Диссертация (1151541), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Обнаружено 9 семейств автохтонных бактерий, 10 семейств аллохтонных бактерий и некультивируемые виды. Среди автохтонных культур преобладали лактобактерии 19,73% (группа 3), бактероиды 12,5% (группа 2), вейлионеллы 11,3% (группа 1). Наибольшая доляусловно-патогенных бактерий соответствовала актиномицетам – 4,19%(группа 1). Среди патогенных бактерий доминировали пептококки 3,84%(группа 1), пастереллы 1,77% (группа 1), патогенные клостридии 1,69%(группа 1). Транзиторные бактерии, представленные исключительно псевдомонадами, доминировали в контроле 9,11%, меньше всего 5,2% их встречалось у цыплят, получающих в рационе 20% подсолнечного шрота.
Доля88некультивируемых бактерий изменялась от 9,27% (группа 1) до 15,0% (группа2).Рис. 10. Распределение доли микрофлоры в ЖКТ цыплят по данным T-RFLPанализа при включении в рацион комбикорма с 60% кукурузы (группа 1), комбикорма с 20% подсолнечного шрота (группа 2) и комбикорма с включением20% подсолнечного шрота и ферментативного пробиотика Целлобактерин-Т(группа 3)Важно отметить, что в присутствии пробиотика увеличилась доля бациллв 2 раза, лактобактерий в 1, 4 раза.
Изменилась структура сообщества целлюлозолитических бактерий с преобладанием бактероидов, доля которых увеличилась в 1,9 раза. Одновременно снизилась доля условно-патогенных бактерийсемейства энтеробактерии в 1, 6 раз. Сократилось количество патогенных клостридий в 1, 3 раза, пастерелл в 2,2 раза и пептококков в 2 раза. Комбинацияподсолнечного шрота с пробиотиком вызвала уменьшение доли бактерий псеводомонадного комплекса в 1,6 раз, а доля некультивируемых видов возрослав 1,25 раза.89Таблица 19. – Микробиота кишечника бройлеров, определенная методом TRFLP-анализ (опыт 3)ГруппаПоказатель1-контрольная2-опытнаяПолезная микрофлораБациллы2,17 ± 1,254,6 ± 4,87Лактобациллы13,8 ± 3,118,83 ± 20,9Бифидобактерии00,87 ± 1,23Вейлионеллы11,3 ± 1,797,15 ± 1,32Целлюлозолитики, в т.ч.40,2 ± 3,637,4 ± 4,37лахноспиры4,55 ± 4,383,75 ± 3,29руминококки7,7 ± 1,65,73 ± 0,45клостридии9,43 ± 4,256,2 ± 3,66бактероиды5,15 ± 2,1912,5 ± 8,99эубактерии9,51 ± 5,67,93 ± 5,44Условно-патогенные бактерииЭнтеробактерии3,2 ± 1,282,7 ± 3,54Актиномицеты4,19 ± 4,082,44 ± 1,46Патогенные бактерииФузобактерии2,49 ± 23,0 ± 0,09Листерии0,17 ± 0,190,17 ± 0,06Стафилококки0,46 ± 0,410,18 ± 0,25Кампилобактер0,12 ± 0,110,42 ± 0,34Патогенные клостидии1,69 ± 0,691,14 ± 0,95Пастереллы1,77 ± 0,740,96 ± 1,08Пептококки3,84 ± 2,281,28 ± 0,27Транзитные бактерииПсевдомонады9,11 ± 2,165,2 ± 3,64Некультивируемые видыНекультивируемые9,27 ± 2,6615 ± 13,63-опытная4,51 ± 4,5819,73 ± 4,640,26 ± 0,459,41 ± 0,6337,5 ± 2,62,84 ± 2,096,24 ± 0,748,56 ± 3,310 ± 3,57,9 ± 3,382,0 ± 0,734,02 ± 3,732,71 ± 0,170,31 ± 0,320,06 ± 0,10,34 ± 0,131,22 ± 1,370,88 ± 0,791,92 ± 1,045,49 ± 3,8811,6 ± 3,37Целлюлозолитические бактерии (в том числе - эубактерии, руминококки, лахноспиры, бактероиды) необходимы птице для расщепления клетчатки растительных компонентов кормов в связи с отсутствием у нее собственных пищеварительных ферментов для расщепления целлюлоз и других полисахаридов.Общая доля целлюлозолитических бактерий в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров при введении в рацион Целлобактерина-Т не изменялась.90При этом введение в рацион пробиотика Целлобактерин-Т оказало существенное влияние на видовой состав целлюлозолитических бактерий:- увеличивалось содержание руминококков - на 8,9%, клостридий – на 38,06%,- снижалось содержание бактероидов – на 20%, лахноспир – на 20,27%, эубактерий – на 0,38 % соответственно.Лактобактерии (молочнокислые бактерии) обладают, как правило, значительной антимикробной активностью в отношении патогенов ЖКТ.
