Диссертация (1141409), страница 20
Текст из файла (страница 20)
5 мл исследуемого извлечения помещали в предварительновысушенный и взвешенный бюкс. Извлечение выпаривали на водяной банедосуха и помещали в сушильный шкаф при температуре 100°С на 120 мин. После157чего бюкс охлаждали в эксикаторе в течение 30 минут и взвешивали.Сухой остаток определяли по формуле:где mб – масса пустого бюкса, в граммах;mб1 – масса бюкса с навеской до прокаливания, в граммах;mб2 – масса бюкса с навеской после прокаливания.Все водные извлечения, полученные из свежего сырья, характеризовалисьбольшим значением сухого остатка, по сравнению с отварами и настоями изплодов, подвергнутых консервации.
В извлечениях из замороженного сырьязначение данного показателя было снижено в среднем на 6,7%, а в извлечениях извысушенного сырья – на 13,5%. В сравнении с исследуемыми образцами изсвежего сырья.6.3. Оценка количественного содержания биологически активных веществ вводных извлечениях из листьев и плодов яблони лесной.В настоящее время существующая нормативная документация на настои иотвары не предусматривает проведение испытаний водных извлечений поколичественному содержанию БАВ. Однако данный показатель очень важен дляподтверждения качества экстракционных препаратов, в том числе настоев иотваров, т.к. именно разнообразные БАВ, перешедшие в извлечение изиспользуемого ЛРС, отвечают за основное фармакологическое действие любойлекарственной формы.Учитываявышеизложенное,мысочлицелесообразнымосуществитьколичественное определение основных групп БАВ, определенных нами ранее висследуемом сырье.
В эксперименте проводилось определение содержанияорганических кислот, флавоноидов, дубильных веществ и полисахаридов в158отварах и настоях листьев и плодов яблони лесной. Водные извлечения изисследуемого сырья характеризовали также по общей сумме БАВ, которуюиллюстрирует содержание сухого остатка. Определение суммарного содержанияорганичесих кислот осуществляли методом алкалиметрического титрования,флавоноидов–методомспектрофотометриипослереакциикомплексообразования с алюминия хлоридом в пересчете на рутин, дубильныхвеществ-методомперманганатометрическоготитрования,полисахаридов-гравиметрически. Результаты оценки содержания основных групп БАВ в водныхизвлечениях из листьев и плодов яблони лесной представлены в таблице 50.Таблица 50.
Содержание основных групп БАВ в водных извлечениях из листьев,плодов яблони лесной.6.4. Особенности получения и оценка показателей качества НМГ из листьев,плодов яблони леснойУчитывая зарубежный опыт использования сырья яблони лесной дляпроизводствагомеопатическихпрепаратов,намиполученынастойкигомеопатические матричные из свежих и замороженных плодов яблони лесной,произведенные по методам 2 и 2а ОФС 42-0027-05 «Настойки матричныегомеопатические» с использованием в качестве экстрагента 90% этиловогоспирта, а также из высушенных плодов и листьев яблони лесной, произведенные159методом 4 ОФС 42-0027-05 «Настойки гомеопатические матричные» сиспользованием 70% этанола и в соответствии с требованиямиПриказаМинздрава России (Министерство здравоохранения РФ) от 26 октября 2015 г.№751н «Об утверждении правил изготовления и отпуска лекарственныхпрепаратовдляиндивидуальнымимедицинскогопримененияпредпринимателями,аптечнымиимеющимиорганизациями,лицензиюнафармацевтическую деятельность» об.)Так как в частной нормативной документации отсутсвуют специальныеуказания, то были использованы следующие методы получения НМГ:1.НМГ из свежесобранных и подвергнутых замораживанию плодов яблонилесной изготавливались по методу 2а – методом мацерации из свежеголекарственного растительного сырья, содержащего менее 70% сока, свлажностью более 60%, не включающего эфирных масел, смол и слизи.Методика: плоды яблони лесной взвешивали на отдельных образцахосуществляли определение влажности (свежее – 9,78±1,78, замороженное– 70,31±2,50), после чего подвергают тщательному измельчению.Измельченную массу плодов яблони лесной взвешивают и сразу жезаливают не менее, чем половинным от массы использованного сырья,количеством спирта этилового, перемешивают и оставлят в плотнозакрытой емкости при температуре не превышающей 32ºС.
Затемосуществляют расчет необходимого для доведения объема спиртаэтилового, смешивают с полученной массой и оставляют не мернее, чемна 10 дней, осуществляя контроль температуры помещения (не выше20ºС) с переодическим встряхиванием экстрагируемого материала, послечего массу отжитмают и осуществяют фильтрацию.2.НМГ из высушенных плодов яблони лесной изготавливалась всоответствии с методом 4 – метод мацерации (из высушенного сырьярастительного происхождения, свежего сырья животного происхожденияи высушенных грибов). Методика: высушенные плоды яблони лесной160измельчают, заливают спиртом этиловым и оставляют в закрытом сосуде,осуществляя ежедневное взбалтывание экстрагируемой масы притемпературе не выше 20ºС, на срок не менее 8 суток, после чегоизвлечение сливают, сырье отжимают, отжатую жидкость доливают кполученному извлечению и осуществляют фильтрацию.Вполученныхнастойкахматричныхгомеопатическихпроводилиопределение таких показателей как значение рН, плотность, сухой остаток пометодикам ГФ XI изд.
