Диссертация (1141409), страница 21
Текст из файла (страница 21)
– Хроматограмма НМГ из плодов (2) яблони (280 нм)ch123456789101112131415Таблица 42. Компонентный состав НМГ из плодов яблони 280 нм№Время, минПлощадь,mV*секПлощадь, %Название123454.1544.4444.9575.3336.89810.1751.0439.501642.77425.340.221.130.8736.299.40НеидентифицировКофейная к-таНеидентифицировГалловая к-таКатехин6789101112137.4157.7168.6579.78613.7817.1121.6536.071077.71315.05226.74151.0773.7655.46186.08271.7823.816.965.013.341.631.234.116.00ЭпикатехинНеидентифицировХлорогеновая ктНеохлорогеноваяНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировмин165Количественноеколичественногокислот,определениясодержанияаскорбиновойкислоты,восновныхполученныхгруппфлавоноидов,излистьевОценкуБАВ(органическихдубильныхвеществиполисахаридов) в матричных настойках осуществляли по приведенным ранееметодикам для анализа исходного сырья. Результаты исследования представленыв таблице 5.5.2.Как видно из данных таблицы, матричная настойка из высушенных плодов илистьев яблони лесной по содержанию всех изучаемых групп БАВ значительноуступала настойке из свежего сырья.
При этом нельзя с уверенностью утверждать,что данные различия связаны именно с качеством и свойствами высушенногорастительного сырья. Вполне возможно, что сниженное содержание действующихвеществ в гомеопатической настойке из высушенных плодов и листьев яблонилесной объясняется различиями в технологии получения матричных настоек изсвежего и замороженного сырья (соотношение сырье-экстрагент для настоек изсвежего сырья составляет 1:2, а из высушенного – 1:10).Матричные настойки из замороженных плодов и листьев яблони лесной посодержанию органических кислот, аскорбиновой кислоты, дубильных веществ,флавоноидов и полисахаридов практически не отличались от настоек из свежего ивысушенного сырья, что позволяет рассматривать возможность использованиязамороженных плодов и листьев яблони лесной в качестве возможной заменысвежему сырью при изготовлении настойки матричной гомеопатической.166Таблица 56.
Количественное содержание БАВ в настойках матричныхгомеопатических из листьев, плодов яблони лесной.Диаграмма количественного содержания органическихкислот в НМГ листьев, плодов яблони лесной0,80,70,60,50,40,30,20,10Листья яблонилеснойПлоды яблонилеснойСвежиеЗамороженныеВысушенные167Рис.43. Диаграмма количественного содержания органических кислот в НМГлистьев, плодов яблони лесной.Диаграмма количественного содержанияаскорбиновой кислоты в НМГ листьев, плодовяблони лесной2520151050Листья яблонилеснойПлоды яблонилеснойСвежиеЗамороженныеВысушенныеРис.44.
Диаграмма количественного содержания аскорбиновой кислоты в НМГлистьев, плодов яблони лесной.Диаграмма количественного содержанияфлавоноидов в НМГ листьев, плодов яблони лесной20151050Листья яблонилеснойПлоды яблонилеснойСвежиеЗамороженныеВысушенныеРис.45. Диаграмма количественного содержания флавоноидов в НМГ листьев,плодов яблони лесной.168Диаграмма количественного содержания дубильныхвеществ в НМГ листьев, плодов яблони лесной1,41,210,80,60,40,20Листья яблонилеснойПлоды яблонилеснойСвежиеЗамороженныеВысушенныеРис.46.
Диаграмма количественного содержания дубильных веществ в НМГ листьев,плодов яблони лесной.Диаграмма количественного содержанияполисахаридов в НМГ листьев, плодов яблонилесной0,50,40,30,20,10Листья яблонилеснойПлоды яблонилеснойСвежиеЗамороженныеВысушенныеРис.47. Диаграмма количественного содержания полисахаридов в НМГ листьев,плодов яблони лесной.1696.5. Получение и стандартизация сухого экстракта листьев и плодов яблонилесной.Учитываяданныенаучнойлитературы,характеризующиевыбороптимальных условий получения экстракционных препаратов из лекарственногорастительногосырья,атакжеданныесобственныхэкспериментальныхисследованийпо изучению основных групп биологически-активных веществлистьев, плодов яблони лесной, нами была предложена технология получениясухого экстракта из данного сырья.6.5.1.
Изучение возможности получения сухих экстрактов из листьев иплодов яблони лесной.Воздушно сухое сырье – листья и плоды яблони лесной измельчали иосуществляли экстрагирование в соотношении сырье: экстрагент (спиртэтиловый) 1:5 при постоянном перемешивании и нагревании с контролемоптимальной температуры на уровне 40ºС в течение 120 минут. Полученноетаким образом извлечение из исследуемых листьев, плодов яблони леснойотстаивали в прохладном месте в течение 2-3 суток, после чего проводилифильтрацию.Технологическийупаривание жидкогопроцессизготовленияизвлечениясухогоэкстрактавключална роторно-вакуумном испарителе приподдержани и температуры 40°С, т.е.
в условиях традиционно применяемых припроизводстве сухих экстрактов [96]. Полученное таким образом сгущенноеизвлечение подвергали вакуумной сушке при температуре 36°С в течние суток.Полученные сухие экстракты из листьев и плодов яблони лесной представлялисобой порошки желто-коричневого (плоды) и темно-коричневого цвета (листья) сприятным запахом и кисловатым вяжущим вкусом, хорошо растворимые в воде испирте этиловом.Количественноеопределениесуммарногосодержанияфлавоноидовосуществляли спектрофотометрическим методом путем сравнения с раствором170РСО Рутина.
