Диссертация (1151541), страница 15
Текст из файла (страница 15)
Листерии были обнаруженытолько у птицы из контроля и второй подопытной группы – 0,13 ± 0,18 и 0,14± 0,19 соответственно. Фузобактерий в контроле было больше на 28,4% по80сравнению со 2-ой подопытной группой и на 83,1 % – в 3-ей группе; стафилококков – на 43,6% и 166,6%, соответственно. Патогенных клостридий у птицы2-ой группы оказалось больше на 35,1%, чем в контроле, и на 68,5%, чем в 3ей группе, получающей ячмень с Целлобактерином-Т. Пастерелл у птицы контрольной группы было больше на 45,1%, чем у бройлеров во второй группе ина 423,5%, чем у бройлеров из 3-ей группы, получавших ферментативный пробиотик. Пептокококов больше регистрировалось во 2-ой группе, их соотношение к контролю и к 3-ей группе было 213,9% и 47,7%.
Анализируя полученныеданные, видно, что птица в рационе которой был ячмень 45% и ферментативный пробиотик Целлобактерин-Т, содержала микробиоту слепых отростков, вкоторой патогенной микрофлоры было гораздо меньше, чем в контрольной и2-ой подопытной группе. Это важно, так как заместительная терапия при помощи введения в рацион птиц пробиотических препаратов с выраженной противомикробной активностью против патогенных и условно-патогенных штаммов бактерий может в будущем помочь решить проблему антибиотикорезистентности, так как поможет сократить использование антибиотиков в промышленном птицеводстве.У цыплят-бройлеров количество транзиторной микрофлоры в содержимом кишечника в контроле и во всех подопытных группах было примерно одинаковым.Некультивируемые виды микроорганизмов в большей степени были вобразцах, полученных от бройлеров, выращенных на комбикорме без ячменя,на кукурузе (60%), этот показатель составил 25,3 ± 19,8, что больше, чем во 2ой группе, на 226%, и на 173,8%, чем в 3-ей группе подопытных птиц.В данном варианте опыта присутствие в составе микрофлоры контрольной и опытной групп цыплят патогенной и транзиторной бактериофлоры установлено только с использованием T-RFLP-анализа (рис.
8). Необходимо отметить, что в присутствии Целлобактерина –Т в комбинации с 45% ячменя в рационе цыплят во всех случаях сократилась доля патогенных бактерий. Так, количество пастерелл снизилось в 5,2 раза по сравнению с данными контрольной81группы. Исключение среди патогенных бактерий составили пептококки, ихдоля, по сравнению с контролем, увеличилась в 2,2 раза.Общее содержание некультивируемых бактерий в слепых отростках ЖКТна фоне 45% ячменя и пробиотика по результатам NGS-секвенирования увеличилось на 7,8% (2о) и на 1,1% (3о), а по данным T-RFLP-анализа, наоборот,снизилось на 17,54% (2о) и 16,06% (3о) по сравнению с контролем.Рис.
8. Распределение доли микрофлоры в ЖКТ цыплят по данным T-RFLPанализа при включении в рацион комбикорма с 60% кукурузы (группа 1к),комбикорма с 45% ячменя (группа 2 о) и комбикорма с включением 45% ячменя и ферментативного пробиотика Целлобактерин-Т (группа 3 о).Таким образом, ввод в рационы бройлеров ячменя, богатого труднопереваримыми бетаглюканами, существенно повлияло на структуру целлюлозолитического сообщества микроорганизмов. Доля целлюлозолитиков увеличивается по сравнению с контролем на 24 %. Отмечается существенное возрастание доли бактероидов (свыше 2-х раз) и эубактерий.
Численность патогенных бактерий на фоне применения ячменя практически не изменяется, но сказывается на структуре: резко увеличивается количество пептококков и пато-82генных клостридий. Отмечается повышение численности полезных молочнокислых бактерий (на 108%) на фоне применения ячменя по сравнению с контролем. При этом снижается общая доля условно-патогенных бактерий.3.3. Продуктивность, переваримость и использование питательных веществ корма бройлерами, состояние микрофлоры желудочно-кишечноготракта при использовании в рационе кормов, содержащих соевый и подсолнечный шротаЗадачей третьего научно-производственного опыта являлось определение состояния микрофлоры кишечника бройлеров на фоне замены соевогошрота подсолнечниковым.
