Диссертация (1141409), страница 17
Текст из файла (страница 17)
35. Содержание арбутина в листьях и плодах яблони лесной4.8. Количественная оценка дубильных веществ в исследуемом сырьеУчитывая имеющиеся литературные данные, о возможности использованиядля качественного определения дубильных веществ [5] 1% раствора коллагена,нами была проведено подтверждение наличия дубильных веществ в исследуемомсырье с использованием данного реактива, на основании полученных результатов126было показано, что дубильные вещества были идентифицированы во всехизучаемых образцах.ПрипроведенииТСХнамииспользоваласьсистемарастворителеймуравьиная кислота безводная-этилацетат –толуол (10:30:60), использованиекоторой давало наилучшие результаты при исследовании дубильных веществ вработах предыдущих авторов [5].
Детектирование зон адсорбции осуществляли вУФ- свете при длине волны 250 и 365 нм с последующей обработкой растворомквасцов железоаммонийных и ванилина раствором в хлористоводородной кислоте2%.Количественное определение суммы дубильных веществ в листьях, плодахяблони лесной осуществляли методом перманганатометрического титрования.Результаты представлены в таблице 33.Таблица 33.
Количественное определение суммы дубильных веществ в листьях,плодах яблони лесной осуществляли методом перманганатометрическоготитрования127Содержание дубильных веществ в листьях и плодахяблони лесной1086420Листья (р-нЧеховский)Плоды (р-нЧеховский)СвежиеЛистья (р-нИстринский)ЗамороженныеПлоды (р-нИстринский)ВысушенныеРис.36.
Содержание дубильных веществ в листьях и плодах яблони леснойСледует отметить, что в пищевой промышленности для оценки качествапищевого растительного сырья, чаще проводят оценку не содержания дубильныхвеществ, а определяют полифенольный комплекс.Количественное содержание веществ полифенольной природы осуществлялиметодом Фолина-Чикалтеу (Folin-Ciocalteu), широко применяемым для изученияпищевых растенийи продуктов ихпереработки. Метод подразумеваетиспользование реактива Фолина-Чикалтеу, представляющегофосфорно-вольфрамовойифорсфорно-молибденовойкислот.собой смесьВпроцессевзаимодействия вещества полифенольной природы окисляются под действиемреактива и формируется интенсивное голубое окрашивание, обусловленноеобразованием смеси востановленных вольфраматов и молибдатов.
Оптическаяплотность раствора пропорциональна содержанию полифенолных веществ.Определение содержания суммы фенольных соединений осуществляли пометодике, включающей экстракцию веществ полифенольной природы изизмельченного исследуемого сырья листьев, плодов яблони лесной спиртомэтиловым 70% при постоянном перемешивании и нагревании на водяной бане втечениее 120 минут с последующим охлаждением и фильтрацией экстракционнойсмеси, отбором 2 мл полученного извлечения , последующим разбавлением128аликвоты водой деионизированной, взаимодействием с реактивом ФоллинаЧикалтеу в присутствии 15 мл 20% раствора натрия карбоната и измерениемоптической плотности полученного окрашенного испытуемого раствора придлине волны 765 нм.Параллельнопроводилиизмерениеоптическойплотностираствора,состоящего из одного мл раствора СО галловой кислоты, 5 мл реактива ФоллинаЧикалтэу, 15 мл 20% раствора натрия карбоната и деионизированной воды до 100мл.Количественное содержание веществ полифенольной природы в % впересчете на галловую кислоту рассчитывали по формуле:Х=D ×m0 ×100×1×100×100×100D0 ×m×a×100×100×(100−w), гдеD – оптическая плотность исследуемого раствораD0 – оптическая плотность раствора СО галловой кислотыm – масса сырья, гm0 – масса СО галловой кислоты, га – аликвота испытуемого раствора, млw – потеря в массе при высушивании сырья, %Таблица 34.
Количественное определение суммы дубильных вещест в листьях,плодах яблони лесной осуществляли методом Фолина-ЧикалтеуОпределяемыйОбъект исследованияпоказательЛистья яблони лесной,Листья яблониЛистья яблоникачествазаготовленные влесной,домашней (сортИстринском районезаготовленные вАнтоновка)Московской областиЧеховском районеМосковскойобластиСодержание суммыполифенольных11,2812,139.96129соединений,%4.9. Общая оценка влияния способа консервации на состав БАВ листьев иплодов яблони лесной свежих, высушенных и замороженныхПодводя итог проведенных исследований по оценке количественногосодержания в исследуемом сырье – листьях, плодах яблони лесной разныхспособов консервации и свежих основных групп БАВ, представленныхорганическими и фенолкарбоновыми кислотами, полисахаридами, флавоноидами,арбутином (результаты количественного определения представлены в таблице),следует отметить, что максимальное содержание всех групп веществ ожидаемохарактерно для свежего сырья.Так замораживание листьев яблони лесной привело к незначительномуснижению суммарного содержания полисахаридов, составившему1,3-2,6 %,снижение содержания органических кислот составило 10,6-12,8%, потерясодержания дубильных веществ составила 2,8- 3,5%, флавоноидов 8,0-13,3%,арбутина 8,4- 9,0%.Анализ замороженных плодов яблони лесной показал незначительноеснижению суммарного содержания пектинов, составившему 2,4-3,2 %, снижениесодержания органических кислот составило 17,8-18,9%, потеря содержаниядубильных веществ составила 6,8-11,4%, флавоноидов 24,4-26,1%, арбутина 7,814,7%.Тепловая сушка исследуемого сырья приводила к значительно болеесерьезным потерям БАВ.
