Диссертация (1146649), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Участки, вырабатывающие соляную кислоту,становились темными, а лишенные кислоты – оставались красными.Результаты исследования оценивали через пять минут после началавоздействия красителем конго красным. При гиперхлоргидрии в темный цветокрашивался кардиальный отдел желудка, тело желудка, антральный отделжелудка, при нормохлоргидрии – тело желудка и антральный отдел, пригипохлоргидрии – только тело желудка, при ахлоргидрии – слизистаяоболочка желудка во всех отделах сохраняла красный цвет.Ультрасонографическоеисследованиепроводилинааппарате«Sonoline Prima LC» фирмы «Сименс» (Германия), работающем в масштабереального времени, с использованием секторных и линейных датчиков3,5 МГц и 7,5 МГц по стандартной методике [Мухарлямов Н.М., 1987]. Приданном исследовании проводили оценку размеров, структуры, наличияультразвуковыхпризнаковизмененийпечени,желчногопузыря,поджелудочной железы, селезенки.Гистологические и морфометрические исследования проводились накафедре патологической анатомии СЗГМУ имени И.И.
Мечникова. Материалфиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина в течение 12–24 часов,заливали в парафин по общепринятой методике под контролем правильностиориентациибиоптатадляисключениявозможностипоперечныхитангенциальных срезов.
Изготавливали серийные парафиновые срезы (от 20 до30 с каждого биоптата) толщиной 3–5 мкм. Гистологические срезыокрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону,50альциановым синим при рН=1,0; толуидиновым синим. Проводили реакциюШИК, окраску по Романовскому-Гимзе. Для исследований использовалимикроскоп«Микромед-1»(Россия),окулярныймикрометр«Reichert»(Австрия) с комбинированной окулярной стереометрической сеткой, а такжедемонстрационнуюстандартнойнасадкумасштабнойкмикроскопусеткойпо«Ампливал»методике(Россия)Б.С.
Сережинасо(1993).Микрофотографирование гистологических препаратов выполняли цифровойфотокамерой «Nikon» (Япония).При гистологическом исследовании признаки хронического дуоденитаоценивали по двум классификациям. По классификации R. Whitehead (1990)определяли степени выраженности хронического дуоденита: I степень(слабая) – относительная сохранность структуры слизистых оболочек иповерхностного эпителия ДПК, увеличение количества межэпителиальныхлимфоцитов, лимфоцитов и плазмоцитов в собственной пластинке; II степень(умеренная) – повреждение поверхностного эпителия, деформация иукорочениеворсинок,преобладаниеввоспалительноминфильтрателимфоцитов; III степень (тяжелая) – выраженное укорочение ворсинок,углубление крипт, эрозии, уменьшение количества бокаловидных клеток,выраженная лимфоплазмоцитарная инфильтрация.
О степени активноститеченияхроническогодуоденитасудилипоналичиюистепенивыраженности расстройств кровообращения и инфильтрации эпителия исобственнойпластинкислизистойоболочкиполиморфноядернымилейкоцитами [Конорев М.Р. и др., 2003]. Слабую степень активностидиагностировали при небольшом количестве нейтрофилов без лейкопедеза вобласти ямок и апикальной части валиков; умеренную – при умеренномколичестве нейтрофилов с умеренным лейкопедезом в области ямок иваликов; выраженную – при обилии нейтрофилов с резко выраженнымлейкопедезом и скоплением лейкоцитов с образованием «внутриямочныхабсцессов».51Согласно классификации M.N.