В связис этим, лактобактерии необходимы для подавления развития в кишечникептицы патогенных и условно-патогенных бактерий.Результаты исследований показали, что доля лактобактерий в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров при добавлении в рацион Целлобактерина-Т увеличилась на 4,78%Бациллы выполняют ряд полезных функций в пищеварительном тракте:- благодаря ферментативным комплексам способствуют повышенномуусвоению углеводных компонентов рациона (клетчатки и др.);- благодаря антимикробным свойствам подавляют развитие патогенныхмикроорганизмов и способствуют формированию полезного микробного состава в ЖКТ.Доля бацилл в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров при введении в рацион Целлобактерина-Т не изменялась.Полезные бифидобактерии в кишечнике птицы, как правило, обладаютвысоким спектром антагонистической активности против патогенных микроорганизмов.Показано, что бифидобактерии практически не выявлялись в слепых отростках ЖКТ птицы.
При введении в рацион пробиотика доля бифидобактерий в бактериальном сообществе снижалась на 70,11%.91Селеномонады необходимы птице для процессов ферментации корма обладают способностью разлагать органические кислоты – продукты ферментации кормов.Установлено, что содержание селеномонад в слепых отростках ЖКТ исследуемых бройлеров повышалось при добавлении в рацион ЦеллобактеринаТ – на 31,61%.В настоящее время установлено, что выявленные в слепых отросткахбройлеров патогенные бактерии (стафилококки, фузобактерии, кампилобактерии, пастереллы, клостридии, пептококки) являются постоянными обитателями ЖКТ птиц и могут достаточно длительно существовать в организме, невызывая заболеваний, а также могут быть вытеснены из организма полезнымисимбиотическими представителями «нормальной» микрофлоры, например,полезными лактобактериями и бациллами.
Однако при неудовлетворительныхзоогигиенических условиях содержания птиц, плохом качестве скармливаемого корма, при несбалансированном кормлении, резкой смене рациона происходит нарушение кишечной микрофлоры птиц: активное размножение патогенных бактерий и вытеснение ими представителей нормальной микрофлоры со всеми вытекающими из этого негативными последствиямиЭнтеробактерии являются представителями нежелательной микрофлоры ЖКТ птицы, т.к. способны вызывать гастроэнтериты птицы. Группа энтеробактерий включает в себя сальмонелл, шигелл, энтеробактер, кишечнуюпалочку и др.Установлено, что содержание энтеробактерий в слепых отростках ЖКТисследуемых бройлеров при включении в рацион пробиотика ЦеллобактеринТ снижалось на 25,93%.Содержание нежелательных актинобактерий (возбудителей актиномикозов) в слепых отростках ЖКТ бройлеров при включении в рацион пробиотика повышалось на 65,57%.Патогенные фузобактерии – возбудители некробактериозов птицы.92Установлено, что содержание фузобактерий в слепых отростках ЖКТбройлеров существенно снижалось при добавлении в рацион пробиотика Целлобактерина-Т- на 9,69%.Патогенные кампилобактерии – возбудители гастроэнтеритов птицы.Установлено, что доля кампилобактерий в слепых отростках ЖКТ привведении в рацион бройлеров Целлобактерина-Т понижалась на 19,05%.Патогенные стафилококки – возбудители стафилококковой инфекции.Стафилококки патогенны для животных и птицы, продуцируют токсины иферменты, способствующие распространению возбудителя в тканях и вызывающие нарушение жизнедеятельности клеток макроорганизма, при этом вызывая местное воспаление с некрозом и нагноением, что способствует дальнейшему развитию токсикоинфекции.Установлено, что доля стафилококков в слепых отростках ЖКТ при добавлении в рацион бройлеров Целлобактерина-Т снижается на 66,67%, пастерелл –на 8,33%.Патогенные клостридии – Clostridium botulinum, Clostridium perfringens,Clostridium noviy – возбудители клостридиозного энтерита, ботулизма, диареи,могут вырабатывать токсины и вызывать некрозы кишечника.Установлено, что доля патогенных клостридий в слепых отростках ЖКТпри добавлении в рацион бройлеров Целлобактерина-Т – не изменялась.Кроме того, анализ полученных данных показал, что у всей исследуемойптицы в кишечнике значительная часть представлена некультивируемымибактериями.