Была изучена переваримость бройлерами питательных веществ комбикормов с включением 20% подсолнечного шрота приснижении в комбикорме обменной энергии и протеина. При этом в рационебыло снижение обменной энергии на 4,88 ккал и сырого протеина на 1,01%.Основные зоотехнические показатели представлены в таблице 16.Таблица 16. – Основные зоотехнические показатели опыта 3ГруппаПоказательСохранность поголовья, %Живая масса бройлеров (г),в возрасте: суточные21- дневныеСредняя живая масса в36- дневном возрасте, гв том числе: петушкикурочкиСреднесуточный прирост живоймассы, г (за 1–36 суток)Потреблено корма всего, кгЗатраты корма, на 1 кг приростаживой массы, кг:1контрольная100,044,0±0,29870±20,421422опытная3опытная97,1100,044,0±0,33875±19,75201744,0±0,31865±22,621142380±34,42 2261±36,12* 2349±30,841904±27,92 1773±34,17** 1879±22,7858,2854,8158,723,4401,643,6921,873,4361,6683Таким образом, из представленной таблицы видно, что по большинствузоотехнических показателей: живой массе, среднесуточным приростам и конверсии корма цыплята опытных групп уступали контрольной.
Сохранностьпоголовья в контроле и в опытной группе 3 с включением в рацион пробиотикасоставил 100%, во второй группе подопытной птицы – 97,1%. На 21-е суткицыплята-бройлеры в обеих подопытных группах и в контроле имели практически одинаковую массу тела, разница составила 0,6%. К 36-дневному возрасту, цыплята-бройлеры в контрольной группе имели большую массу, чемптица во 2-ой (на 5,8%) и в 3-й группе (на 1,3%). Петушки контрольной группыимели массу большую, чем в обеих подопытных группах, на – 5,0 (Р<0,05) и1,3% соответственно, курочки – на 6,9% (Р<0,01) и 1,3%.Обогащение комбикормов с подсолнечным шротом Целлобактерином-Тспособствовало улучшению роста бройлеров по сравнению с группой 2, получавшей аналогичный комбикорм без добавки.
Средняя живая масса 36-дневных бройлеров в данной группе была выше, чем в опытной группе 2, на 4,8%,в том числе петушков – на 3,9%, курочек – на 1,3%. Потребление корма вовторой группе оказалось больше, чем в контроле и 3-ей подопытной группына – 6,8 и 6,9% соответственно. Затраты корма на 1 кг прироста живой массыбыли самыми низкими в контрольной группе – на 14,0 и 1,2% ниже, чем вопытных группах 2 и 3.Полученные результаты откорма бройлеров нашли подтверждение в балансовом опыте, подтвердившем, что в опытной группе 2 переваримость и использование питательных веществ корма были хуже, чем в контрольной иопытной группе 3.Таблица 17. – Переваримость и использование питательных веществ кормабройлерами, % (опыт 3)Показатель1Переваримость: органического веществапротеина1к273,792,5Группа2о368,691,23о469,192,0841234клетчатки76,471,975,8БЭВ84,280,781,9Использование: азота12,64,910,2Комбикорма контрольной и опытной групп различались по использованию питательных веществ бройлерами.
Лучшая переваримость питательныхвеществ была комбикорма с питательностью согласно рекомендациям по работе с кроссом «Кобб-500» (ОР) без включения подсолнечного шрота (контрольная группа). Так, переваримость органического вещества в нем (контроль) показатели была выше, чем в опытных группах 2 и 3на – 5,1 и 4,6%,протеина – 1,3 и 0,5%, жира – на 4,5 и 0,6%, клетчатки – на 7,7 и 2,4%, БЭВ –3,5 и 2,3% соответственно. Сравнение опытных групп 2 и 3 по данным показателям показало, что пробиотик оказал влияние на переваримость органического вещества корма, увеличив его на 0,5%, протеина – на 0,8%, жира – на3,9%, клетчатки – на 5,3%, БЭВ – на 1,2%, использование азата – на 4,3%.Следующим этапом исседований являлось изучение микробиоты желудочно-кишечного тракта бройлеровТаблица 18.
Микробиота кишечника бройлеров, определенная методомNGS-секвенирование (опыт 3)ГруппаПоказатель11-контрольная22- опытная3Полезная микрофлора0,3 ± 0,5БациллыЛактобациллы9,0 ± 4,4Бифидобактерии0,2 ± 0,1Вейлионеллы0Целлюлозолитики, в т.ч.73,7 ± 6,0лахноспиры1,1 ± 0,8руминококки19,8 ± 2,5клостридии23,1 ± 4,2бактероиды29,5 ± 5,5эубактерии0,1 ± 0,01Условно-патогенные бактерииЭнтеробактерии2,8 ± 2,4Актиномицеты0,4 ± 0,53-опытная40,4 ± 0,527,0 ± 22,61,0 ± 0,01058,6 ± 15,60,8 ±0,517,1 ± 1019,4 ± 8,721,1 ± 3,60,2 ± 0,090,2 ± 0,116,3 ± 19,50,0 ± 0,01069,6 ± 14,70,7 ± 0,419,6 ± 4,319,5 ± 4,129,7 ± 15,80,1 ± 0,010,1 ± 0,11,2 ± 1,100,4 ± 0,2851ФузобактерииЛистерииСтафилококкиКампилобактерПастереллыПептококкиПсевдомонадыВиррукомикробиаАрхеиПротеобактерииТенерикутыЭрипсипелотрихи2Патогенные бактерии000 ± 0,01000Транзитные бактерии0Другие бактерии00 ± 0,11,4 ± 0,600,5 ± 0,7Некультивируемые бактерии11,7 ± 1,234000000000000000 ± 0,100,7 ± 0,200,2 ± 0,20,9 ± 1,1202,0 ± 1,40,1 ± 0,20,2 ± 0,111,7± 6,410,6 ± 4,2В ходе проведения третьего эксперимента при анализе микрофлоры.NGS-секвенированием, на фоне включения в рацион 20% подсолнечногошрота были получены следующие результаты: бациллы обнаружены у птицыиз 2-ой группы – 0,4±0,5, в третьей группе показатель был ниже в два раза –0,2 ± 0,1, тогда как в контрольной группе – 0,3 ± 0,5.
