Диссертация (1150113), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Константы спин-спинового взаимодействия (КССВ, J) даны в Гц.Сигналы ароматических протонов, образующих спиновые системы второго порядкаAA’XX’в пара-дизамещённых и AA’XX’Y в монозамещённых фенильных кольцах,обычно в спектрах ЯМР 1Н полностью не разрешены, поэтому в таких случаях мыприводим «кажущиеся КССВ» для наблюдаемых «дублетов» и «триплетов». Массспектры высокого разрешения получены наспектрометре Bruker Maxis HRMS-ESIqTOF. УФ спектры поглощения записаны на спектрофотометре Shimadzu UV-1800,спектры возбуждения и эмиссии – на спектрофлуорофотометре Shimadzu RF-5301PCдля 10-5 M растворов в CH2Cl2. Температуры плавления определяли на приборе StuartSMP30.РентгеноструктурныйанализпроводилсянадифрактометрахAgilentTechnologies SuperNova Atlas и Agilent Technologies Xcalibur Eos при температуре 100 K.Для обработки данных использовали программу ShelXL с оболочкой OLEX2 v.1.2.Колоночную и флэш-хроматографию проводили на силикагеле Merck 60 (230-400 mesh).Состав реакционных смесей и полученных при их разделении фракций, а также чистотувыделенных соединений контролировали методом ТСХ на пластинках ALUGRAM SILG/UV254 фирмы Macherey-Nagel.Работа выполнена с использованием оборудования ресурсных центров СПбГУ«Магнитно-резонансные методы исследования», «Методы анализа состава вещества»«Рентгенодифракционные методы исследования» и «Ресурсный образовательный центрпо направлению химия» Научного парка СПбГУ.
Автор выражает благодарностьсотрудникам РЦ за помощь при выполнении работы.В качестве исходных соединений в работе использованы коммерчески доступныереагенты: бензамидин (2), 2,3-дибромпиридин (8) бороновые кислоты (9a-k), анилины83(10a-d), сахарин(40), эфиркоричнойкислоты,стильбенихалкон(41а-с),хлорангидриды карбоновых кислот (44a-b), 2,5-диметокситетрагидрофуран (46).Эфиры2-арил-3-гидроксиакриловыхкислот(1a-d)и(E)-2-(4-нитрофенил)-5-(триметилсилил)-1-этоксипент-1-ен-4-ин-3-он (18) имелись в нашей лаборатории.Метиловый эфир 3-гидрокси-2-(3,4-диметоксифенил)акриловой кислоты (1е) [186], 5-(4нитрофенил)-2-фенил-4-этинилпиримидин (7h) [160] и 2-хлорхинолин-3-карбальдегиды(14a-d) [161] получены по известным методикам.
Температуры плавления и спектрыЯМР описанных ранее соединений хорошо согласуются с литературными данными.Определение ингибирования карбоангидразыОпределение активности СА-катализируемой гидратации СО2 выполнено на прибореApplied Photophysics методом остановленного потока [187]. Для определения начальнойскорости СА-катализируемой гидратации СО2 в период 10-100 с в качестве индикатораиспользован фенол красный (в концентрации 0.2 Mм) детектирование проводили надлине волны λmax 557 нм, буфер - 20 Mм Tris (pH 8.3), для поддержания постояннойионной силы использован 20 ммоль раствор Na2SO4.
Определение кинетическихпараметров и констант ингибирования проводили в интервале концентраций СО2 1.7-17Mм. Определение начальной скорости выполнено, как минимум, по шести точкам припротекании реакции на 5-10%. Скорость некатализируемой реакции установленааналогичным образом и затем вычтена из наблюдаемых общих скоростей.
Растворыингибиторов (0.1 Mм) приготовлены в деионизированной воде, затем разбавлены доконцентрации 0.005 Hм буферным раствором. Для образования комплекса E-I растворыингибитора и энзима были преинкубированы при комнатной температуре в течение 15минут перед проведением эксперимента.
Константы ингибирования рассчитанынелинейным методом наименьших квадратов с использованием PRISM 3 и уравненияЧенга-Прусоффа как опубликовано ранее и представляет среднее значение как минимумтрех независимых экспериментов. Все изоформы СА рекомбинантные [188-190].3.1Синтез исходных соединений3.1.1 Общая методика синтеза пиримидонов 3а-еСмесь 2-арил-3-гидроксиакрилатов 1a-е (2 ммоль) и бензамидина (2) (240 мг,2 ммоль) в ацетонитриле (4 мл) 2 ч перемешивают при 40 °С. По завершенииреакции растворитель упаривают на роторном испарителе, осадок промываютхолодным CH2Cl2 (2×3 мл), сушат на воздухе, получая чистые пиримидоны843а-е. Из-за низкой растворимости этих соединений регистрация их спектров ЯМР 13С небыла осуществлена.2,5-Дифенилпиримидин-4(3H)-он (3a).[191] Бесцветные кристаллы; выход 466 мг (94%);т.пл.
