Диссертация (1151508), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Из смывов с образцов приготовлялидесятикратные разведения (см. выше), из которых делали посев в рядпробирок с жидкой селективной средой лактозный бульон с желчью ибриллиантовым зеленым по схеме, описанной выше.92Исследования по схеме 3 (ГОСТ 50454-92) занимали 96 ч, требовали большевсего затрат на расходные материалы, но в то же время данный методоказался наиболее чувствительным по сравнению с 1 и 2 схемойисследования.
Как видно из таблицы 48, количество БГКП в 1 см3 смыва спродукта оказалось наибольшим, E.coli удалось выделить из 7 проб (1, 3, 7, 9,10 образцы охлажденной продукции и 14, 20 замороженной продукции).Родовой и видовой состав колиформ, выявленных при 3 схеме исследованияприведен в таблице 48.Таблица 48Определение количества колиформных микроорганизмов (БГКП) и E.coliметодом НВЧ№ пробы1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11.12.13.14.15.16.17.18.19.20.Кол-во БГКП в 1 см3 смыва с продукта3,2х1042,2х1043,4х1042,6х1043,2х1042,8х1044,4х1042,6х1043,4х1042,8х1042,1х1041,0х1040,9х1041,8х1041,6х1041,9х1041,6х1040,8х1041,4х1041,7х104Кол-во E.coli в 1 см3 смывапродукта0,06х1040,02х1040,06х1040,06х1040,3х1040,12х1040,1х104Результаты исследования образцов мяса птицы согласнометодическим рекомендациям «Определение колиформных бактерий и E.coli с использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных средпроизводства Merck (Германия)» ( схема 4) .93Испытанию подвергли образцы мяса птицы, которые исследовали по тремсхемам, описанным выше.Согласно данным таблицы 49, количественное определение БГКП(колиформ) сопоставимо с данными, полученными при исследовании посхемам 1 и 2.
Количество E.coli было определено в 7 пробах (1, 3, 7, 9, 10образцы охлажденной продукции и 14, 20 замороженной продукции), чтосоответствует данным, полученным при исследовании по схеме 3. Срокисследования по схеме 4 равен 24 ч.Таблица 49Определение количества колиформных микроорганизмов (БГКП) и E.coliглубиннымиповерхностнымметодомпосевасиспользованиемагаризованной хромогенной среды Chromo cult ,Coliform Agar№ пробы1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11.12.13.14.15.16.17.18.19.20.Количество колиформ в 1 см3 Количество колиформ в 1 см3 Кол-во E.coliсмыва с продукта, определенное смыва с продукта, определенное на среде Эндоглубинным методом посева.поверхностным методом посева2,3х1041,9х1043,0х1041,2х1042,3х1042,2х1043,1х1042,0х1042,0х1042,0х1041,6х1040,7х1040,9х1041,5х1041,2х1041,6х1041,1х1040,1х1041,0х1041,1х1042х1041,6х1042,8х1040,9х1042,3х1041,9х1042,8х1041,9х1042,0х1042,1х1041,0х1040,5х1040,8х1041,1х1041,1х1041,1х1040,9х1040,1х1040,9х1041,0х1040,01х1040,01х1040,03х1040,04х1040,1х1040,1х1040,09х104Результаты исследований родовой и видовой идентификации бактерий,отнесенных к группе кишечных палочек и виду E.coli.94В ходе исследований удалось идентифицировать 174 культурылактозоположительныхмикроорганизмов,отнесенныхкпятиродам,входящим в состав бактерий группы кишечных палочек (колиформных).Количество культур БГКП и E.coli, выделенных из образцов согласнокаждой из четырех схем исследования приведено в таблице 50.Таблица 50Количество культур БГКП и E.coli, выделенных из образцов согласночетырем схемам исследованияМетод исследованияКол-во культурБГКП (колиформных)Кол-во культур E.coliАбс.ГОСТ 7702.2.-93 Схема 1ГОСТ 52816-2007.
