Диссертация (1141409), страница 19
Текст из файла (страница 19)
Фильтрат исследуемых образцовоставался практически бесцветным, что подтверждает наличие у порошкалистьев, плодов яблони лесной адсорбционной способности, количественнуюоценку которой проводили по методике, рекомендованной для стандартизацииэнтеросорбента "Полифепан", включающей проведение адсорбции из растворакрасителя метиленового синего с известной концентрацией на исследуемыхобразцах[67,124] (точная навеска) при перемешивании на ротационной качалке втечение 1 часа с последующей фильтрацией образцов через стеклянный фильтр,разведением5 мл фильтратаи исходного раствора метиленового синегодистиллированной водой и измерение оптической плотности анализируемыхобразцов на спектрофотометре при длине волны 668 нм в кювете с толщиной слоя10 мм.
Адсорбционную способность порошка в граммах рассчитывали поформуле:Х=где( − ) ∙ ∙ ∙ ∙ ( − , )0 - величина оптической плотности исходного раствора метиленовогосинего1 - величина оптической плотности раствора после сорбции на анализируемомобразцеm - масса навески препарата в граммах147w - влажность препаратаС - концентрация раствора метиленового синего, взятого на сорбцию, г/мл100 - объем раствора метиленового синего, взятого на сорбцию в млПараллельно нами было проведено определение показателя адсорбционнойактивности средств, разрешенных к применению в РФ в качестве энтеросорбентов"Полифепан" (АО "Сайнтек"), "Фильтрум – сти” (АВВА РУС), а также пектинаяблочногопищевогосравнительногоимикрокристаллическойопределенияпоказателейцеллюлозы.Результатыадсорбционнойспособностиисследуемого сырья- порошков листьев, плодов яблони лесной и традиционныхэнтеросорбентов представлены в таблице 44.Таблица 44.
Показатели адсорбционной способности порошка листьев, плодовяблони лесной и некоторых отечественных энтеросорбентов.Как видно из таблицы 44, измельченное до порошкообразного состояниясырье яблони лесной проявляет себя как достаточно эффективный сорбент споказателями адсорбционной способности 0,052 г на 1 г сорбента для порошкалистьев и 0,056 г на 1 г сорбента для порошка плодов, что выше аналогичногопоказателя целлюлозы микрокристаллическо, что обуславливает перспективностьдальнейших исследований порошка листьев, плодов яблони лесной, с цельюполучения на их основе эффективного энтеросорбента. В предыдущих148исследованиях нами было показано, что использование добавок яблочногопектина и извлечений из плодов яблони лесной в состав пищевых коктейлей«Magic of life», рекомендуемых в очистительных диетах, в экспериментеприводило к существенному увеличению их адсорбционной способности. [65]5.6.Определение антимикробной активности извлечений из плодов илистьев яблони лесной.Изучение антимикробной активности водных извлечений из листьев, плодовяблони лесной (настой, настойка, сухой экстракт) проводили методом диффузии вагар на плотной питательной среде.
Питательную среду готовили из сухой средыпромышленного производства в соответствии с инструкцией изготовителя. Оценкуантимикробной активности исследуемых извлечений осуществляли сравнениемзон угнетения тест-микроорганизмов.Полученныерезультатыопределенияантимикробнойактивностипредставлены в таблице 45.Таблица45.Результатыопределенияизвлечений из листьев, плодов яблони лесной.антимикробнойактивности149Антимикробная активность извлечений (настой, настойка,сухой экстракт) из листьев и плодов яблони лесной302520151050Настой листьевНастой плодовНастойка листьевНастойка плодовСухой экстрактлистьевStaphylococcus aureus (209)Staphylococcus aureus (Tupe)Staphylococcus epidermidis Wood - 46Escherichia coli 675Salmonella typhimuriumShigella sonnei 3dBacillus subtilis L2Bacillus anthracoides – 1.Pseudomonas aeruginosaProteus vulgarisСухой экстрактплодовРис.
38. Антимикробная активность извлечений (настой, настойка,сухой эксперт) из листьев и плодов яблони леснойВ ходе проведенных исследований установлено, что все изучаемыеизвлечения из листьев и плодов яблони лесной проявляют выраженноеантимикробноедействиевотношенииStaphylococcusaureus(209),Staphylococcus aureus (Tupe), Staphylococcus epidermidis Wood – 46, а такжеумеренное антимикобное действие в отношении Escherichia coli 675,Salmonella typhimurium, Shigella sonnei 3d, Bacillus subtilis L2, Bacillusanthracoides – 1, Pseudomonas aeruginosa, в отношении Proteus vulgarisантимикробной активности не выявлено. При этом, все исследуемыеизвлечения из листьев яблони лесной показывают достоверно более высокиерезультаты антимикробной активности, по сравнению с аналогичнымиизвлечениями из плодов.150Таким образом, из результатов испытаний на антимикробную активность,следует, что максимальной антимикробной активностью обладают настойкилистьев и плодов яблони лесной, экстрастом и настоем из данного сырьятакже, пусть и в меньшей степени, присущи антибактериальные свойства.151ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 5.1.