При определении действующих веществ в высушенныхлистьяхяблонилеснойвыявленополисахаридов, составившемуснижениюсуммарногосодержания8,6-8,8%, снижение содержания органическихкислот составило 35,1%, потеря содержания дубильных веществ составила 23,224,2%, флавоноидов 54,2-57,6%, арбутина 37,5-38,8%130Анализ высушенных плодов яблони лесной показал незначительноеснижению суммарного содержания пектинов, составившему 7,1 %, снижениесодержания органических кислот составило 34,8-35.9%, потеря содержаниядубильных веществ составила 20,2-20,6%, флавоноидов 77,0-78,2%, арбутина26,7-30,3%.
При этом, несмотря на значительные потери БАВ в исследуемомсырье в процессе сушки, содержание их остается на достаточно высоком уровне, асохранность сырья, по данным многочисленных публикаций, оказывается болеестабильной, что позволяет рекомендовать к использованию предприятиямифармацевтической промышленности все предлагаемые виды сырья с учетомимеющихся мощностей для переработки свежего, высушенного и замороженногосырья.Таблица 35.
Содержание БАВ в исследуемых листьях яблони лесной и домашнейИсследуемое ЛРССодержание %ПолисахариСуммадыорганичес-АрбутинДубильныеФлавоноидывеществаких кислотЛистьясвежие5,341,513,899,572,51Яблонизаморо5,201,353,549,232,31Леснойжен-4,870,982,387,251,15(Инстрин- ныескийвысушрайон)енныеЛистьясвежие5,221,484,029,642,48Яблонизаморо5,151,293,689,372,15Леснойжен-(Чехов-ныескийвысуш4,770,962,517,401,05район)енныеЛистьясвежие5,751,463,658,752,01Яблонизаморо5,301,203,388,241,97Домаш-жен-131нейные(Антонов- высуш4,980,902,186,601,03ка)енныеЛистьясвежие5,251,453,208,342,24Яблонизаморо5,101,302,918,102,05Домаш-жен-нейные(Пепин)высуш4,250,931,896,321,15енныеЛистьясвежие5,531,473,348,442,00Яблонизаморо5,251,363,018,201,96Домаш-жен-нейные(Ренет)высуш4,280,942,156,121,10енныеТаблица 36.
Содержание БАВ в исследуемых плодах яблони лесной и домашнейИсследуемое ЛРССодержание %ПолисахаСуммаридыорганическихАрбутинДубильныеФлавоноидывеществакислотПлодысвежие12,686,711,165,010,94Яблонизамороже12,385,451,074,670,71Леснойнные(Инстринвысушенн11,784,300,853,980,21скийыерайон)Плодысвежие12,556,341,094,740,92Яблонизамороже12,155,210,934,200,68132Леснойнные(Чеховски высушенн11,654,150,763.780,20й район)ыеПлодысвежие9,754,760,844,360,90Яблонизамороже9,453,550,613,240,65Домашненныейвысушенн8,952,900,432,680,19(Антоновыека)Плодысвежие9,254,250,814,660,91Яблонизамороже8,853,790,633,190,69Домашненныейвысушенн8,252,850,392,670,20(Пепин)ыеПлодысвежие11,104,300,873,240,90Яблонизамороже10,803,660,692,850,66Домашненныейвысушенн10,202,790,472,110,20(Ренет)ые133ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 41.
Проведён сравнительный анализ состава основных групп БАВ свежих,замороженных и высушенных листьев и плодов яблони лесной с использованиемкачественных реакций, ТСХ и ВЭЖХ. Установлено наличие яблочной, лимонной,щавелевой, фумаровой и янтарной кислот, кислоты аскорбиновой. Анализфенольных соединений листьев яблони лесной выявил наличие 13 соединений,среди которых сравнением с стандартными образцами идентифицированыизорамнетин-3-галактозид,кверцитин-3-глюкозид,кверцитин-3-рутинозид,флоредзин, флоретин, кверцитин, арбутин, в плодах идентифицированы кофейнаякислота,галловаякислота,цикориеваякислота,катехин,эпикатехин,хлорогеновая кислота, виценин, неохлорогеновая кислота, рутин, кумарин,эллаговая кислота, кверцетин, флоретин, флоридзин, коричная кислота, апигенин.3.
Установлено, что способ консервации не влияет на компонентный составбиологически активных веществ в изучаемых объектах.4. Сучетоманализаэкспериментальныхнаучнойисследованийлитературыподобраныипутемметодикисобственныхколичественногоопределения суммарного содержания полисахаридов, органических кислот,гидроксикоричных кислот, флавоноидов, дубильных веществ, арбутина висследуемом сырье. Методом аминокислотного анализа идентифицированысвободные и связанные аминокислоты.5. Анализ полученных нами экспериментальных данных количественногосодержаниядубильныхполисахаридов,веществ,органическихарбутина,кислотфлавоноидоввигидроксикоричных,свежих,высушенныхизамороженных листьях и плодах яблони лесной, следует отметить, чтомаксимальное содержание всех групп веществ ожидаемо характерно для свежегосырья. Так замораживание листьев яблони лесной привело к незначительномуснижению суммарного содержания полисахаридов, составившему1,3-2,6 %,134снижение содержания органических кислот составило 10,6-12,8%, потерясодержания дубильных веществ составила 2,8- 3,5%, флавоноидов 8,0-13,3%,арбутина 8,4- 9,0%.