Диссертация (1140062), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Свойством этих антиоксидантов является строгая клеточная и органная локализация, а также высокая специфичность. Кроме того, к этой группеможно отнести лактоферрин, трансферрин, альбумины крови и ферритин, ноони практически не проникают через мембранные барьеры. Эффекты ферментных антиоксидантов усиливают естественные антиоксиданты, к которым34относятся стероидные гормоны, витамин E, серосодержащие аминокислоты,пептиды, фосфолипиды, производные γ-аминомасляной кислоты и продуктыметаболизма эйкозаноидов. Все ферментные антиоксиданты действуют внутриклеточно, молекулярная масса энзимов, которые находятся внутриклеточно, не дает им выйти из клетки.
К низкомолекулярным соединениям антиоксидантов относят и витамины К, P, A, некоторые аминокислоты, токоферол,аскорбиновая кислота, глутатион, полиамины. Единой системы классификации антиоксидантной защиты нет, но можно выделить пять ее уровней. Напервом уровне это обусловлено уменьшением количества кислорода в клетках и тканях в сравнении с атмосферным кислородом. Второй уровень – этовосстановление четырехэлектронного внутриклеточного кислорода с помощью цитохромоксидазы, при котором не вырабатываются свободные радикалы. Третий уровень – элиминация перекисей водорода и супероксидного радикал-аниона. На четвертом уровне защита обусловлена свободнорадикальными ловушками. И на последнем (пятом) уровне происходит восстановление полиненасыщенных жирных кислот и гидроксиперекисей. Учитывая всеэто, можно утверждать, что эффективность функционирования антиоксидантной системы зависит от всех уровней системы [2, 64, 60, 118,].Хотелось бы отметить, роль хирургической травмы, которую можноназвать запланированным необходимым стрессом, в процессах перекисногоокисления липидов.
Результатами такого стресса являются нарушения процессов липопероксидации и нормального функционирования дыхательнойсистемы, сердечно-сосудистой, эндокринной, нервной и, конечно же, выделительной. Хирургическое лечение и его последствия в виде гипоксии, ацидоза и течения раневого процесса в ходе лечения поддерживают процессылипопероксидации на фоне недостатка антиоксидантов. Проблема эта весьмаактуальна и требует дальнейшего изучения [106, 175, 209].В последние годы проявляют большой интерес к диагностике различных патологических процессов, посредством определения продуктов процесса липопероксидации различными методами, наиболее перспективным явля35ется метод хемилюминесценции.
Все продукты липопероксидации можноопределять в крови, моче и других биологических средах. Изучение коррекции свободнорадикального окисления и активации антиоксидантной системы позволит улучшить эффективность лечения пиелонефрита и воздействовать напрямую на механизм патогенеза любого заболевания [159, 181,119].362. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1.
Клиническая характеристика больныхПод нашим наблюдением были пациенты с подтвержденным диагнозом острый пиелонефрит, находившиеся на стационарном лечение в урологическом отделении ОБУЗ КГКБ СМП г. Курска и урологическом центреНУЗ «Научный клинический центр ОАО «РЖД» (г. Москва), в период 2014 –2015 гг. Всем пациентам проводили комплексное клинико-инструментальноеобследование согласно стандартам.В исследование были включены 62 пациента (женщины в возрасте41,5±3,9 лет) с верифицированным диагнозом, подтвержденным клиническими и лабораторно - инструментальными методами обследования: острыйсерозный или острый гнойный пиелонефрит, рандомизированных по полу,возрасту, минимальному количеству сопутствующих заболеваний в стадииремиссии. Критериями включения в исследование были: подтвержденныйдиагноз ОСП и ОГП, письменное согласие на участие в проводимых исследованиях, переносимость использованных в исследовании фармакологических препаратов, вовлечение в процесс одной почки.
Критериями исключения являлись: отказ от проводимого исследования, двусторонний процесспоражения, наличие специфических инфекций, передаваемых половым путем, наличие соматической патологии в стадии неполной ремиссии и стадииобострения, аллергических реакций на проводимое лечение.Диагноз острого пиелонефрита и тяжесть процесса определялись послекомплексного стандартного обследования, которое включало: жалобы,анамнез болезни и анамнез жизни пациента, обследование локального статуса, общий анализ мочи и общий анализ крови, биохимическое исследованиекрови, инструментальное обследование (ультразвуковое исследование мочевой системы, рентгенологическое обследование в объеме обзорной и экскреторной урографии).37Критериями диагностики пиелонефрита и формы воспаления у исследуемых больных являлось: наличие синдрома системной воспалительной реакции (температура тела, озноб, частота дыхательных движений, пульс);местная реакция организма (боли в поясничной области); повышение уровнялейкоцитов, со сдвигом лейкоцитарной формулы влево, в общем анализекрови; лейкоцитурия в общем анализе мочи; бактериологическое исследовании мочи с результатом более 10*4 КОЕ/мл.Больные ОСП (1 группа, 35 человек), получали консервативную терапию согласно стандартам лечения и оказания медицинской помощи: внутривенную антибактериальную, которая состояла из комбинации антибиотиковразных групп (цефалоспорины, аминогликозиды, фторхинолоны), инфузионно-дезинтоксикационную, противовоспалительную терапию.
