Диссертация (1141409), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Ошибка единичного измерения составила 0,91%. (таблицы 2-4)101Таблица 20. Результаты количественного определения гидроксикоричных кислотв листьях яблони в пересчете на кислоту кофейную в период плодоношения№Исследуемый объектобразцаСодержаниегидроксикоричных кислот впересчете на кислотукофейную, %1Листья яблони лесной, заготовленные в1,9644±0,91Истринском районе Московской области2Листья яблони лесной, заготовленные в2,7480±0,75Чеховском районе Московской области3Листья яблони домашней сорта Антоновка1,8706±0,844Листья яблони домашней сорта Ренет1, 8076±0,73СемиренкоТаблица 21.
Результаты количественного определения гидроксикоричных кислотв листьях яблони в пересчёте на кислоту кофейную в осенний период опадания исбора плодов (в случае яблони домашней)№Исследуемый объектобразцаСодержаниегидроксикоричных кислот впересчете на кислотукофейную, %1Листья яблони лесной, заготовленные в1,3182±0,95Истринском районе Московской области2Листья яблони лесной, заготовленные в1,4050±0,81Чеховском районе Московской области3Листья яблони домашней сорта Антоновка1,2430±0,974Листья яблони домашней сорта Ренет1,1250±0,79Семиренко102Таблица 22. Результаты определения метрологически характеристики методикиколичественного определения гидроксикоричных кислот в спиртовых извлеченияхиз листьев яблони леснойnfср2P, %t (P, f)∆срср , %Листья яблони лесной (Истринский район), собранные в фазу цветения541,8810,0002115 0,00145952,780,018080,96Листья яблони лесной (Истринский район), собранные в фазу плодоношения541,96440,00020720,0144952,780,0178960,91Листья яблони лесной (Истринский район), собранные в фазу опадания плодов541,61820,0001535 0,01238952,780,0154000,95Статистическая обработка данных пяти параллельных измерений показала,что количественное содержание гидроксикоричных кислот в листьях яблонилесной в пересчете на кофейную кислоту в период цветения составило –1,881±0,96 (Истринский район), 2,340±0,74 (Чеховский район), в периодплодоношения – 1,9644±0,91 (Истринский район), 2,7480±0,75 (Чеховский район),ипериод опадания плодов – 1,3182±0,95 (Истринский район), 1,4050±0,81(Чеховский район), для листьев яблони сортов Антоновка обыкновенна и РенетСемиренко колебалось содержание от 1,8706±0,84 до 1,1250±0,79.4.4.
Идентификация и количественная оценка органических кислот листьев,плодов яблони леснойКак известно, в живом организме карбоновые кислоты являются активнымиучастниками цикла Кребса. В экспериментах было установлено, что введениенекоторых С4-дикарбоновых кислот способствует возрастанию потреблениякислорода в тканях в значительно больших объемах, чем небходимо дляосуществления процесса их собственного окисления, что подтверждает участиекарбоновых кислот в каталитическом возрастании потребления кислородатканями организма. [Страйер Л. Биохимия. М.1994] Учитывая важностьсодержащихся в растительном сырье карбоновых кислот, участников цикла103Кребса, стимулирующих в организме обменные процессы, был проведен рядисследований пищевого сырья, в том числе яблок различных сортов и плодовогопюре, получаемого из смеси помологическох сортов, в ходе которых былоустановленоналичие во всех исследуемых объектах винной, лимонной,молочной, фумаровой, щавелевой, яблочной и янтарной кислот [115] Однако,нами не обнаружены данные литературы, посвященные анализу карбоновыхкислот в плодах и листьях яблони лесной.Предварительный анализ состава органических кислотосуществлялиметодом тонкослойной хроматографии на пластинках «Sorbfil» ПТСХ-АФ-А(10х15см) в системах растворителей наиболее часто применяемых для анализаорганических кислот:* этиловый спирт 95% - крнцентрированный р-р аммиака (16:4,5);*н-бутанол-кислота муравьиная-вода (5:0, 5:2)* этилацетат- муравьиная кислота- вода (3:1:1);*этилацетат-кислота уксусная-кислота муравьиная –вода (100:11:11:25) [118]Лучшее разделение и качество разделяемых зон было достигнуто прииспользованиихроматографической системыэтилацетат-кислота уксусная-кислота муравьиная –вода (100:11:11:25), что обусловило наш дальнейший выбордля исследования органических кислот в извлечениях из листьев и плодов яблонилесной.Насыщениехроматографическойкамерыпарамиподвижнойфазыосуществляли в течение получаса.
