Диссертация (1141371), страница 7

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 7)

niger1 г препарата налоксон спрей назальный помещают в стерильный мерныйсосуд, доводят объем до 20 мл стерильным фосфатным буферным раствором снатрия хлоридом и пептоном рН 7.0 и тщательно перемешивают. Принеобходимости делают серийные разведения полученного образца в том жерастворителе. По 1 мл полученного образца и, при необходимости, его серийныхразведений высевают двухслойным методом на чашки Петри с Сабуро-глюкозаагаром.2.3.5 Методика определения микробиологической чистотыИспытание проводят в соответствии с требованиями ОФС 1.2.4.0002.15«Микробиологическая чистота», категория 2.Для разработки и проверки пригодности методики использовали следующиештаммы тест-микроорганизмов: Bacillus cereus ATCC 10702; Escherichia coliATCC 25922; Salmonella tуphimurium 55; Staphylococcus aureus ATCC 6538-Р,41Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Candida albicans NCTC 885-653; Aspergillusniger ATCC 16404.Для устранения антимикробного действия разработанного препаратапроводили разведение препарата 1:10.Ход определения: 10 мл препарата помещают в стерильный мерный сосуд,доводят объем содержимого до 100 мл стерильным фосфатным буфернымраствором с натрия хлоридом и пептоном рН 7,0 и тщательно перемешивают(образец А).Для определения общего числа бактерий по 1 мл образца А высеваютдвухслойным методом на две чашки Петри с соево-казеиновым агаром илиплотной питательной средой № 1.Для определения общего числа грибов по 1 мл образца А высеваютдвухслойным методом на две чашки Петри с агаром Сабуро с глюкозой иантибиотиками или плотной питательной средой № 2.Для испытания на наличие Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa10 мл образца А вносят в 100 мл жидкой питательной среды (соево-казеиновогобульона или среды № 8).

Инкубацию посевов, учет и интерпретацию результатовпроводят в соответствии с требованиями разделов 4.4 и 4.5 общей статьи.Дляколичественногоопределенияэнтеробактерийидругихграмотрицательных бактерий 10 мл препарата вносят в 100 мл лактозного бульона(среда № 11), перемешивают и инкубируют от 2 ч до 5 ч (образец Б).Для проведения испытания используют три пробирки, каждая из которыхсодержит 9 мл бульона Мосселя или среды № 3. По окончании инкубацииобразец Б перемешивают, переносят 1 мл (соответствует 0,1 мл препарата) впервую пробирку и перемешивают. Из первой пробирки 1 мл (соответствует0,01 мл препарата) переносят во вторую пробирку и перемешивают; из второйпробирки 1 мл (соответствует 0,001 мл препарата) переносят в третью пробирку иперемешивают.

Посевы инкубируют в течение 24-48 ч. В случае роста дляподтвержденияналичияэнтеробактерий,делаютпересевнаплотнуюпитательную среду (агар Мосселя или среда № 4) и инкубируют чашки Петри в42течение 18-24 ч. Учет и интерпретацию результатов проводят в соответствии стребованиями раздела 4.1.2 общей статьи.2.4 Методики определения показателей качества расфасованногопрепарата налоксон спрей назальныйПоказатели качества расфасованного препарата налоксон спрей назальныйопределяли по стандартным методикам, описанным в ГФ XIII издания (таблица2.7).Таблица 2.7 Показатели качества расфасованного препарата налоксон спрейназальныйДокумент / описаниеметодики-ВЭЖХ;Определение подлинности:-Спектрофотометрия вНалоксонаультрафиолетовой игидрохлоридвидимой областях;-Качественная реакцияна хлориды (ГФ XI, вып.