Marsh (1992) выделяли 4 стадииморфологических изменений слизистой оболочки ДПК: 1-я стадия –инфильтративная (лимфоцитарная инфильтрация эпителия при нормальнойархитектонике слизистой оболочки); 2-я стадия – гиперпластическая(лимфоцитарная инфильтрация слизистой оболочки и углубление крипт); 3-ястадия – деструктивная (резкое укорочение ворсинок и углубление крипт,эрозии,уменьшениеколичествабокаловидныхклеток,обильнаялимфоплазмоцитарная инфильтрация собственной пластинки и покровногоэпителия (3А – порциальная атрофия ворсинок, 3В – субтотальная, 3С –тотальная); 4-я стадия – гипопластическая (тотальная атрофия ворсинок игипоплазия крипт).Полуколичественно по бальной системе оценивали характер фиброза(очаговый, диффузный) и степень выраженности диффузного фиброза(слабая, умеренная, выраженная); нарушения кровообращения (отек стромыи полнокровие сосудов – нет/есть); наличие бруннеровых желез всобственной пластинке слизистых оболочек (наличие в постбульбарномотделе расценивали как гиперплазию).При гистологическом исследовании и морфометрических подсчетахбыли расчитаны (в мкм):– толщина слизистой оболочки (от собственной мышечной пластинкислизистой оболочки до верхнего края клеток всасывательного эпителияверхушек ворсинок);– длина ворсинки (от ее основания до верхнего края);– максимальная толщина ворсинки (по верхним краям эпителиоцитовбоковых поверхностей ворсинки);– глубина крипты (от наружного края устья, до ее дна – по базальноймембране);– ширина крипты (по верхним краям эпителиоцитов).Указанные измерения проводили в нескольких местах (от 5 до 15, всреднем 6–7 участках), определяли максимальные и минимальные параметры52с последующим вычислением средних величин.
В собственной пластинке внескольких местах по стандартной площадке (морфометрический квадрат с«опорными»плазматическихточками)подсчитываликлеток,эозинофильныхколичестволейкоцитов,лимфоцитов,нейтрофильныхлейкоцитов, клеток стромы (фибробластов и фиброцитов) с последующимвычислением средних показателей и пересчетом определяемых величин настандартную площадь, равную 1 мм2. Количество межэпителильныхлимфоцитов (МЭЛ) среди клеток покровного эпителия ворсинок и отдельносреди эпителиоцитов крипт расчитывали на различном протяжении ихповерхности с пересчетом на 100 клеток. При анализе полученных данныхиспользовали морфометрические показатели слизистой оболочки ДПКздоровых добровольцев, представленные в таблице 8.Т а б л и ц а 8 – П оказатели слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки здоровыхобследованных (Калинина Е.Ю., 2005)ПоказательТолщина слизистой оболочки, мкм (M±)Высота ворсинки, мкм (M±)Толщина ворсинки, мкм (M±)Глубина крипты, мкм (M±)Ширина крипты, мкм (M±)Лимфоциты, % от клеточной плотностиПлазмоциты, % от клеточной плотностиЭозинофилы, % от клеточной плотностиНейтрофилы, % от клеточной плотностиКоличество бокаловидных клеток (на 100 энтероцитов)Значения581,6±21,3446,0±17,6126±4,7109,41,048,18±0,863,83±0,155,25±0,251,11±0,151,06±0,1024,36±0,21Межэпителиальные лимфоциты ворсинок, на 100 энтероцитов (M±)10,75,980,25Исследование функции внешнего дыхания (ФВД) с целью изученияфункционального состояния бронхолегочной системы выполнено больныммуковисцидозом в лаборатории НИИ пульмонологии СПб ГМУ им.
Акаде-мика И.П. Павлова с помощью спирографа Master Screen (фирма Erich Jager,Германия),позволяющегорегистрироватьспирографическуюкривуюспокойного дыхания и отношение кривой «поток-объем» форсированноговыдоха.Передисследованиемпроводилисьнеобходимые53антропометрическиеизмерения.Индивидуальнаяоценкаполученныхобъемных и скоростных показателей выражалась в процентах к должнымвеличинам, рассчитанным с учетом возраста, пола, роста и веса больного.Всем больным муковисцидозом выполнена компьютерная томографияорганов грудной клетки в лаборатории рентгенологии НИИ пульмонологииСПб ГМУ им. академика И.П.
Павлова.2.3.4 Периферическая электрогастроэнтерографияДля изучения моторно-эвакуаторной функции желудочно-кишечноготрактавсемобследуемымпроводиласьпериферическаяэлектрогастроэнтерография (ПЭГЭГ).ПЭГЭГ выполнена с помощью прибора гастроэнтеромонитора ГЭМ-01«Гастроскан-ГЭМ»(НПП«Исток-Система»,г.Фрязино).Методикаисследования разработана и апробирована коллективом исследователей подруководством профессора В.А. Ступина на кафедре госпитальной хирургииРГМУ имени Н.И. Пирогова [Ступин В.А., 2009].Исследование заключается в регистрации электрического потенциалапяти отделов желудочно-кишечного тракта с поверхности кожных покрововобследуемого.Регистрируемыйсуммарныйэлектрическийпотенциалгладкомышечных клеток на частотах желудка, двенадцатиперстной, тощей,подвздошной и толстой кишки отражает моторно-эвакуаторную функциюсоответствующегоэлектрическаяотделаактивностьжелудочно-кишечноготракта,клетокихобеспечиваетпосколькумеханическуюдеятельность [Гальперин Ю.М.