Во 2-ой опытной группепроизошел резкий сдвиг микробиоты в сторону лактобацилл, как и в предыдущем опыте с цыплятами-бройлерами, получавшими комбикорма с питательностью согласно рекомендациям по работе с кроссом, с включением 45% ячменя по массе комбикорма. Этот показатель составил – 12,5±14,0, а в третьемэксперименте уже – 27,0 ± 22,6, тогда как в контрольной группе и 3-й опытнойгруппе этот показатель составлял – 9,0 ± 4,4 и 16,3 ± 19,5 соответственно, чтона 200% и 65% больше.Показатели микробиоценоза кишечника цыплят контрольной группы изгруппы целлюлозолитиков, были равны 73,7 ± 6,0, что больше, чем во 2-ойгруппе, на – 25,7%, а в 3-ей группе на – 5,9%.
По остальным показателям микрофлоры, в т.ч. – лахноспиры, в контрольной группе было больше, чем в опытных группах на – 37,5 и 57,1% соответственно; руминококки в контроле и у86бройлеров из 3-ей группы были практически на одинаковом уровне, а во 2-ойподопытной группе этот показатель был ниже на – 15,7%. Группа клостридийв контрольной группе была выше, чем в опытных группах – на 19 и 18,4% соответственно; тем не менее бактероидов во второй группе оказалось меньшена 39,8%, чем у птицы из 3-ей и чем 1-ой (контроль) группы; показатель эубактерий во 2-ой опытной группе составлял – 0,2±0,1, в 3-ей подопытной группеи контроле – по 0,1 ± 0,01.В контроле и во второй опытной группе была обнаружена условно-патогенная микрофлора: количество энтеробактерий составило – 2,8 ± 2,4 и 0,1 ±0,1 соответственно.
В 3-ей опытной группе данный показатель был равеннулю.Актиномицеты, которые являются возбудителями актиномикозов, входе опыта встречались у всей птицы. У бройлеров 2-ой опытной группы данный показательны был больше на 150%, чем у остальных цыплят.Кроме резидентной микрофлоры, обычно в желудочно-кишечном трактеспорадически встречаются и другие микроорганизмы, именуемые транзиторными, однако в ходе проведения данного эксперимента ни в одной из групптранзиторная микрофлора не встречалась.Некультивируемая микрофлора у всех групп была примерно на одинаковом уровне и колебалась от 10,6 ± 4,2 до 11,7 ± 6,4.Результаты определения структуры бактериального сообщества с помощью NGS секвенирования в опыте с включением 20% подсолнечного шротапо массе комбикорма представлены на диаграмме 10.
Среди бактериофлорыслепых отростков ЖКТ тракта цыплят выделено 8 семейств автохтонных бактерий, 7 семейств аллохтонных бактерий и некультивируемые бактерии.Среди автохтонных культур преобладали бактероиды 29,7% (группа 3), лактобактерии 27,0% (группа 2), клостридии 23,1% (группа 1). Наибольшаядоля условно-патогенных бактерий соответствовала энтеробактериям – 2,8%(группа 1).
Среди «других» бактерий доминировали протеобактерии 2,0%(группа 3). Доля некультивируемых бактерий изменялась от 10,6% (группа 3)87до 11,7% (группа 1, 2). Необходимо подчеркнуть, что в присутствии подсолнечного шрота увеличилась доля лактобактерий во всех вариантах опыта: в 3раза с включением в корм шрота и в 1,8 раз – шрота и пробиотика.Рис. 9. Распределение доли микрофлоры в ЖКТ цыплят по данным NGS -секвенирования при включении в рацион комбикорма с 60% кукурузы (группа1), комбикорма с 20% подсолнечного шрота (группа 2) и комбикорма с включением 20% подсолнечного шрота и ферментативного пробиотика Целлобактерин-Т (группа 3).Результаты применения T-RFLP-анализа для изучения качественного иколичественного распределения полезной бактериофлоры и других групп бактерий отражены на диаграмме 11.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
