Диссертация (1141395), страница 3
Текст из файла (страница 3)
рег. 012013713444, шифр 245, (B/C, I/II,1), а также в рамках Государственного контракта №13411.1008799.13.20 от24.06.13 г. «Доклинические исследования инновационного лекарственного13средства на основе производного индолокарбазоладлялеченияонкологических заболеваний».Основные положения, выносимые на защиту:- результаты исследований по обоснованию и разработке состава итехнологии получения ИЛФ-лио ЛХС-1208;- результаты проведения комплексных исследований по разработкеметодикхимико-фармацевтическогокачественныйхроматографическийанализаанализИЛФ-лиокомпонентовЛХС-1208:ЛФиколичественное спектрофотометрическое определение ЛХС-1208 в ЛФ;- результаты контроля качества экспериментальных серий ИЛФ-лиоЛХС-1208 и изучения их стабильности в процессе хранения.Объем и структура диссертацииДиссертация изложена на 136 страницах машинописного текста исостоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методовисследований, трех глав собственных исследований, общего заключения,общих выводов, списка литературы и приложений.
Библиографическийуказатель содержит 132 наименования (из них 47 – на иностранном языке).Приведено 18 рисунков, 24 таблицы.14ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1. Общая характеристика группы производных индолокарбазола1.1.1. N-гликозиды замещенных индоло[2,3-a]карбазоловСозданиеновыхотечественныхпротивоопухолевыхпрепаратов,избирательно разрушающих опухолевую ткань, является актуальной задачейсовременной российской науки. Среди широкого спектра химическихсоединенийособыйпроизводныхинтереспредставляютпрепаратыиндолокарбазола.N-Гликозидызамещенныхизгруппыиндоло[2,3-a]карбазолов и родственных соединений – это быстро увеличивающаясягруппасинтетическихсоединений,обладающихпротивоопухолевой,антибактериальной и иммуномодулирующей активностью [75, 76].Значительныемеханизмауспехифундаментальнойзлокачественнойтрансформациимедициныклетоквиизучениипроцессаметастазирования новообразований позволили определить новые мишенивоздействия потенциальных противоопухолевых средств.
Способностьвзаимодействовать с несколькими мишенями и индуцировать различныепути гибели опухолевых клеток является отличительной особенностьюмеханизма действия препаратов из группы производных индолокарбазола.Для этих соединений такими мишенями являются топоизомеразы, ДНК ипротеинкиназы [12, 61, 77, 78].Актуальность поиска ЛВ определяется отсутствием в клиническойпрактике отечественных ингибиторов топоизомеразы I и/или II, в то времякаквонкологическийпортфельпрочновошлалинейкахимиотерапевтических препаратов этого класса, разработанных за границей:иринотекан, топотекан, этопозид и тенипозид [13].
Ингибиторы топоизомераз–одниизнаиболееэффективныхиндукторовапоптоза,т.е.самопрограммируемой гибели опухолевых клеток. Соединения этого классаобладают также активностью в отношении циклин-зависимых киназ. Этиособенностимеханизмадействияопределяютширокийспектр15цитотоксическойи противоопухолевойактивностиNгликозидов индоло[2,3-a]карбазолов [116].Первым противоопухолевым соединением из класса индолокарбазоловбыл антибиотик ребеккамицин – ингибитор топоизмеразы I, активный вотношении клеток меланомы В-16 и лимфоцитарной лейкемии Р-388.
В связисплохойрастворимостьюребеккамицинасинтезированоеговодорастворимое производное бекатекарин. Бекатекарин прошёл I–II фазуклинических исследований в монотерапии и при комбинированном лечениинемелкоклеточного и мелкоклеточного рака легкого, рака молочной железы,рака почки, нейробластомы, колоректального рака, рака яичника, рака тонкойкишки, лейкозов, лимфом [123].Бекатекарин вошел в Перечень редких («сиротских») медицинскихтехнологий Евросоюза как препарат для лечения опухолей желчныхпротоков. Стоит пояснить, что данный Перечень был сгруппирован согласнофармакотерапевтическойклассификации,внегобыливнесенынезначительные корректировки названий в соответствии с российскоймедицинской терминологией. Однако в связи с тем, что экспертыФормулярного комитета не проводили анализ доказательств эффективностимедицинских технологий, включенных в Перечень, они не могут бытьуверенывуровнедоказанностиихэффективностиижизненнойнеобходимости [62].Синтетическимпутёмтакжеполученодругоепроизводноеребеккамицина, также обладающее плохой растворимостью – препаратэдотекарин.