При осуществлении спектрофотометрического анализа сухихэкстрактов листьев, плодов яблони лесной была проведена проверка значенияаналитической длины волны, которуюследует использовать для измеренияоптической плотности исследуемых образцов. С этой целью были сняты спектрыпоглощения комплекса раствора исследуемых экстрактов листьев, плодов яблонилесной с хлоридом алюминия и комплекса рабочего стандартного образца 3рутинозид кверцитина с раствором AlCl3 в интервале длин волн от 190 до 700 нм.Максимум поглощения комплекса 3-рутинозид кверцитина с алюминия хлоридомнаблюдается при длине волны 416 Нм.
Аналогичные максимумы наблюдалисьнамидлякомплексов,полученныхприпроведенииреакциикомплексообразования с хлоридом алюминия экстрактов листьев, плодов яблонилесной.Таблица 57. Показатели качества сухих экстрактов листьев, плодов яблонилеснойПоказатели качестваСухой экстракт листьевСухой экстракт плодовсухого экстрактаяблони леснойяблони леснойАморфныйАморфный гигроскопичныйгигроскопичный порошокпорошок желто-темно-коричневого цвета,коричневого цвета,слабого своеобразногоприятного запаха, сзапаха, с горьковатымкисловатым вяжущимсильно вяжущим вкусомвкусомОписаниеСодержание влаги, %2,373,02Содержание тяжелыхМенее 0,01Менее 0,0113,7415,40металлов, %Суммарное содержаниефлавоноидов, мг/100г171Так же, с учетом требований статьи ГФ «Экстракты» нами проводилосьопределение подлинности, полученных сухих экстрактов и количественноеопределение суммарного содержания флавоноидов в пересчете на рутин.6.5.2.
Разработка метода стандартизации сухих экстрактов из листьев, плодовяблони леснойС использованием, предложенных для анализа исходного сырья-листьев иплодов яблони лесной, методик идентификации подтверждено содержание,присущих исходному сырью групп БАВ, а также проведено количественноеопределение, результаты которого представлены в таблице 58.Таблица 58. Определение основных групп БАВ в сухих экстрактах листьев, плодовяблони леснойДля включения в разрабатываемую документацию раздела «Количественноеопределение» нами предложена удобная и не требующая дорогостоящегооборудования методика количественного определения суммы флавоноидов впересчете на рутин, основные стадии которой представлены в таблице 59.172Таблица 59.
Характеристика основных стадий методики количественногоанализа суммы флавоноидов в экстрактах листьев, плодов яблони леснойХарактеристикастадииметодики Проводимые действияколичественного определения суммыфлавоноидов впересчете на рутин всухомэкстрактелистьев,плодовяблони леснойВзятиеточнойанализируемогонавески Для проведения анализа отмеряетсяэкстракталистьев, точная навеска (1 г) исследуемогоплодов яблони леснойэкстракта листьев или плодов яблонилесной, которую вносят в мернуюколбу объемом 50 млИзвлечение суммы флавоноидов из Кисследуемых сухих экстрактовпомещенномувколбу сухомуэкстракту добавляют 30 мл спиртаэтилового 70%, перемешивают дополногорастворенияэкстрактаиисследуемогодоливаюттотжеэкстрагент до метки (раствор А).Отбор аликвоты для анализа1 мл раствора А вносят в мернуюколбу вместимостью 25 млПроведениереакции К отобранной аликвоте добавляют 1комплексообразованияалюминияхлоридасраствором мл 2% раствора алюминия хлорида вдляочистки 70% спирте этиловом, доводят объемисследуемого образца от возможного довлияния примесных соединенийметкиПо истечении 20-30 минут ссуммарного содержания флавоноидов моментапересчетеэкстрактахнарутинлистьев,плодоввэтиловым,тщательно перемешивают.Спектрофотометрическое определениевспиртомначалареакциисухих комплексообразованияпроводятяблони оценкупоказателяоптической173леснойплотности исследуемого извлеченияна спектрофотометре при длине волны416 нмВ ходе анализа нами использовался раствор сравнения, который готовилиразбавляя в мерной колбе 25 мл этанола 70% аликвоты раствора А , взятой вобъеме 1 мл.Параллельно с анализом исследуемых экстрактов проводили измерениеоптическойплотностираствора СО 3-рутинозидкверцитина, полученнымрастворением 0,05 г стандарта в 50 мл этанола 70%, с последующим доведениемобъема до 100 мл с алюминия хлоридом, полученным аналогично исследуемомуизвлечению из листьев и плодов яблони лесной.В процессе хранения и переработки листьев, плодов яблони есть вероятностьмикробного заражения сырья.
С целью исключения возможного инфецированияпациентов, принимающих экстракт, нами было проведено испытание намикробиологическую чистоту, исследуемых экстрактов. Данные проведенногоисследования показали присутствие в экстрактах листьев, плодов яблони леснойаэробных бактерий, не привышающее нормы общей статьи «Испытания намикробиологическую чистоту».Таблица 59. Результаты испытаний сухих экстрактов листьев, плодов яблонилесной на микробиологическую чистоту.ПоказателиОбщее количествоНормаСухой эстрактСухой эстрактлистьев яблониплодов яблонилеснойлеснойНе более 1× 107<10<10ОтсутствиеОтсутствиеОтсутствиеаэробных бактерий в 1 г.Escherichia coli в 1 г174Salmonella spp в 1 гОтсутствиеОтсутствиеОтсутствиеЭнтеробактерии в 1 гНе более 1× 102ОтсутствиеОтсутствиеОбщее число грибов в 1Не более 1× 104ОтсутствиеОтсутствиег.6.6.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
