица 14. Микробиота кишечника бройлеров, определенная методомNGS-секвенирование (опыт 2)ПоказательГруппа1-контрольнаяПолезная микрофлора1,0 ± 1,3БациллыЛактобациллы4,4 ± 1,8Бифидобактерии0,1 ± 0,2Вейлионеллы0Целлюлозолитики, в т.ч.68,6 ± 13,8лахноспиры0,8± 0,2руминококки23,1 ± 2,5клостридии19,1 ± 3,7бактероиды25,4 ± 7,7эубактерии0,2 ± 0,1Условно-патогенные бактерииЭнтеробактерии0Актиномицеты0,4 ± 0,3Патогенные бактерииФузобактерии0Листерии0Стафилококки0Кампилобактер0Патогенные клостидии0Пастереллы0Пептококки0Транзитные бактерииПсевдомонады0Другие бактерии9,3 ± 13,1ВиррукомикробиаАрхеи00TM7Протеобактерии2,0 ± 1,6Тенерикуты0,2 ± 0,30,3 ± 0,1ЭрипсипелотрихиНекультивируемые бактерии13,7 ± 4,02-опытная3-опыная012,5 ± 14,00,2 ± 0,2062,7 ± 4,70,6 ± 0,0120,0 ± 5,222,9 ± 1,718,9 ± 2,30,3 ± 0,10,3 ± 0,44,5 ± 0,30,1 ± 0,1075,5 ± 0,91,2 ± 0,131,6 ± 2,725,9 ± 1,816,4 ± 3,60,4 ± 0,20,2 ± 0,20,7 ± 0,010,2 ± 0,21,8 ± 1,5000000000000000000002,1 ± 1,700,1 ± 0,2002,4 ± 1,70,1 ± 0,110,3 ± 0,0121,5 ± 6,914,8 ± 1,9Микробные сообщества кишечника бройлеров заметно различаются потаксономическому составу в зависимости от рационов, которые они получали74во время эксперимента, особенно если корм обогащен пробиотическим препаратом.
Так, бациллы были обнаружены у птицы из 3-ей группы – 0,3±0,4, уптиц из второй группы данный показатель был равен нулю, тогда как в контрольной группе – 1,0±1,3. Во 2-ой подопытной группе произошел резкийсдвиг микробиоты в сторону лактобацилл – 12,5 ± 14,0, тогда как в контрольной группе и 3-й этот показатель составлял – 4,4 ± 1,8 и 4,5 ± 0,3 соответственно. Это на 184%, больше чем в 3-ей группе и контроле.Лактобациллы для организма бройлерной птицы - очень важный компонент резидентной микробиоты желудочно-кишечного тракта, обеспечивающих иммуностимулирующий и антагонистический в отношении патогенов эффект, лактобактериям присущи и другие важнейшие физиологические функции. Помимо перечисленных функций, они также активно участвуют в метаболизме углеводов, белков, липидов, нуклеиновых кислот и ферментациикорма при переваривании. Так, лактобациллам также, как и бифидобактериям,принадлежит важная роль в регуляции и поддержании рН, водно-солевого обмена и анаэробиоза в кишечнике, деконьюгации желчных кислот, синтезе витаминов, аминов и других биологически активных соединений.Показатели группы целлюлозолитиков в 3-ей группе, были равны 75,5 ±0,9 и превышали, их уровень во 2-ой группе на 20,41%, а в контроле на – 10%.По остальным показателям у бройлеров 3-ей группы микрофлора, в т.ч.