290–291 °C (разл.). Спектр ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6): δ = 7.34-7.38 (м, 1 H, пНА), 7.42-7.45 (м, 2 H, м-НА), 7.52-7.61 (м, 3 H, м,п-НВ), 7.78 (д, J = 7.3 Гц, 2 H, о-НА),8.17 (д, J = 7.1 Гц, 2 H, о-НВ), 8.30 (с, 1 H, Н6) м.д. Масс-спектр (ЭСИ): вычислено дляC16H13N2O 249.1022 [M + H]+; найдено 249.1027.5-(4-Метилфенил)-2-фенилпиримидин-4(3H)-он (3b). Бесцветные кристаллы; выход466 мг (89%); т.пл. 295–296 °C (разл.). Спектр ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6): δ = 2.34 (с,3 H, CH3), 7.24 (д, J = 8.0 Гц, 2 H, м-HA), 7.52-7.59 (м, 3 H, м,п-HB), 7.68 (д, J = 8.0 Гц, 2H, о-HA), 8.16 (д, J = 7.0 Гц, 2 H, о-HB), 8.28 (с, 1 H, H6) м.д. Масс-спектр (ЭСИ):вычислено для C17H15N2O 263.1179 [M + H]+; найдено 263.1185.2-Фенил-5-(4-хлорфенил)пиримидин-4(3H)-он (3c).
Бесцветные кристаллы; выход 485мг (86%); т.пл. >300 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6): δ = 7.49 (д, J = 8.6 Гц, 2H, м-HA), 7.52-7.59 (м, 3 H, м,п-HB), 7.85 (д, J = 8.6 Гц, 2 H, о-HA), 8.18 (д, J = 6.9 Гц, 2 H,о-HB), 8.34 (с, 1 H, H6) м.д. Масс-спектр (ЭСИ): вычислено для C16H12ClN2O 283.0633 [M+ H]+; найдено 283.0630.5-(4-Метоксифенил)-2-фенилпиримидин-4(3H)-он (3d). Бесцветные кристаллы; выход522 мг (94%); т.пл.
285–286 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6): δ = 3.82 (с, 3 H,OCH3), 7.00 (д, J = 8.6 Гц, 2 H, м-HA), 7.51-7.59 (м, 3 H, м,п-HB), 7.76 (д, J = 8.6 Гц, 2 H,о-HA), 8.17 (д, J = 7.3 Гц, 2 H, о-HB), 8.25 (с, 1 H, H6) м.д. Масс-спектр (ЭСИ): вычисленодля C17H15N2O2 279.1128 [M + H]+; найдено 279.1134.5-(3,4-Диметоксифенил)-2-фенилпиримидин-4(3H)-он (3e). Бесцветные кристаллы;выход 554 мг (90%); т.пл. 230–231 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6): δ = 3.79 (с,3 H, OCH3), 3.80 (с, 3 H, OCH3), 7.01 (д, J = 8.8 Гц, 1 H, H5A), 7.39-7.41 (м, 2 H, H2,6A),7.52-7.59 (м, 3 H, м,п-HB), 8.16 (д, J = 6.8 Гц, 2 H, о-HB), 8.32 (с, 1 H, H6) м.д.
Массспектр (ЭСИ): вычислено для C18H17N2O3 309.1234 [M + H]+; найдено 309.1239.3.1.2 Общая методика синтеза 4-хлорпиримидинов 4а-еК суспензии пиримидинона 3а-е (2 ммоль) в DMF (4 мл) добавляют POCl3(0.5 мл, 0.8 г, 5 ммоль), реакционную смесь 15 мин перемешивают при 70 °С,затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в лёд с водой (30 мл)и экстрагируют эфиром (3×10 мл).
Объединенные экстракты промывают85водой (2×10 мл), сушат над Na2SO4, растворитель упаривают на роторном испарителе.Остаток очищают флэш-хроматографией на силикагеле (гексан/EtOAc, 20:1).2,5-Дифенил-4-хлорпиримидин (4a).[191] Бесцветные кристаллы; выход 512 мг (96%);т.пл. 123–124 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, CDCl3): δ = 7.47–7.55 (м, 8 HAr), 8.48–8.52(м, 2 H, о-HB), 8.71 (с, 1 H, H6) м.д.