Проведеноопределениечисловыхпоказателейдляновоголекарственного растительного сырья - плоды, листья яблони лесной,определены нормы, рекомендованные к включению в разарабатываемуюНД «Яблони лесной плоды», «Яблони лесной листья».2. Дляплодовяблонилеснойразработанатехнологиявыделенияпектиновых веществ и проведена оценка их показателей качества всоотсветсвиестребованиямиГОСТа«Пектин».Дляпектина,полученного из плодов яблони лесной, определено: массовая доля влаги% - не более 8,3, степень этерификации, % - не менее 70,8,студнеобразующая способность, градусы Тарр-Бейкера, не менее 213,массовая доля нитратов % - не более 0,07, массовая доля частицволокнистой фракции размером более 0,5 мм,% - не более 15,5.3.
Проведено определение адсорбционной способности порошка листьев,плодов яблони лесной и полученного на их основе пектина в сравнениис широко используемыми в медицине природными адсорбентами.4. Изучена антимикробная активность извлечений (настой, настойка ижидкий экстракт) из листьев, плодов яблони лесной.
Установлено, чтовсе изучаемые извлечения из листьев и плодов яблони леснойпроявляютвыраженноеантимикробноедействиевотношенииStaphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidisWood – 46, а также умеренное антимикобное действие в отношенииEscherichia coli 675, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei 3d, Bacillussubtilis L2, Bacillus anthracoides – 1, Pseudomonas aeruginosa, вотношении Proteus vulgaris антимикробной активности не выявлено. Приэтом, все исследуемые извлечения из листьев яблони лесной показываютдостоверно более высокие результаты антимикробной активности, посравнению с аналогичными извлечениями из плодов.152ГЛАВА 6.
ОБОСНОВАНИЕ ВЫБОРА ЭКСТРАКЦИОННЫХПРЕПАРАТОВ ИЗ ЛИСТЬЕВ И ПЛОДОВ ЯБЛОНИ ЛЕСНОЙ6.1. Оптимизация параметров получения водных извлечений из листьев иплодов яблони лесной разных способов консервации.Получение водных извлечений из высушенных листьев и плодов яблонилеснойрегламентируетсяОФС.1.4.1.0018.15общей«Настоиифармакопейнойотвары».статьейНормативнаяГФXIIIизд.,документация,регламентирующая технологию получения водных экстрактов из свежего изамороженного растительного сырья – листья и плоды яблони лесной, внастоящее время отсутствует.
Учитывая вышеизложенное, нами было проведеноисследование по выбору оптимальных условий получения водных извлечений изсвежесобранных и подвергнутых заморозке листьев и плодов. С цельюопределениявлияния фактора измельченности ЛРС на степень извлечениякомплекса действующих веществ из свежих и замороженных листьев и плодовяблони лесной получали настои из исследуемых видов сырья в соответствии срекомендциями инструкции по применению в соотношении сырье : экстрагент 1 :20.
Листья использовались в цельном и измельченном виде, получаемом путемнарезки до размера частиц, проходящих сквозь сите с диаметром отверстий 7 ммплоды – в грубой нарезке и измельченном до кашицеобразного состояния виде.Степень извлечения суммы действующих веществ определяли по показателюсухого остатка. Результаты исследования представлены в таблице 46.Таблица 46. Содержание сухого остатка водных извлечений из свежих,замороженных и высушенных листьев, плодов яблони лесной в зависимости отизмельченности исследуемого сырья.Используемое дляполучения настоясырьеСухой остаток, %Листья яблони леснойПлоды яблони леснойНастои из свежего сырьяЦельное сырье1,09 ± 0,031,17 ± 0,051531,83 ± 0,06Измельченноесырье1,92 ± 0,05Настои из замороженного сырьяЦельное сырьеИзмельченноесырье1,04 ± 0,061,08 ± 0,041,67 ± 0,051,74 ± 0,03Настои из высушенного сырьяЦельное сырье0,98±0,031,01±0,05Измельченноесырье1,38±0,041,45±0,03Как видно из данных таблицы, настои, полученные с использованиемизмельченных листьев и плодов яблони лесной, демонстрируют более высокимизначениями сухого остатка, чем водные извлечения, полученные из цельного илигрубо нарезанного сырья.Учитывая опыт применения отваров и настоев из высушенных плодовдругих представителей семейства Rosacea, а также данные, полученные впредыдущихисследованияхсвежих и замороженных плодов боярышника,рябины, шиповника и малины [111] в соотношении сырье : экстрагент 1 : 20 (всоответствии с инструкцией по применению) или 1:10 (согласно фармакопейнойметодике)[111],мысочлицелесообразнымпривыбореоптимальнойконцентрации водных извлечений из свежих и замороженных листьев и плодовяблони лесной использовать настои из измельченного ЛРС в соотношении сырье: экстрагент 1: 10 и 1:20.