Обнаружение зон адсорбции исследуемыхвеществ осуществляли, используя раствор бромкрезолового зеленого 0,2% споследующим прогреванием пластинок в сушильном шкафу в изотермическомрежиме. Органические кислоты детектировались на хроматограммах как желтыепятна на синем фоне. Хроматографические параметры органических кислот,используемых в качестве стандартов представлены в таблице 23.104Таблица 23.
Хроматографические параметры органических кислот стандартовРезультатыхроматографическогоразделенияорганическихисследуемом сырье представлены на рисунке и в таблице 24.кислотв105Таблица 24. Результаты хроматографического анализ органических кислот висследованном сырье106Анализ качественного состава и количественного содержания карбоновыхкислот в образцах исследуемого сырья осуществляли по методике Кузьменко А.Н.[51]методомионо-эксклюзионнойхроматографии.Дляосуществлениякачественной идентификации хроматограмм отдельные пики обнаруживаемыхкарбоновых кислот идентифицировали методом добавок с применениемстандартных растворов.По данным хроматографического анализа установлено, что плоды и листьяяблони лесной содержат тот же набор карбоновых кислот, который былустановлен ранее для сортовых плодов яблони домашней [75]. Общий видхроматограммы для извлечений из свежих плодов и листьев яблони представленна рисунке.
Качественный и количественный состав органических кислот вводных извлечениях из плодов и листьев яблони лесной представлен в таблице 25.Таблица 25. Содержание органических кислот в плодах, листьях яблони лесной,мг/100 г107Как видно из данных таблицы, преобладающей кислотой во всех образцахявляется яблочная, содержание которой составило от 1169,0 мг/100 г до 706,0мг/100 г.Учитывая простоту, доступность и удобство титриметрических методованализа мы сочли целесообразным так же провести определение суммарногосодержания свободных органических кислот по методике «Определениесодержания свободных органических кислот» (ГФ Х1., ст.38 Fructus Rozae) впересчете на яблочную кислоту.
Результаты анализа и метрологическиехарактеристики представлены в таблице 26.Таблица 26. Результаты количественной оценки содержания свободныхорганических кислот методом кислотно-основного титрования в плодах илистьях яблони лесной различных методов консервацииВид сырьяX, %P, %t (P, f)SSxΔXE, %ЛистьяСвежие1,57952.780.00040.0200.02401.58(ИстринскийЗамороженные1,35952.780.000650.0250.03162.34район)Высушенные0,98952.780.00075 0.02740.0343.47ЛистьяСвежие1,48952.780.00040.0200 0.02402.08Замороженные1,29952.780.00035 0.0187 0.02321.79Высушенные0,96952.780.00035 0.0187 0.02322.42ПлодыСвежие6,71952.780.00040.0200 0.02480.37(ЧеховскийЗамороженные5,45952.780.00025 0.0158 0.01970.36район)Высушенный4,30952.780.00060 0.0244 0.03050.71ПлодыСвежие6,34952.780.00035 0.0187 0.02320.37(ИстринскийЗамороженные5,21952.780.00080 0.0280 0.03500.67район)Высушенные4,15952.780.00085 0.0292 0.03620.87(Чеховскийрайон)108Содержание органических кислот в листьях иплодах яблони лесной76543210Листья (р-нЧеховский)Плоды (р-нЧеховский)СвежиеЛистья (р-нИстринский)ЗамороженныеПлоды (р-нИстринский)ВысушенныеРис.26.