и др., 1975; Собакин М.А., 1978; Ребров В.Г.,1981; Чернякевич С.А., 1998; Смирнова Г.О., Силуянов С.В., 2009; СмирноваГ.О., 2011].Изучение двигательной активности отделов желудочно-кишечноготракта возможно благодаря наличию стабильного диапазона частотэлектрических волн у каждого отдела пищеварительного тракта, таблица 9.54Т а б л и ц а 9 – Частотные характеристики электрических волн отделов желудочнокишечного тракта (Ребров В.Г., 1981)Отдел ЖКТДиапозон частот (Гц)Частота (цикл/мин)Толстая кишка0,01–0,030,6Желудок0,03–0,072–4Подвздошная кишка0,07–0,136–8Тощая кишка0,13–0,189–12Двенадцатиперстная кишка0,18–0,259–12Длярегистрацииэлектрическогосигналабылииспользованыодноразовые электроды ЭКГ Fiab (Италия) F 9089, 43*45 мм.
Измерительныеэлектроды располагали на обезжиренных участках кожи в соответствие стреугольником Эйнтховена. Регистрацию электрического сигнала начиналичерез 5 минут после установки электродов.Всем пациенткам ПЭГЭГ выполнена в первую фазу менструальногоцикла.Исследование выполнено в стандартном режиме и состояло из 2-хэтапов по 40 минут: первый – тощаковый (базальный) после 10–12 часовогоголода, и второй – после стандартной пищевой стимуляции. Стандартнаяпищевая стимуляция включала 200 мл теплого чая, 10 г глюкозы и 100 гбелого хлеба или других углеводов (гречневая каша, рисовая каша,кукурузный хлеб). Второй этап исследования начинали через 5 минут послеокончания приема пищи. Электроды устанавливали следующим образом:№ 1 (измерительный) – в нижней трети правого предплечья по медиальнойповерхности; № 2 (измерительный) – в нижней трети правой голени помедиальной поверхности; № 3 (нейтральный) – в нижней трети левой голенипо медиальной поверхности.Полученный во время исследования электрический сигнал с прибора«Гастроскан-ГЭМ» передавали на ПК с помощью беспроводной связи Bluetooth.
На персональном компьютере электрический сигнал обрабатывалсяавтоматически программой «Гастроскан-ГЭМ» версия 4.09 с использованиемцифровой полосовой фильтрации, производились устранение артефактов истатистический спектральный анализ с использованием алгоритмов быстрого55преобразования Фурье и вейвлет. После обработки сигнал выводился наэкран персонального компьютера в виде графиков, отражающих изменениезначений показателей биоэлектрического сигнала во время исследования, итаблиц, отражающих средние значения показателей за время исследования.Дляоценкимоторикижелудочно-кишечноготрактаизучалиследующие биоэлектрические показатели:– суммарная электрическая мощность желудочно-кишечного тракта –PS (мВт);– абсолютная электрическая мощность каждого отдела желудочнокишечного тракта – Pi (мВт);–относительнаяэлектрическаямощность,представляющаяпроцентный вклад определенного отдела желудочно-кишечного тракта вобщий частотный спектр и отражающая его тонус – Pi/Ps (%);–коэффициентритмичности,являющийсяотношениемдлиныогибающей спектра к длине участка спектра обследуемого отдела иотражающийритмичностьипропульсивностьсокращенийотделовжелудочно-кишечного тракта – Kritm (ед.);–коэффициентотношениесоотношенияэлектрической(сравнения),активностиопределяемыйвышележащегокакотделакнижележащему отделу и отражающий координированность сокращений – Pi/Pi+1.Вкачествереферентныхзначенийисследуемыхпоказателейиспользовали значения, полученные при исследовании 112 здоровыхдобровольцев на базе ГКБ № 15 г.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