Расчет необходимого объема экстрагента вели с учетомвлажности исходных листьев и плодов по следующей формуле:где Х – объем экстрагента, млVизв – объем извлечения, мл154m – навеска сырья, гW – влажность сырья, %.Методика получения водных извлечений из свежих и замороженных плодовяблони лесной. Около 30 г свежих или замороженнных (после предварительнойразморозки)плодовяблонилеснойрастираютваптечнойступкедокашицеобразного состояния. Далее измельченные плоды заливают заранеерассчитанным (сучетомвлажностисырья) объемомводыочищенной.Настаивают в инфундирном стакане на кипящей водяной бане при частомперемешивании в течение получаса, затем при комнатной температуре 10 минут.Фильтруют и доводят водой до требуемого объема.Результаты исследования представлены в таблице 47.Таблица 47.
Содержание сухого остатка водных извлечений из свежих,замороженных и высушенных листьев и плодов яблони лесной в зависимости отсоотношения сырье: экстрагентПолученные результаты свидетельствуют о существенном возрастании степени155извлечения БАВ из свежих и замороженных листьев и плодов яблони лесной вводных извлечениях, полученных в соотношении сырье: экстрагент 1: 10. С цельюопределения оптимального режима экстрагирования были получены настои иотвары из измельченных свежих и замороженных листьев и плодов яблони леснойв соотношении сырье: экстрагент 1: 10. Степень извлечения БАВ определяли посухому остатку. В результате проведенных исследований выявлено, что сухойостаток в отварах из свежих и замороженных листьев и плодов яблони лесной в1,30-1,44 раза превышал данный показатель в настоях из исследуемых видовсырья.
Таким образом, в ходе проведенного эксперимента нами были подобраныоптимальные условия получения водных извлечений из свежих и замороженныхлистьев и плодов яблони лесной.6.2. Сравнительный анализ некоторых показателей качества водныхизвлеченийизлистьевиплодовяблонилеснойразныхспособовконсервации.Для проведения экспериментальной оценки содержания БАВ,былиполучены отвары из свежих, замороженных и высушенных листьев, плодовяблони лесной.Изготовление водных извлечений из высушенных листьев и плодов яблонилесной осуществляли согласно требованиям фармакопейной методики всоотношении сырье - экстрагент 1 : 10 из измельченного сырья.Для всех полученных водных извлечений определяли органолептическиехарактеристики (цвет, прозрачность, запах, вкус, рН).
Результаты определенияпредставлены в таблице 48.Таблица 48. Органолептические характеристики и значения рН водныхизвлечений из листьев, плодов яблони леснойПоказателиВид сырьяЛистья яблони леснойПлоды яблони лесной156СвежиеВысуш.Заморож.СвежиеВысуш.Заморож.Насыщен-Красновато-Насыщен-Желтовато-Желтовато-Желтоватоный, корич-коричневыйныйкорич-бежевый-бежевыйкоричневыйневатыйПрозрачныйПрозрачныПрозрачныПрозрачнййыйЦветневыйПрозрачностьПрозрачныйПрозрачныйсо слабойопалесценциейЗапахСпецифичесСпецифическСпецифическСвоеобразнСвоеобразнСвоеобразкийийийыйыйныйфруктовыйфруктовыйфруктовыйВкусТерпкий,вяжущийТерпкий,вяжущийТерпкий,Кислый,вяжущийвяжущий3,783.34Кислый.вяжущийКислый,вяжущийрН3,753.973,673,41Полученные извлечения представляли собой окрашенные прозрачные илислабо опалесцирующие жидкости со специфическим запахом, кислым илитерпким вяжущим вкусом и кислой реакцией среды.Как известно, сухой остаток включает сумму веществ, извлекаемых из сырьярастворителем в случае водных извлечений – водой), и может характеризоватьсуммарное содержание гидрофильной фракции БАВ.Определение сухого остатка настоев и отваров из листьев и плодов яблонилесной проводили по методике, изложенной в статье ГФ XIV издания«Настойки».
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