Спектр ЯМР 13C (100 МГц, CDCl3): δ = 128.6 (CHAr),128.82 (CHAr), 128.84 (CHAr), 129.1 (п-CHA), 129.5 (CHAr), 131.6 (п-CHВ), 132.1 (C5), 134.1(и-CА), 136.2 (и-CВ), 158.5 (CН6), 159.5 (C4), 164.1 (C2) м.д. Масс-спектр (ЭСИ):вычислено для C16H12ClN2 267.0684 [M + H]+; найдено 267.0689.5-(4-Метилфенил)-2-фенил-4-хлорпиримидин (4b). Бесцветные кристаллы; выход 534мг (95%); т.пл. 118–119°C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, CDCl3): δ = 2.45 (с, 3 H, CH3), 7.33(d, J =8.0 Гц, 2 H, м-HA), 7.43 (d, J =8.0 Гц, 2 H, o-HA), 7.50–7.54 (м, 3 H, м,п-HB), 8.48–8.50 (м, 2 H, o-HB), 8.70 (с, 1 H, Н6) м.д. Спектр ЯМР13C (100 МГц, CDCl3): δ = 21.5(CH3), 128.6 (CHAr), 128.8 (CHAr), 129.3 (CHAr), 129.5 (CHAr), 131.1 (и-CА), 131.5 (п-CНВ),132.0 (С5), 136.2 (и-CВ), 139.1 (п-CА), 158.5 (СH6), 159.5 (С4), 163.8 (C2) м.д.
Масс-спектр(ЭСИ): вычислено для C17H14ClN2 281.0840 [M + H]+; найдено 281.0847.2-Фенил-4-хлор-5-(4-хлорфенил)пиримидин (4c). Бесцветные кристаллы; выход 577мг (96%); т.пл. 148–149 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, CDCl3): δ = 7.45–7.54 (м, 7 H),8.47–8.50 (м, 2 H, o-HB), 8.67 (с, 1 H, H6) м.д.
Спектр ЯМР13C (100 МГц, CDCl3): δ =128.7 (CHAr), 128.9 (CHAr), 129.1 (CHAr), 130.8 (CHAr), 130.98 (и-CА), 131.7 (п-CНВ), 132.5(C5), 135.4 (п-CА), 136.0 (и-CВ), 158.3 (СH6), 159.4 (С4), 164.4 (C2) м.д. Масс-спектр(ЭСИ): вычислено для C16H11Cl2N2 301.0294 [M + H]+; найдено 301.0303.5-(4-Метоксифенил)-2-фенил-4-хлорпиримидин (4d). Бесцветные кристаллы; выход576 мг (97%); т.пл. 142–143 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, CDCl3): δ = 3.88 (с, 3 H,CH3O), 7.04 (д, J =8.8 Гц, 2 H, м-HA), 7.46 (d, J =8.8 Гц, 2 H, o-HA), 7.49–7.53 (м, 3 H, м,пHB), 8.47–8.49 (м, 2 H, o-HB), 8.69 (с, 1 H, H6) м.д. Спектр ЯМР 13C (100 МГц, CDCl3): δ= 55.5 (CH3O), 114.3 (м-CНА), 126.2 (и-CА), 128.5 (CHAr), 128.8 (CHAr), 130.8 (CHAr),131.4 (п-CНВ), 131.7 (С5), 136.2 (и-CВ), 158.4 (CH6), 159.5 (С4), 160.3 (п-CА), 163.6 (C2)м.д.
Масс-спектр (ЭСИ): вычислено для C17H14ClN2O 297.0789 [M + H]+; найдено297.0799.5-(3,4-Диметоксифенил)-2-фенил-4-хлорпиримидин(4e).Бесцветныекристаллы;выход 621 мг (95%); т.пл. 146-147 °C. Спектр ЯМР 1H (400 МГц, CDCl3): δ = 3.94 (с, 3 H,CH3O), 3.95 (с, 3 H, CH3O), 6.99 (д, J =8.2 Гц, 1 H, H5A), 7.05-7.08 (м, 2 H, H2,6A), 7.49–867.52 (м, 3 H, м,п-HB), 8.46–8.49 (м, 2 H, o-HB), 8.71 (с, 1 H, H6) м.д. Спектр ЯМР 13C (100МГц, CDCl3): δ = 56.1 (CH3O), 56.2 (CH3O), 111.4, 112.7 (CH2A,5A), 122.2 (C6A), 126.5 (иCА), 128.5 (CHAr), 128.8 (CHAr), 131.5 (п-CНВ), 131.9 (C5), 136.2 (и-CВ), 149.1, 149.9(C3A,4A), 158.4 (СH6), 159.4 (С4), 163.7 (C2) м.д. Масс-спектр (ЭСИ): вычислено дляC18H16ClN2O2 327.0895 [M + H]+; найдено 327.0901.Однореакторный синтез 5-(4-метоксифенил)-2-фенил-4-хлорпиримидина 4d.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
