Диссертация (1151541), страница 17
Текст из файла (страница 17)
в 2,52 раз, Candidaspp. в 10 раз.Результаты, полученные в ходе третьего эксперимента с заменого соевого шрота на подсолнечный в составе комбикорма бройлеров, свидетель-95ствуют об увеличении общего количества бактерий на 9,09%, при этом отмечается снижение количества Lactobacillus spp. на 60,31%, Eubacterium spp. на15% и увеличение количества нежелательной и патогенной микрофлоры:Enterobacteriaceae в 1,9 раз, актиномицетов на 85,29%, Staphylococcus spp. в1,77 раза.Результаты научно-производственных экспериментов наглядно показывают, что микрофлора слепых отростков кишечника цыплят-бройлеров различалась по структуре.
Наибольшее количество полезной микрофлоры и снижение нежелательной и патогенной было отмечено у цыплят-бройлеров, в составкомбикорма которых включали Целлобактерин-Т в дозе 1 кг на тонну корма втечение всего периода выращивания, что способствовало повышению переваримости основных компонентов комбикорма, увеличению среднесуточныхприростов и сохранности молодняка птицы.3.4.
Экологические индексы биоразнообразияСходство и различия в составе микробиомов слепых отростков при скармливании цыплятам-бройлерам различных питательных рационов подтверждаются и результатами расчета индексов биоразнообразия.Для оценки изменения структуры микробного сообщества ЖКТ цыплятбройлеров на фоне применения в рационе пробиотика и комбикормов, содержащих подсолнечный шрот, ячмень и пшеницу, и анализа численных значенийосновных свойств микрофлоры рассчитаны индексы Симпсона (Simpson – 1D), Шеннона (Shannon – H), Менхинику (Menhinick – DMn), Маргалефу(Margalef – DMg) и индекс выровненности по Пиелу (Мэгарран,Э. 1992).
Приинтерпретации результатов учитывалось, что индексы 1-D и Н чувствительнык количеству видов в сообществах, но малочувствительны к их численности.Напротив, индексы DMn и DMg более чувствительны к численности отдельныхвидов микроорганизмов. В результате анализа перечисленных индексов био-96разнообразия выявлен ряд особенностей. Значения индекса Симпсона исследованных микробных сообществ ЖКТ цыплят в опыте и контроле оказалисьстабильными и изменялись от 0,95 до 0,98 (рис. 11).Рис. 11.
Значения индексов Симпсона и выравнивания по Пиелу для микробных сообществ ЖКТ цыплят с разными рационамиВ случае с применением пробиотиков на фоне комбикорма с 20% подсолнечного шрота выравненность оказалась выше для опыта с ЦеллобактериномТ (0,55).
В случае с применением пробиотиков на фоне комбикорма с 45% ячменя наибольшая выравненность отмечена для опыта с включением ячменя(0,56). При использовании в корме пробиотика и пшеницы максимальный индекс выровненности зарегистрирован для контрольной группы (0,59). Полученные результаты свидетельствуют об обилии обычных видов микроорганизмов в составе аутофлоры ЖКТ цыплят, как в контроле, так и в опыте.Индекс Шеннона находился в диапазоне от 3,67 до 4,28. Индексы Менхиника и Маргалефа, рассчитанные для оценки изменения биоразнообразияаутофлоры ЖКТ в условия опыта и контроля, существенно колебались, что,вероятно, зависит от пищевой специализации видов в микробном сообществеи разнокачественности комбикорма. Кроме того, развитие микрофлоры кишечника домашней птицы является очень динамичным и зависит от большого97количества параметров, включая качество окружающей среды, плотность посадки, рацион, методы кормления, условия содержания, наличие патогенов, атакже возраст цыплят (Torok, V.A.
et al., 2007). Считается, что для домашнейптицы состав микробного сообщества ЖКТ сильно изменяется в течение первых 2-3 недель жизни и окончательно устанавливается только к 5-6 недели илипозже (Albazaz Rojan, J., 2014). Самые высокие значения индексов DMn и DMgустановлены для микрофлоры ЖКТ контрольных групп цыплят, получающихкомбикорма без включения шрота, ячменя, пшеницы и пробиотика (DMn =13,73 и DMg = 29,6) (рис. 12).Характерно, что на фоне сочетанного действия 20% подсолнечного шротаи пробиотика и 60% пшеницы и пробиотика показатели видового богатства идоминирования снижались от 10,41-13,73 в контроле до 9,50-10,71 в опыте спробиотиком (для DMn) и от 21,79-29,6 в контроле до 20,41-23,02 в опыте с добавлением Целлобактерина-Т (для DMg).Рис.
12. Значения индексов Менхиника, Маргалефа и Шеннона для микробныхсообществ ЖКТ цыплят с разными рационамиВ случае с включением в рацион цыплят пробиотика на фоне комбикормас 45% ячменя оба показателя видового биоразнообразия по Менхинику и по98Маргалефу увеличились от 9,93 (контроль) до 11,80 (опыт с включением пробиотика) DMn и от 21,35 (контроль) до 24,70 (опыт с включением пробиотика) DMg.Таким образом, применение экологических индексов позволило оценитьвзаимовлияние аутофлоры ЖКТ цыплят в опыте и контроле с пробиотическоймикрофлорой, сравнить их между собой и выделить наиболее важные, влияющие на них характеристики кормов.