Установлено, что указанные показатели в настойках изсвежих и замороженных плодов и листьев яблони лесной практически неразличались.Матричныенастойкиизвысушенныхплодовилистьевхарактеризовалась более высоким значением рН (4,32), а также сниженным в 1,5раза значением сухого остатка, по сравнению с матричной настойкой из свежихплодов и в 1,45 раз из свежих листьев.Результаты определения приведены в таблице 51.Таблица 51.
Результаты определения сухого остатка, плотности и водородногопоказателя настоек матричных гомеопатических из листьев и плодов яблонилеснойОбъекты исследованиярНПлотность, г/мл Сухой остаток, %НГМ свежих плодовяблони леснойНГМ иззамороженных плодовяблони лесной3,040,9658,15 ± 0,143,110,9617,92 ± 0,10НГМ из высушенныхплодов яблони леснойНГМ из свежихлистьев яблони леснойНГМ иззамороженных листьевяблони леснойНГМ из высушенныхлистьев яблони лесной4,320,9485,62 ± 0,113,520,9649,75±0,163,780,9609,25±0,104,510,9576,74±0,13При проведении качественного анализа БАВ методом тонкослойной161хроматографии с использованием методик, применяемых нами ранее при анализеисходного сырья, во всех изучаемых НМГ плодов и листьев яблони леснойидентифицированы хлорогеновая кислота, кофейная кислота, галловая кислота,яблочная кислота и лимонная кислота.
Зоны адсорбции гиперозида, хлорогеновойи яблочной кислот на хроматограммах настоек из высушенных плодов и листьевяблони были менее интенсивными, чем на полученных в аналогичных условияххроматограммах матричных настоек из свежего и замороженного сырья.Анализ полифенольного комплекса настоек матричных гомеопатическихосуществляли методом ВЭЖХ, в описанных ранее условиях.
ПолученныехроматографическиепрофилиидентичныхроматографическимпрофилямЛ ю т е о л и н 2 .8 8 23025н 4.61 7н 0.27 020151050ch12468н 4.41 035И з о к в е р ц и т р и н 5 .8 9 5н 1.38 6А п и г е н и н 1 9 .2 0 0н 2 8 .1 2 3mVн 1 1 .4 9н 6 2 1 .7 2 1исходного сырья.10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54минРис. 39. – Хроматограмма НМГ из листьев яблони (370 нм)Таблица 52. Компонентный состав НМГ из листьев яблони 370 нм№Время, минПлощадь,mV*секПлощадь, %Название123455.2826.74711.3213.7914.23171.019.99106.74425.77804.504.620.272.8811.5021.72НеидентифицировНеидентифицировЛютеолинНеидентифицировНеидентифициров6717.1418.86218.3451.345.901.39ИзокверцитринНеидентифициров16220.3721.7431.228910711.131041.58163.33АпигенинНеидентифицировНеидентифициров19.2028.124.4124н 0 .0 0 00 ch1567891011121314151617И з ор а м н е т и н- 3 - г 11 .13 518н 0 .5 2 2н 0 .3 6 0н К0 в.3е2р 7ц е т и н - 3 - г л к 1 .
2 9 84н 0 .0 0 06н 0 .0 0 08нн 00 .9.7 31 07н 3 .1 3 2н 61 7.0 1 4н 0 .910н 4н.9 98 .53 0 612н 6 .0 5 814Х л о р о ге но в а я к т 2 .0 0 1mVн 0 .4 1 0н 1 .5 К7 2а т е х ин 3 .15 8нн 520 9.3.7 96 48н 5 .6Рис.40. – Хроматограмма НМГ из плодов (2) яблони (370 нм)28192021Таблица 53. Компонентный состав НМГ из плодов яблони 370 нм№Время, минПлощадь,mV*секПлощадь, %Название1234567891011124.3520.005.2145.35111.41335.395.437128.575.5658.630.007.5222.658.683.96НеидентифицировНеидентифицировГалловая к-таПик5Неидентифициров5.63111.375.6455.70235.4683.805.86346.386.0396.15615.0214.317.1226.070.72.395.663.131.010.970.41НеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировмин1637.29923.287.3618.5546.7629.6313.41140.7713.4913.7973.7989.7115.6313.7715.6616.1116.8910.620.000.0017.8117.8319.224.8519.53164.8920.5120.887.735.333002001000н 0.93 3Л ю т е о л и н -7 - г л ю к 1 .
1 8 5400НеидентифицировКатехинХлорогеновая ктНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировНеидентифицировКверцетин-3-глкНеидентифицировИзорамнетин-3-гНеидентифицировНеидентифицировн 1 5 .5 9 9mV1.573.162.009.514.986.060.930.720.000.001.300.3311.130.520,36А п и г е н и н 8 2 .2 8 3131415161718192021222324252627ch10246810 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48минРис.41. – Хроматограмма НМГ из листьев яблони (280 нм)Таблица 54. Компонентный состав НМГ из листьев яблони 280 нм№Время, мин1213,3119,10Площадь,mV*сек337.09265.41Площадь, %Название1.190.93Лютеолин-7-глюкНеидентифициров16420,5534,934436.7423403.64НеидентифицировАпигенин15.6082.28Х л о р о ге но в а я к т 5 .0 0 934100н 1 .2 2 520н 1 .6 3 030Н е о х л о р о г е н о в а я 3 .3 3 8н 0 .2 2 5К о ф е й н а я к - т а 1 .1 2 840н 0 .8 7 3mVн 6 .9 6 0К а т е х ин 9 .39 7Рис.9.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
