Диссертация (1146688), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Мечникова. ФГДС проводилось всем пациентам с целью визуализации состояния слизистой оболочки и функциональногосостояния верхних отделов ЖКТ. Использовались гибкие эндоскопы фирмы44«Olympus» модели GIF-Q-160 (Япония). Из залуковичного отдела слизистой оболочки ДПК выполнялась прицельная биопсия во время эндоскопического исследования. Полученный материал фиксировали в 10 % растворе нейтральногоформалина на 12-24 часов, затем заливали в парафин по стандартизированнойметодике для последующего гистоморфологического анализа.Биопсийный материал СО антрального отдела желудка всех пациентов былподвергнут исследованию на уреазную активность Н.Р. Образцы СО желудкасразу помещались на диск HelPil-test (фирмы «Sintana SM»). Оценка результатовисследования проводилась через три минуты.
Тест расценивался как положительный при изменении цвета диска с желтого на зеленый. Степень инфицированности H.Р. в баллах (от 1 до 3-х баллов) устанавливалась по интенсивностиокрашивания диска.2.3.4 Ультрасонографическое исследованиепроводили на аппарате «Sonoline Prima LC» фирмы «Сименс» (Германия),работающем в режиме реального времени, с применением секторных и линейныхдатчиков 3,5 МГц и 7,5 МГц по стандартизированной методике [Мухарлямов Н.М., 1987]. Данное исследование осуществлялось для визуализации размеров, структуры, наличия ультразвуковых признаков изменений печени, желчногопузыря, поджелудочной железы, селезенки, почек.2.3.5 Гистоморфологическое исследованиепроводилось на базе кафедры патологической анатомии СЗГМУ имениИ.И.
Мечникова. Материал фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина на 12–24 часов, затем заливали парафином по общепринятой методике под контролем правильности ориентации биоптата для предотвращения получения поперечных и тангенциальных срезов. Производили серийные парафиновые срезы (от20 до 30 с каждого биоптата) толщиной 3–5 мкм. Для окраски гистологическихсрезов использовали гематоксилин и эозин, пикрофуксин по Ван-Гизону, альциа-45новый синий при рН=1,0; толуидиновый синий.
Проводилась ШИК-реакция иокраска по Романовскому-Гимзе. Для микроскопического исследования и морфометрических измерений использовали микроскоп «Микромед-1» (Россия), окулярный микрометр «Reichert» (Австрия) с комбинированной окулярной стереометрической сеткой, а также демонстрационную насадку к микроскопу «Ампливал» (Россия) со стандартной масштабной сеткой по методике Б.С. Сережина(1993). Для проведения микрофотографирования гистологических препаратов использовали цифровую фотокамеру «Nikon» (Япония).Оценка признаков хронического дуоденита проводилась по двум классификациям.
По классификации R. Whitehead (1990) выявляли степени выраженности хронического дуоденита: I степень (слабая) характеризуется относительнойсохранностью структуры СО и поверхностного эпителия ДПК, увеличением количества межэпителиальных лимфоцитов, лимфоцитов и плазмоцитов в собственной пластинке; II степень (умеренная) характеризуется повреждением поверхностного эпителия, деформацией и укорочением ворсинок, преобладанием ввоспалительном инфильтрате лимфоцитов; III степень (тяжелая) представляетсобой выраженное укорочение ворсинок, углубление крипт, эрозии, уменьшениеколичества бокаловидных клеток и выраженную лимфоплазмоцитарную инфильтрацию. В зависимости от наличия и степени выраженности расстройствкровообращения и инфильтрации эпителия и собственной пластинки слизистойоболочки полиморфноядерными лейкоцитами различали три степени активноститечения хронического дуоденита [Конорев М.Р.
и др., 2002]. Слабая степень активности определялась при небольшом количестве нейтрофилов без лейкопедеза в области ямок и апикальной части валиков; умеренная – при среднем количестве нейтрофилов с умеренно выраженным лейкопедезом в области ямок и валиков; выраженная – при большом количестве нейтрофилов с резко выраженнымлейкопедезом и скоплением лейкоцитов с образованием «внутриямочных абсцессов».Согласно классификаци, разработанной M.N.