Учитывая, что при повышении конкуренции между аутофлорой ЖКТ цыплят и пробиотическими бактериями в относительно небольшой период времени разнообразие уменьшается, вероятно,что при ее наличии в течение пролонгированного периода кормления опытныхгрупп цыплят комбикормом с включением ферментативного пробиотика, микробное разнообразие видов ЖКТ будет иметь тенденцию к увеличению, в томчисле, и за счет преимущества синергизма при микробной ферментации.Таблица 21.
Результаты действия пробиотика на биоразнообразие микробиотыЭкологический индексопыт 11к2оопыт 23о1к2оопыт 33о1к2о3оПоказатель биоразно4,07 3,67 3,92 3,81 4,11 4,10 4,28 4,04 4,06образия ШеннонаПоказатель доминиро0,98 0,96 0,97 0,95 0,97 0,97 0,97 0,97 0,97вания СимпсонаИндекс выровненно0,59 0,53 0,54 0,48 0,56 0,53 0,54 0,53 0,55сти по ПиелуПоказатель видовогобиоразнообразия по 10,41 7,49 9,50 9,93 11,11 11,80 13,73 10,90 10,71МенхиникуПоказатель видовогобиоразнообразия по 21,79 16,01 20,41 21,35 23,89 24,70 29,6 23,45 23,02МаргалефуУстановлено, что индексы Шеннона, Симпсона, Пиела, Менхиника,Маргалефа были близки для микробиотов слепых отростков кишечника цыплят, рацион которых содержал меньшее количество сырой клетчатки. Приэтом в результате скармливания рациона с включением 20% подсолнечного99шрота микробиом слепых отростков кишечника цыплят имел наибольшие различия по сравнению с остальными опытными группами.Установлено, что бактериальное сообщество слепых отростков в вариантах с наибольшим содержанием сырой клетчатки в питательном рационецыплят характеризовалось наименьшей величиной индекса Шеннона(4,06±0,29), что указывает на наибольшую определенность и однородность состава данного микробоценоза.
Кроме того, в той же группе были выявлены исамые низкие значения показателя видового биоразнообразия по Менхиникуи Маргалефу.Судя по значениям экологических индексов, в опытных группах цыплят,рацион которых содержал меньшее количество клетчатки, структура микробоценоза слепых отростков кишечника характеризовалась наибольшей неоднородностью. Стоит отметить, что структура бактериального ценоза была связана с показателями продуктивности исследуемых цыплят-бройлеров.При этом наиболее высокие показатели продуктивности были отмеченыв опытных группах с более низким уровнем сырой клетчатки в питательномрационе.Таким образом, результаты анализа микробного населения слепых отростков кишечного тракта с использованием молекулярно-генетических методов, NGS-секвенирования и количественной ПЦР позволили выявить важныеособенности протекания микробиологических процессов пищеварения.3.5.
Результаты корреляционного анализаВыполнен анализ корреляции между содержанием микроорганизмов ипоказателями переваримости и использования питательных веществ в опытахпо включению в рацион цыплят пшеницы, ячменя и подсолнечного шрота вкомбинации с пробиотиком Целлобактерином- Т. Показатели переваримостиучитывались для оценки количества питательных веществ, поступивших в организм цыплят, энергетической, белковой и аминокислотной питательностикорма.
Значения микробного фона ЖКТ птицы необходимы для определения100изменения параметров качества кормления и дисбаланса в составе микрофлоры, при которых возможно развитие дисфункции физиологических и биохимических процессов, нарушение пищеварения и усвоения питательных веществ (Torok V.A.
2011). Для коммерческого птицеводства это является серьёзной проблемой, связанной с ухудшением конверсии корма, развитием уптицы заболеваний различной этиологии и снижением прибыльности (AlemkaA. et al., 2010; Scupham A., 2009). С помощью ряда исследований доказано,что состав микрофлоры кишечника существенно сказывается на приросте живой массы у бройлеров (Kerr A.K. et al., 2013; Brisbin J.T., et al. 2010). Несмотряна то, что для птицы характерно пищеварение, при котором источником ферментов служат пищеварительные железы, значительная роль в перевариваниитрудногидролизуемых компонентов корма отводится микрофлоре в слепыхотростках и толстом отделе кишечника (Svihus B et al, 2013; Zdunczyk Z. et al,2015).Результаты вычисления коэффициента ранговой корреляции Спирменамежду содержанием микроорганизмов в слепых отростках ЖКТ испытуемойгруппы цыплят и показателями переваримости и использования питательныхвеществ в корме представлены на рисунке 13.Положительная зависимость установлена между бациллами (А.1) и показателями переваримости азотсодержащих органических компонентов корма(а, е), что характерно для активных протеолитиков, которыми являются бактерии бациллярной группы.