Схема 2ГОСТ 50454-92 Схема 3МР по опред.колиформных бактерийиE.coliсиспользованиемхромогенных сред. Схема 442415833%45779,5%12,2%12,1%21,2%Как видно из данных таблицы 50, большее количество культур удалосьизолировать и идентифицировать, следуя схеме 3, что, видимо, связано сиспользованием жидких питательных сред. По 3 схеме исследования E.coliудалось выявить в 7 пробах. 4 схема исследования также позволила выделитьE.coli в 7 образцах, что говорит о высокой чувствительности метода вотношении данных бактерий. Однако количество изолированных, согласно 4схеме исследования, культур бактерий группы кишечных палочек былонаименьшим, что возможно, связано с высокой селективностью хромогенныхпитательных сред.Родовой и видовой состав колиформных бактерий, выявленныхсогласно четырем схемам исследования, представлен в таблице 51.95Таблица 51Частота изоляции различных видов энтеробактерий при использованииразличных схем исследования, предусмотренных НДВидмикроорганизмаГОСТ7702.2.-93схема 1ГОСТГОСТМРпоопред.колиформных5281650454-92.бактерийиE.coliс2007схема 3использованиемхромогенныхсхема 2сред, схема 4Количество выделенных культур абс./%Klebsiella oxetocaKlebsiellapneumoniaeEnterobacteraerogenesEnterobacter cloacae2/10%15/75%3/15%16/80%2/10%20/100%16/80%6/30%5/25%10/50%9/45%5/25%4/20%7/35%1/5%Serratia odoriferaE.coliCitrobacter sp.4/20%4/20%-8/40%5/25%-8/40%7/35%4/20%7/35%-Как видно из таблиц 50 и 51, максимальное количество культурБГКП было изолировано из образцов куриного мяса по 3 схемеисследования, с использованием жидких селективных питательных сред иподсчетом методом НВЧ – 58 культур колиформных бактерий, 7 из которыхмы отнесли к E.coli, остальные, согласно идентификации с помощью микротест-систем ЭНТЕРО-Рапид 24 к шести видам и пяти родам.Проведение исследования по 1 и 2 схемам с использованиемповерхностного и глубинного посевов на плотную селективную питательнуюсреду Эндо позволиловыделить соответственно 42 и 41 культуруколиформных бактерий, относящихся к пяти родам и видам (таблица 51).E.coli по первой схеме выделили в 4, по 2 схеме – в 5 случаях.
Использованиев ходе исследования хромогенных питательных сред (схема 4) позволилавыявить 33 культуры колиформных бактерий, которые мы отнесли кчетырём видам и пяти родам. В 7 случаях выделили E. coli.При микробиологическом исследовании мяса птицы наибольшейчувствительностью по показателю выявления БГКП и E.coli обладают метод96по ГОСТ Р 50454-92 и метод с применением хромогенных сред. Этимиметодами выделенонаибольшее количество БГКП и E.coli (выделеныбактерии 5 родов и 7 видов семейства Enterobacteriaceae).При проведении лабораторных исследований наиболее приемлемый вплане быстроты и эффективности одновременной идентификации БГКП иE.coli является метод с применением хромогенных питательных сред (срокисследования 24 часа).
В качестве подтверждающего метода рекомендуетсяиспользовать эффективный метод по ГОСТ Р 50454-92(срок исследования до96 часов.)2.10. Анализ эпизоотической ситуации по сальмонеллезу(поданным годовых отчетов формы 4-вет ветеринарных лабораторийМосковской области за 2010 - 2013 гг.)Возбудители данной болезни - сальмонеллы, относятся к семействуEnterobacteriaceae, роду Salmonella. Это большая группа, насчитывающаяболее 2 500 сероваров. По современной классификации, предложенной ВОЗ в1987г., род Salmonella включает только один вид.
В этом виде насчитывается7 подвидов, каждый подвид разделяется на серовары в соответствии с О- и Нантигенной специфичностью штаммов.Сальмонеллез встречается во всех регионах мира. Бактерия Salmonellaширокораспространенасредидомашнихидикихживотных,преимущественно среди животных, используемых в пищу, таких какдомашняя птица, свиньи и крупный рогатый скот; и среди домашнихживотных, включая кошек и собак, птиц и рептилий, черепах.Широкоеиспользованиеантибиотиковвсельскомхозяйствеспособствует селекции резистентных клонов микроорганизмов. С начала1990-х г. стали появляться штаммы Salmonella, устойчивые к целому рядупротивомикробных препаратов, которые в настоящее время представляютсерьезную проблему для общественного здравоохранения.
Резистентные97клоны, персистирующие у животных, могут инфицировать пищевую цепочкуи через продукты питания передаваться людям.Задачи данного анализа:-определить,ккакомуспектруантибиотическихпрепаратовсоответствовала антибиотикорезистентность, с учетом видов животных;-определитьраспространенностьрезистентностикSalmonellaопределенным препаратам ;- выявить потенциальные проблемы для здоровья человека, связанные срезистентностью штаммов микроорганизмов, выделенных от животных ;- сбор информации по штаммам Salmonella, которые влияют нарезистентность организма животных ;-использованиеданныхпоантибиотикорезистентностидляинформирования ветеринарных специалистов при использовании препаратовдля лечению животных и профилактических мероприятий на комплексах .ВПринастоящеевремяназначениииспользуетсяантибиотиковширокийкругнеобходимоантибиотиков.руководствоватьсярациональностью использования того или иного антибиотика («рациональнаяантибактериальнаятерапия»).Обязательнымявляетсявыделениевозбудителя болезни, определение его чувствительности к лекарственнымпрепаратам.
Выбор лекарственного препарата обязательно надо проводить сучетом механизма действия, метода введения .Анализ результатов лабораторных исследований на сальмонеллез поданным отчетов ветлабораторий РФ за 2012-2013 гг. показал, чтосельскохозяйственныхживотныхиптицвыявлено2384откультурысальмонелл 24 сероваров. Чаще всего их выявляли в Пензенской (106),Московской (64) и Пермской (56) и Тульской (50) областях.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