Marsh (1992 г.), морфологические изменения СО ДПК разделяли на четыре стадии: 1-я стадия – инфильтра-46тивная, характеризующаяся лимфоцитарной инфильтрацией эпителия при нормальной архитектонике СО; 2-я стадия – гиперпластическая с лимфоцитарнойинфильтрацией СО и углублением крипт; 3-я стадия – деструктивная, заключающаяся в резком укорочении ворсинок и углублении крипт, наличии эрозии,уменьшением количества бокаловидных клеток и обильной лимфоплазмоцитарной инфильтрацией собственной пластинки и покровного эпителия (3А – порциальная атрофия ворсинок, 3В – субтотальная, 3С – тотальная); 4-я стадия – гипопластическая, характеризующаяся тотальной атрофией ворсинок и гипоплазией крипт.Наличие фиброза, отек стромы и полнокровие сосудов, как признаковнарушения кровообращения оценивали качественно – нет/есть; наличие бруннеровых желез в собственной пластинке СО постбульбарного отдела расцениваликак гиперплазию.При гистологическом исследовании были расчитаны следующие морфометрические показатели (в мкм):– толщина СО (от собственной мышечной пластинки СО до верхнего краяклеток всасывательного эпителия верхушек ворсинок);– длина ворсинки (от ее основания до верхнего края);– максимальная толщина ворсинки (по верхним краям эпителиоцитов боковых поверхностей ворсинки);– глубина крипты (от наружного края устья, до ее дна – по базальной мембране);– ширина крипты (по верхним краям эпителиоцитов).Данные измерения проводили в нескольких местах (от 5 до 15, в среднем6–7 участках), с последующим вычислением средних величин.
В собственнойпластинке СО на нескольких участках по стандартной площадке (морфометрический квадрат с «опорными» точками) определяли количество лимфоцитов, плазматических клеток, эозинофильных лейкоцитов, нейтрофильных лейкоцитов,клеток стромы (фибробластов и фиброцитов), далее вычисляли средние показатели и пересчитывали определяемые величины на стандартную площадь, равную471 мм2. Число межэпителильных лимфоцитов (МЭЛ) среди клеток покровногоэпителия ворсинок и отдельно среди эпителиоцитов крипт расчитывали на различном протяжении их поверхности с последующим пересчетом на 100 клеток.Для оценки полученных данных были использованы морфометрические показатели СО ДПК здоровых добровольцев, в качестве нормативных значений (таблица 2.4).Т а б л и ц а 2 .
4 – П оказатели слизистой оболочки двенадцатиперстной кишкиздоровых обследованных (Калинина Е.Ю., 2005)ЗначенияПоказатель, (M±)Толщина слизистой оболочки, мкмВысота ворсинки, мкмТолщина ворсинки, мкмГлубина крипты, мкм581,6±21,3446,0±17,6126±4,7Ширина крипты, мкмЛимфоциты, % от клеточной плотностиПлазмоциты, % от клеточной плотностиЭозинофилы, % от клеточной плотностиНейтрофилы, % от клеточной плотностиКоличество бокаловидных клеток (на 100 энтероцитов)109,41,048,18±0,863,83±0,155,25±0,251,11±0,151,06±0,1024,36±0,21Межэпителиальные лимфоциты ворсинок, на 100 энтероцитов10,750,252.3.6Определениефенотипическихпризнаковдисплазиисоединительной тканиДиагностика ДСТ основывалась на выявлении основных признаков дисэмбриогенеза со стороны различных органов и систем (костные, кожные, мышечные, суставные, глазные, со стороны сердечно-сосудистой, бронхолегочной систем, органов брюшной полости и малого таза), учет которых проводился поспециально разработанной анкете (приложение 1).
Для присвоения степени тяжести диспластическому процессу использовали диагностические критерии дисплазии Т. Милковска-Дмитровой и А. Каркашова, предложенные в 1985 году, ибальную шкалу значимости отдельных фенотипических признаков ДСТ Л.Н. Аббакумовой и соавт. (Санкт-Петербургская государственная педиатрическая ме-48дицинская академия, 2006 г.). Согласно диагностическим критериям выделяютсяглавные признаки и второстепенные (таблица 2.5). В зависимости от их сочетания различают легкую (наличие 2-х главных признаков), среднюю (наличие 3-хглавных и 2-х второстепенных признаков) и тяжелую (наличие 5-ти и болееглавных признаков и 3-х второстепенных) степень ДСТ.Т а б л и ц а 2.5 – Диагностические критерии дисплазии соединительной ткани Т.Милковской-Дмитровой и А. КаркашоваГлавные признаки.Вростепенные признаки.ПлоскостопиеАномалии ушных раковинРасширение венАномалии зубовГотическое небоПреходящие суставные болиГипермобильность суставовВывихи и подвывихи суставовНарушение органа зренияПтеригодактилияДеформация позвоночника и грудной клеткиУвеличение растяжимости и дряблости кожиДлинные тонкие пальцыСогласно бальной шкале Л.Н.
Аббакумовой, каждому фенотипическомупризнаку дисэмбриогенеза присваивается определенное количество баллов (таблица 2.6). В зависимости от суммы набранных баллов, проявления ДСТ делят натри степени: при первой степени выраженности ДСТ (вариант нормы) суммабаллов не превышает 12, при умеренной – 23, при выраженной степени – 24 иболее баллов.Оценка висцеральных проявлений ДСТ проводилась с использованием инструментальных исследований: ЭФГДС, ультразвукового исследования (УЗИ)органов брюшной полости, почек, а также по ретроспективным данным эхокардиографического исследования сердца.49Т а б л и ц а 2.6 – Балльная шкала оценки значимости отдельных фенотипических признаковдисплазии соединительной ткани Л.Н.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