Содержание органических кислот в листьях и плодах яблони леснойСогласнолитературнымданнымвсоставеизучаемыхвидовлекарственного сырья содержится достаточное количество аскорбиновойкислоты, обуславливающей ценность плодов, листьев яблони лесной, какисточника витимина С. Для обнаружения у-лактона-2,3-дегидро-L-гулоновой(аскорбиновой) кислоты использовали наиболее чувствительную системурастворителей:этилацетат–ледянаяуксуснаякислота(80:20).Детектирование проводили после опрыскивания пластинок раствором 2,6дихлорфенолиндофенолята натрия.
Аскорбиновая кислота обнаруживалась ввиде бесцветных пятен на розовом фоне с значением Rf около 0,62 на уровнепятна свидетеля аскорбиновой кислоты (ГОСТ 4815-76 Кислота аскорбиноваяпищевая, квалификация ЧДА) (рис.27). Зоны адсорбции аскорбиновойкислоты присутствовали в извлечениях всех объектов исследования, однако всвежих и замороженных листьях и плодахинтенсивнее.проявлялись значительно109Рис.27. Схема хроматограммы аскорбиновой кислоты в исследуемых листьях иплодах яблони лесной:Водные извлечения:1.Свежих плодов яблони лесной2.Заморож. плодов яблони лесной3.Высушенных плодов яблони лесной4.Свежих листьев яблони лесной5.Заморож. листьев яблони лесной6.Высушенных листьев яблони лесной7.Стандартный образец кислоты аскорбиновой (Rf =0,63)Количественное определение аскорбиновой кислоты в исследуемом сырьеосуществляли по методике ГФ ХI, «Плоды шиповника».
Результаты анализапредставлены в таблице 27.Таблица 27. Результаты определения содержания аскорбиновой кислоты висследуемыхВид сырьяX, %P,t (P,%f)SSxΔXE,%ЛистьяСвежие0,112952,780,0000475 0,0068920,008567.6(ЧеховскийЗамороженные0,097952,780,0000082 0,0028630,003563.7110район)Высушенные0,064952,780,0000145 0,003800 0,0047347.4ЛистьяСвежие0,119952,780,0000062 0,002490 0,0030902,6Замороженные0,101952,780,0000165 0,004100 0,0050975.1Высушенные0,068952,780,0000155 0,0039370,004807.2ПлодыСвежие0,301952,780,0000140,003740,004651,5(ЧеховскийЗамороженные0,292952,780,0000055 0,0023450,002931,1район)Высушенный0,115952,780,0000085 0,0029100,00363.2ПлодыСвежие0,315952,780,0000086 0,0029150,003621.2(ИстринскийЗамороженные0,299952,780,0000055 0,0023450,002931,0район)Высушенные0,109952,780,00000630,003092.8(Истринскийрайон)0,00249Сравнительный анализ содержания аскорбиновойкислоты в листьях и плодах яблони лесной0,350,30,250,20,150,10,050Листья (р-нЧеховский)Плоды (р-нЧеховский)СвежиеЛистья (р-нИстринский)ЗамороженныеПлоды (р-нИстринский)ВысушенныеРис 28.
Сравнительный анализ содержания аскорбиновой кислоты в листьях иплодах яблони лесной4.5. Результаты аминокислотного анализа листьев, плодов яблони леснойАнализ литературных данных свидетельствует о неуклонном росте интересаисследователей к оценке содержания свободных и связанных аминокислот впищевом и лекарственном растительном сырье, причем научный поискнаправлен, как на исследования влияния растительных аминокислот на111биохимические процессы организма человека, так и на изучение влиянияразличных внешних факторов на накопления аминокислот в растительноморганизме [119] При этом, до сих пор лекарственное растительное сырье вофицинальной медицине не рассматривается как полноценный источниклегкоусваиваемых форм аминокислот, что, во многом.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