Клинические исследования эдотекарина проводились прилечении глиобластомы (в комбинации с темозоломидом или ломустином),при распространённом раке желудка, рецидивирующем после ранеепроведенной химиотерапии [113].Известным ингибитором PDK-1 (фермента активации киназы Akt,иначе называемая протеинкиназа В) является индолокарбазол стауроспорин,растворимый в спирте 95% и нерастворимый в воде [118].
Его 7-16гидроксипроизводноеиспытанийдляUCN-01 проходилолечениягемобластозовII[124].фазуклиническихUCN-01являетсянеселективным ингибитором многих протеинкиназ, в частности – семействапротеинкиназ С и циклинзависимых киназ [7]. Все вышеперечисленныепрепараты при проведении клинических исследований пациентам вводиливнутривенно.1.1.2. Производное индоло[2,3-a]карбазола ЛХС-1208В НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н.
Блохина»Минздрава России проводился скрининг соединений среди производныхиндолокарбазола [60]. В результате в качестве одного из перспективныхпроизводныхвыбранпрепаратЛХС-1208–6-амино-12-(1-α-L-арабинопиранозил)индоло[2,3a]-пирроло[3,4с]карбазол-5,7-дион(рис.1),который не растворим в воде, мало растворим в спирте 95% и ацетоне,растворим в диметилсульфоксиде (ДМСО) и диметилформамиде (ДМФА)[30].Рис.1. Общая формула производного индолокарбазола ЛХС-1208,где y – NH2, x1 = x2 – H, z – H; Gly – арабинозаВысокая противоопухолевая активность ЛХС-1208 на лимфоцитарнойлейкемии Р-388, эпидермоидной карциноме легких Льюиса (lung Lewiscarcinoma, LLC) и его терапевтическое преимущество перед другимипроизводными индолокарбазола в отношении меланомы В-16 дали основаниеотобрать данное соединение для доклинических исследований [30].Ежедневное внутрибрюшинное введение ЛХС-1208 в течение 5 дней вдозе 100 мг/кг на Р-388 давало увеличение продолжительности жизни (УПЖ)опытных мышей по сравнению с контрольными животными на 119%.
На17LLC ЛХС-1208 в дозе 100 мг/кг проявиловысокийпротивоопухолевый эффект непосредственно после окончания лечения,торможение роста опухоли (ТРО) составляло 90%. Терапевтический эффектЛХС-1208 сохраняется на карциноме LLC в течение 15 дней, а на меланомеВ-16 в течение 7 дней [73].Для внутривенного введения ЛХС-1208 был разработан прототип ЛФпрепарата. При оценке эффективности на Р-388 прототипа ЛФ длявнутривенного введения в дозе 50 мг/кг выявлена противоопухолеваяактивность – 122% УПЖ, равная с эффективностью субстанции привнутрибрюшинном введении, но в дозе 100 мг/кг – 119% УПЖ. Такимобразом, проведенные исследования показали, что по терапевтическойэффективности прототип ЛФ для внутривенного введения соединения ЛХС1208неуступаетсубстанции,разведеннойв10%ДМСОпривнутрибрюшинном введении, но терапевтическая доза прототипа в два разаменьше, чем субстанции [74].1.2.
Применение методов повышения растворимости ЛПРазработка оптимальной ЛФ отобранного в экспериментальныхисследованияхактивногофармакологическоговеществасоставляетосновополагающее звено в алгоритме комплексных исследований посозданию терапевтического препарата. Для того чтобы получить требуемыйфармакологический эффект, необходимо доставить ЛВ к пораженномуоргану.
Задачей ЛФ является обеспечение оптимальных условий длямаксимальной биодоступности ЛВ. Всасыванию ЛВ в кровь предшествуетего растворение в биологических жидкостях, после чего проникновениечерез физиологические мембраны проходит на уровне молекул активноговещества.Поэтомуважнымвопросомфармацевтическойтехнологииявляется повышение растворимости гидрофобных и трудно растворимых ЛВв воде и органических растворителях, поскольку их биологическаядоступность в значительной степени зависит от растворимости и мембраннойпроницаемости [55].18Известно,чтопроцесс растворениявеществасвязансявлениями фазового перехода на границе твердое вещество – раствор.Интенсивность этого процесса зависит от площади поверхности раздела фаз.Однако микронизация (измельчение частиц) далеко не всегда приводит кувеличению скорости растворения и абсорбции ЛВ, что объясняетсяявлениями агломерации и агрегации.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