1,с. 166)МетодикаПропиленгликольГХКоличественноеопределениеНалоксона гидрохлорид(С19Н22СlNO4)ВЭЖХПропиленгликоль(С3Н8О2)ГХПосторонниепримесиЛюбая индивидуальнаянеидентифицированнаяпримесьВЭЖХСумма примесейОборудованиеShimadzu в следующейкомплектации: насос LC20AD, автосамплер SIL-20A,детектор SPD-20AV,термостат CTO-20AS,системный контролер CBM20 ALITEShimadzu GC-2014 с FIDдетектором, оснащенныйавто-инжектором AOC-5000Shimadzu в следующейкомплектации: насос LC20AD, автосамплер SIL-20A,детектор SPD-20AV,термостат CTO-20AS,системный контролер CBM20 ALITEShimadzu GC-2014 с FIDдетектором, оснащенныйавто-инжектором AOC-5000Shimadzu в следующейкомплектации: насос LC20AD, автосамплер SIL-20A,детектор SPD-20AV,термостат CTO-20AS,системный контролер CBM20 ALITE43Определениевысвобождения налоксонагидрохлорида ипропиленгликоля измодельных растворовОпределение содержанияпропиленгликоля вдиализатеДиализчерезполупроницаемую мембрану Прибор для изучениядиализа черезпо Крувчинскомуполупроницаемую мембрануГХОпределение осмоляльности По снижению температурыраствораих замерзанияShimadzu GC-2014 с FIDдетектором, оснащенныйавто-инжектором AOC-5000Миллиосмометр-криостаттермоэлектрический МТ-5(ОАО НПП «Буревестник»,РФ)Испытание упаковки:Проверка упаковки нагерметичностьОФС.1.4.1.0002.15Фильтровальная бумагаПроверканасоса-дозатораОФС.1.4.1.0002.15-Средняя масса доставляемойОФС.1.4.1.0002.15дозыВесы EUROPE-C500 фирмы“Gibertini S.A.” (Италия) иCRYSTAL 200 фирмы“Gibertini S.A.” (Италия)Лазерный дифрактометр«Spraytec laser diffractionsystem» («MalvernInstruments»,Великобритания)Специальная установка дляопределения статическогоотпечатка факелараспыленияОпределение распределениякапель по размерамОФС 42-0083-08, ГФ XII, ч.2Определение качествараспыленияПо статическим отпечаткамфакела распыленияОпределение массыдоставляемой дозыОФС.1.4.1.0002.15Согласно НДОпределение однородностимассы доставляемой дозыОФС.1.4.1.0002.15Аппарат, способный кколичественномуудержанию дозыОпределение количестваизвлекаемых дозОФС.1.4.1.0002.15Согласно НД по методике 1442.4.1 Методика определения высвобождения налоксона из модельныхрастворовСтепень высвобождения налоксона и ПГ из модельных растворовпроводилиметодомдиализачерезполупроницаемуюмембрану(поКрувчинскому) из целлофана (ГОСТ 7730-89) при температуре (37±0,1)°С.

Массапрепарата в испытываемом образце составляла 3,0 г; диализ проходил в камеру,содержащую 60 мл воды очищенной. Содержание налоксона в диализатеопределялиметодомВЭЖХнажидкостномхроматографесоспектрофотометрическим детектором в следующих условиях: колонка размером100 мм х 4,0 мм, заполненная сорбентом «Reprosil-Pur Basic C18» с размер частиц3 мкм; подвижная фаза – фосфатный буферный раствор рН 2,0 – ацетонитрил дляхроматографии (82:18); скорость потока подвижной фазы 0,9 мл/мин; температураколонки 40°С; длина волны детектирования 281 нм.2.4.2 Методика количественного определения налоксона гидрохлоридаи пропиленгликоля в растворе1.

Налоксона гидрохлорид. Определение проводили методом ВЭЖХ.Около 5,0 г (точная навеска) препарата налоксона спрея назальногопомещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объём раствора водой дометки и перемешивают (испытуемый раствор).По 10 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения налоксонагидрохлоридахроматографируютнажидкостномхроматографесУФ-спектрофото-метрическим детектором в следующих условиях:– колонка стальная размером 100 мм х 4,0 мм, заполненная сорбентом«Reprosil-Pur Basic C18», размер частиц 3 мкм (или аналогичная, для которойвыполняются требования к пригодности хроматографической системы);– подвижная фаза: фосфатный буферный раствор рН 2,0 – ацетонитрилдля хроматографии (82 : 18);– скорость потока подвижной фазы: 0,9 мл/мин;– температура колонки: 40 оС;45– длина волны детектирования: 281 нм.Содержание налоксона гидрохлорида (X) в 1 г препарата, в миллиграммах,вычисляют по формуле:X где: S1 –S1  m0  50  P  (100  W ) S1  m0  P  (100  W )S0  m  50  100  100S0  m  10000среднее значение величины площади пика налоксона, рассчитанное похроматограммам испытуемого раствора;S0 –cреднее значение величины площади пика налоксона, рассчитанное похроматограммам раствора сравнения налоксона гидрохлорида;масса навески препарата, в граммах;m – масса навески налоксона гидрохлорида, взятой для приготовленияm0 – раствора сравнения налоксона гидрохлорида, в миллиграммах;содержание основного вещества в безводном налоксона гидрохлориде,которыйиспользовандляприготовлениярастворасравненияP – налоксона гидрохлорида, в процентах;потеря в массе при высушивании налоксона гидрохлорида, которыйиспользован для приготовления раствора сравнения налоксонаW – гидрохлорида, в процентах.Содержание С19Н22СlNO4 (налоксона гидрохлорида) в 1 г препарата должнобыть от 11,4 мг до12,6 мг.Примечание.1.Приготовлениерастворасравненияналоксона гидрохлорида.

Характеристики

Список файлов диссертации