Так же при лечение назначались антикоагулянты и дезагреганты.Пациентам с ОГП (2 группа, 27 человек), выполнялось оперативноелечение с целью дренирования почки, чрескожная нефростомия под ультразвуковым контролем. После дренирования начиналась стандартная антибактериальная терапия, включающая в себя меропенем, внутривенно, капельно,противовоспалительную и инфузионно-дезинтоксикационную терапию. Использовались также антикоагулянты, витамины и дезагреганты.
Взятие кровипроисходило до начала комплексного лечения, после оперативного пособияна почке и перед выпиской пациента из стационара, примерно это были 10-е15-е сутки после лечения.Группа контроля состояла из15 здоровых добровольцев-доноров тогоже возраста.Для оценки информативности качественных факторов и создания наоснове их прогностической модели использовался нейроимитатор NeuroPro0,25. Для этого был проведен ретроспективный анализ 206 историй болезнибольных, находившихся на стационарном лечении.382.2.
Методы лабораторных исследованийДля определения иммунологических показателей забирали кровь излоктевой вены утром натощак, объемом 10 мл в стеклянные пробирки, затемцентрифугировали и помещали полученную нами сыворотку крови в пробирки типа Eppendorf, затем замораживали при температуре -35оС. У больных острым первичным пиелонефритом производился забор средней порциимочи при акте мочеиспускания, у пациентов с острым вторичным пиелонефритом получали для исследования мочу из нефростомы. Общий анализ крови получали стандартным общепринятым способом.Функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, после выделения гранулоцитов из цельной крови на градиентеплотности фиколл-урографина (d=1,077), определяли по фагоцитарному показателю (проценту фагоцитирующих из 100 подсчитанных нейтрофилов),фагоцитарному числу (среднему количеству поглощенных латексных частицна фагоцит) и фагоцитарному индексу активности [81].Кислородзависимую активность оценивали по стимулированному испонтанному зимозаном тесту восстановления нитросинего тетразолия (НСТст.
и НСТ-сп.), индексу стимуляции и функциональному резерву нейтрофилов [40].Уровень цитокинов (IL-1RA, IL-8, ИЛ-10,ФНО, IL -2, ИФα, IL-1α),классов иммуноглобулинов A M, G и СРБ определяли в исследуемом биоматериале методом иммуноферментного твердофазного анализа с детекциейпродуктов реакции в пределах длины волны 405-630 нм с использованиемспециальных коммерческих наборов ЗАО «Вектор-Бест».
Фактор Н и компоненты системы комплемента (С5а,С3а) определяли диагностическими наборами ООО «Цитокин» с применением двух методов: ИФА-метода детекциитерминального комплекса, выявляемого специфическими антителами и гемолитического метода учета активации системы комплемента. Активность С1ингибитора определяли хромогенным методом по способности ингибировать39С1-эстеразу. Для оценки ЦИК использовали метод селективной преципитации с полиэтиленгликолем.Интенсивность и активность процессов перекисного окисления липидов определяли общепринятыми методами по наличию в плазме крови продуктов деградации полиненасыщенных жирных кислот – производных тиобарбитуровой кислоты (ацилгидроперекиси и малоновый диальдегид – с помощью набора «ТБК-Агат» («Агат-Мед» Россия) на спектрофотометре«Апель-330» (Япония) при диапазоне волны 535нм и 570 нм.Для оценки антиоксидантной системы использовали иммуноферментный анализ с детекцией продуктов реакции в диапазоне длины волны 405-630нм, с применением наборов: «Bender Medsystems» (Австрия) для активностисупероксиддисмутазы и «Cayman Chemical» (США) – для каталазы.
Активностьсупероксиддисмутазыикаталазыоценивалиметодомпрямо-го/конкурентного твердофазного иммуноферментного анализа. Антиокислительную активность, оценивали способом, основанным на степени ингибирования аскорбат- и ферроиндуцированного окисления твина-80 до МДА. Уровень стабильных метаболитов оксида азота (СМNO) определяли спектрофотометрическим методом при помощи реактива Грисса и детекцией образовавшихся продуктов при спектре волны 540 нм.Фиксация всех полученных с помощью иммуноферментного анализаданных производилась при помощи микропланшетного фотометра «Sunrise»,Tecan (Австрия).402.3.
Статистическая обработка полученных результатовСтатистическую обработку полученных результатов исследования проводили по общепринятым критериям вариационно-статистического анализа свычислением средних величин (M), ошибки средней арифметической (m) спомощью пакета компьютерных программ Microsoft Excel (2010). При сравнения количественных данных использовали U-тест Манна-Уитни. Корреляционный анализ проводили, используя коэффициент ранговой корреляцииСпирмена. Статистически значимыми считали различия с p=0,05 [66].Частотный анализ, который оперирует риском формирования патологии по конкретным показателям заданной 2-3 степени в популяции больных,проводили с предварительным определением степени изменения показателей.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