Содержание лактобактерий (А.2) активных участников ферментации корма, положительно коррелировало только с параметрами переваримости и использования жира (в), сырой золы (е) и азота (ж). Характерно, что функция расщепления клетчатки оказалась тесно связана с содержанием лахноспир (r = 0,75), энтеробактерий (r = 0,76), пастерелл (r = 0,74),некультивируемых видов бактерий (r = 0,67), кампилобактерий, пептококкови псевдомонад (r = 0,24; 0,26 и 0,25, соответственно).Таблица 22. Показатели корреляции между содержанием микроорганизмов и показателями переваримости и использования питательных веществ по результатам опытов 1, 2, 3МикроорганизмОрганическоевеществоБациллыЛактобациллыБифидобактерииВейлионеллыЦеллюлозолитики, в т.ч.лахноспирыруминококкиклостридиибактероидыэубактерии-0,11-0,17-0,130,05-0,260,570,04-0,21-0,720,11ЭнтеробактерииАктиномицеты0,56-0,35ФузобактерииЛистерииСтафилококкиКампилобактерПатогенные клостидииПастереллыПептококки0,13-0,250,32-0,21-0,360,350,15Псевдомонады0,39Некультивируемые0,35СыраяСыройклетчаткажирПолезная микрофлора0,050,03-0,36-0,58-0,060,24-0,46-0,170,490,1-0,39-0,210,04-0,52-0,560,470,750,28-0-0,480,140,31-0,3-0,72-0,32-0,42-0,43-0,33-0,54-0,26Условно-патогенные бактерии0,520,760,370,22-0,090,08Патогенные бактерии-0,24-0,330,34-0,170,010,19-0,06-0,2-0,010,140,24-0,190,27-0,04-0,240,270,740,44-0,090,260,32Транзитные микроорганизмы0,230,250,37Некультивируемые бактерии0,480,670,28ПротеинСыраязолаАзотБЭВОЭ свОЭ пв-0,330,11-0,35-0,39-0,230,54-0,27-0,190-0,420,260,14-0,05-0,1-0,30,3-0,21-0,22-0,670,36-0,12-0,23-0,180,13-0,170,530,06-0,12-0,620,11-0,23-0,380,330,420,090,150,61-0,1-0,40,05-0,41-0,370,210,410,020,320,56-0,14-0,480,030,56-0,570,14-0,260,56-0,380,150,380,39-0,08-0,07-0,190,430,19-0,40,68-0,21-0,08-0,630,230,25-0,460,260,430,13-0,050,27-0,36-0,260,240,040,630,30,2-0,660,08-0,110,170,610,230,33-0,650,040,05-0,01-0,280,220,380,350,470,470,10,32-0,060,09102Таблица 23.
Показатели корреляции между содержанием микроорганизмов и количеством компонентов в рационе по результатам опытов 1,2,3МикроорганизмПшеницаШротЯчменьБациллыЛактобациллыБифидобактерииВейлионеллыЦеллюлозолитикилахноспирыруминококкиклостридиибактероидыэубактерии-0,02-0,45-0,210,430,61-0,470,320,670,470,09-0,250,120,51-0,09-0,340,10,15-0,53-0,2-0,230,480,61-0,23-0,26-0,21-0,28-0,62-0,06-0,020,44ЭнтеробактерииАктиномицеты-0,310,270,190,41-0,45-0,29ФузобактерииЛистерииСтафилококкиКампилобактерПатогенные клостдииПастереллыПептококки-0,160,06-0,24-0,090,61-0,55-0,460,230,44-0,28-0,4-0,020,220,41-0,53-0,41-0,170,59-0,27-00,40,10,44-0,13-0,250,08-0,31ПсевдомонадыНекультивируемыеШрот со- Шрот подсолевыйнечныйПолезная микрофлора-0,29-0,140,18-0,19-0,20,20,11-0,60,57-0,190,45-0,47-0,260,24-0,210,790,11-0,130,160,05-0,07-0,340,33-0,28-0,39-0,260,3-0,40,26-0,25Условно-патогенные бактерии0,70,05-0,08-0,33-0,250,22Патогенные бактерии0,57-0,080,050,03-0,20,160,670,29-0,27-0,21-0,080,14-0,440,16-0,170,50,17-0,21-0,170,21-0,28Транзитные микроорганизмы-0,320,39-0,47Некультивируемые бактерии0,56-0,270,27КукурузаГлютенМукарыбнаяМаслоИзвестнякМонокальций фосфат0,360,27-0,43-0,3-0,150,11-0,580,1-0,010,1-0,25-0,7-0,060,690,84-0,360,830,690,350,18-0,180,280,5-0,24-0,520,18-0,06-0,66-0,28-0,26-0,250,120,51-0,09-0,340,10,15-0,53-0,2-0,23-0,250,120,51-0,09-0,340,10,15-0,53-0,2-0,23-0,02-0,53-0,280,290,250,320,190,410,190,41-0,46-0,420,070,63-0,220,15-0,050,460,050,34-0,50,42-0,64-0,580,110,4-0,35-0,26-0,110,360,520,230,44-0,28-0,4-0,020,220,410,230,44-0,28-0,4-0,020,220,41-0,35-0,080,430,440,440,11-0,340,150,080,08103Таблица 24.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