Данные микроорганизмы невозможно выявить и изучить с помощью традиционных методов микробиологии - культивирования на питательных средах, а также их роль в пищеварении птицы, которая может быть далеконе всегда положительной. Для точного установления их роли в пищеварениинеобходимо провести статистическую обработку (корреляционный анализ зависимости показателей переваримости кормов и продуктивности птиц с количеством каждого из филотипов данных микроорганизмов в ЖКТ).93Установлено, что содержание некультивируемых бактерий в слепых отростках ЖКТ при добавлении в рацион бройлеров Целлобактерина-Т уменьшалась на 22%.Среди представителей транзитных бактерий, поступающих с кормом,выявлены псевдомонады, доля которых была высокой в слепых отросткахбройлеров.
Установлено, что доля псевдомонад в слепых отростках ЖКТ придобавлении в рацион бройлеров Целлобактерина-Т существенно не изменялась по сравнению с контролем.Таким образом, включение подсолнечного шрота в рецептуру комбикорма приводит к изменению структуры микробиоценоза слепых отростковкишечника. Заметно увеличивается (на 61,6%) доля некультивируемых бактерий. При этом общая доля бактерий – целлюлозолитиков практически не меняется (40,2% и 37,4% соответственно). Существенно меняется структура сообщества целлюлозолитических микроорганизмов.
Резко возрастает доля бактероидов (в 1,4 раза), при этом сокращается доля клостридий и руминококков.Необходимо отметить возрастание долей бацилл и молочнокислых бактерийна фоне использования подсолнечникого шрота.Результаты анализа микрофлоры слепых отростков ЖКТ бройлеров с использованием метода ПЦР в реальном времени представлены в таблице 20.Таблица 20. – Результаты анализа микрофлоры слепых отростков ЖКТ бройлеров с использованием метода ПЦР в реальном времени, тысяч геномов/гМикроорганизмы1Общее количествобактерийопыт 160%кукурузы22 500000опыт 260%60%пшекукуницырузы341 6001 515000000Нормофлораопыт 345%ячменябезшрота51 002500625%шрота71 1001 000 000000941Род Lactobacillusspp.Род Eubacteriumspp.23456725000160 00044 0009 0008 00063 00015 0004 00013 00010 00010 0008 500Нежелательная микрофлораСем.EnterobacteriaceaeАктиномицеты(Mobiluncus spp.,Corynebacteriumspp.)20012 5005 00020 0002 1004 0003,653,23,03463ПатогеныРодStaphylococcusspp.Род Candida spp.4,42502,56,31 1252 0006,37,18808,38,3По результатам таблицы видно, что в ходе первого эксперимента, заменав рационе цыплят кукурузы на эквивалентный объем пшеницы привела к сокращению общего количества бактерий на 36%, Lactobacillus spp.
на 72,5%,Eubacterium spp. на 73,34%, при этом повысилось количество нежелательнойи патогенной микрофлоры, а именно: Enterobacteriaceae в 62,5 раза, актиномицетов на 38,88%, Staphylococcus spp. в 56,81 раз, Candida spp. на 12,7%.Результаты, полученные во втором эксперименте с включением 45% ячменя в состав комбикорма, также свидетельствуют о снижении общего количества бактерий в слепых отростках желудочно-кишечного тракта цыплятбройлеров на 33,83%, Lactobacillus spp. на 11,11%, Eubacterium spp. на 23,08%,при одновременном увеличении количества нежелательной и патогенной микрофлоры (Enterobacteriaceae в 4 раза, Staphylococcus spp.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
