Диссертация (1139658), страница 24
Текст из файла (страница 24)
установили, что для детей, входящих вподгруппу «ПВА», было характерно два варианта специфического клеточногоответа по кластеру 1 и кластеру 3. Кластер 1 характеризовался выраженнымответом на два белка ранней стадии туберкулезной инфекции – CFP32B и 85а – иотсутствием ответа на ЕSAT6, Rv2660c, что позволило говорить об истиннойпоствакцинальной аллергии. Кластер 3 характеризовался ответом на три белкаранней стадии туберкулезной инфекции: ЕSAT6, Rv2660c, CFP32B. Учитывая,142что гены белков ЕSAT6 и Rv2660c не входят в геном БЦЖ, это позволилорассматривать как вариант обусловленный инфекционной аллергией (ЛТИ), чтонельзя исключить, т.к.
диагноз ПВА у детей раннего возраста устанавливали порезультатамтуберкулинодиагностикииисключенииТБ.Кластер2характеризовался отсутствием ответа на все специфические антигены, чтопозволяло говорить об истинной ситуации отсутствия туберкулезной инфекции удетей (ранее не инфицированных МБТ). По результатам дисперсионного анализазначимый вклад в оценку ПВА внесли антигены 85а (F=2677,008; р=0,000) иCFP32B (F=82,101; р=0,000). Антигены ESAT6 (F=20,099; р=0,00001), Rv2660c(F=10,214; р=0,0007), ЕSAT6-CFP10 (F=2,889; р=0,077) и ППД-Л (F=0,740;р=0,489) при решении вопроса о ПВА менее значимы.6.7. Иммунодиагностика туберкулезной инфекции у детей в тестах in vitroИсследования последних лет показывают, что клиническое разнообразиепри развитии туберкулезной инфекции может рассматриваться как непрерывныйспектр, простирающийся от стерилизации иммунитета, субклинического течениязаболеваниядоскоротечногоактивногопроцессастрадиционнымиобозначениями латентной инфекции и активной формы болезни [254; 291; 440].Основным недостатком настоящего времени является отсутствие золотогостандарта диагностики туберкулезной инфекции, т.к.
ни один из них не обладаетдостаточной чувствительностью или специфичностью для определения «места наспектре» данной инфекции [254]. Обобщенный анализ исследований последнихлет (TBNET) также свидетельствует об ограниченности современных тестов,используемых у взрослых и детей для ранней диагностики туберкулезнойинфекции [311].С целью оптимизации диагностических методов проведена оценкаинформативностипоказателейхарактеризующихклеточныйспецифическихиммунологическихпротивотуберкулезныйиммунитет.тестов,Оценка143информативности тестов проведена после обследования детей и уточнениязначимости специфических антигенов.6.7.1.
Оценка информативности специфического иммунологическогоисследования in vitro: определение уровня индуцированного ИФН- с ППД-Ли ЕSAT6-CFP10 при развитии туберкулезной инфекции у детейПо результатам проведенного исследования (см. п. 6.1), при оценке ППД-Лв качестве маркера туберкулезной инфекции установили, что митоген оказалсязначимым для диагностики инфекции, это подтвердила и умеренная корреляция(по Спирмену, r=0,57, р=0,000) между показателями индуцированного ИФН- сППД-Л (и.с.) и пробой Манту с 2 ТЕ ППД-Л (мм).
При этом наличие реакций наППД-Л у вакцинированных затрудняет возможности применения его длядифференциальной диагностики [254]. Поэтому с целью оптимизации теста invitro для диагностики туберкулезной инфекции у вакцинированных детей провелиопределение диагностических критериев показателя ИФН-, индуцированногоППД-Л (таблица 6.13).Таблица 6.13 – Показатели диагностического уровня индуцированного ИФН-ППД-Л у детей в группах сравнения (и.с.)группысравнения*ИФН- с ППД-Л, и.с.ME (Q25%:Q75%)ТБ, n=10026,8 (18,9:34,7)РППТИ,n=6018,1 (12,4:23,8)КритерийМаннаУитни(U), р1-КритерийМаннаУитни (U),р2U=2346,5p=0,021КритерийМаннаУитни (U),р3U=476p=0,000U=434,5p=0,000КритерийМаннаУитни (U),р4U=47,5p=0,000U=39p=0,00001U=95,5p=0,030U=2346,5p=0,021U=476U=434,5Т, n=355,7 (4,0:7,4)p=0,000p=0,000U=47,5U=39U=95,5ПВА, n=102,1 (1,2:3,0)p=0,000p=0,00001p=0,030U=8U=13,5U=3,5U=109ПТА, n=120,5 (0,3:0,6)p=0,000p=0,000p=0,000p=0,001Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ – группа детей враннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группа ранее инфицированных МБТ;144ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группа с положительной туберкулиновойанергией.р1 - Различия между группой ТБ и группами РППТИ, Т, ПВА и ПТА,р2 - Различия между группой РППТИ и группами ТБ, Т, ПВА и ПТА,р3 - Различия между группой Т и группами ТБ, РППТИ, ПВА и ПТА,р4 - Различия между группой ПВА и группами ТБ, РППТИ, Т и ПТА.Оценивая результаты продукции ИФН- с ППД-Л по индексу стимуляции,было установлено, что уровень выше 4,0 значим для диагностики ЛТИ (выше 200пг/мл).
При показателе и.с. выше 7,0 необходимо исключать ранний периодпервичной туберкулезной инфекции, а выше 19,0 – активный туберкулезныйпроцесс.Полученныерезультатыпозволиливычислить«специфичность»и«чувствительность» теста по определению уровня индуцированного ИФН- сППД-Л. Для диагностики ЛТИ, в отличие от пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л [338;254], тест имел более высокую специфичность, равную 95,45% (95% ДИ от 78,2до 99,19%), при чувствительности 90% (95% ДИ от 79,85 до 95,34%).Диагностическая точность теста составила 91,46% (95% ДИ от 83,41 до 95,8%).При этом необходимо отметить, что показатель менее 4,0 и.с. при ЛТИ можетбыть обусловлен дормантным состоянием МБТ у ранее инфицированных илиПВА, что снижает диагностическую значимость теста и требует включениядополнительных антигенов для расширения возможности дифференциальнойдиагностики туберкулезной инфекции у детей.Для диагностики ТБ прогностическая ценность положительного результататеста была установлена на уровне 88,46% (95% ДИ от 80,91 до 93,28%) иотрицательного результата на уровне 89,74% (95% ДИ от 81,05 до 94,71%)(«специфичность» – 85,37%; 95% ДИ от 76,14 до 91,43%; «чувствительность» –92%; 95% ДИ от 85 до 95,89%).
Учитывая снижение специфичности теста придиагностике туберкулеза, возможен риск пропуска патологии.Таким образом, иммунологический тест in vitro по определению уровняиндуцированного ИФН- с ППД-Л, имея более высокую чувствительность и145специфичность в диагностике ЛТИ у детей, может быть рекомендован в качествескрининга на этапе выявления туберкулезной инфекции.Результаты исследования (см. гл. 6.2) оценки значимости гибридного белкадля выявления активной туберкулезной инфекции позволили выявить умереннуюкорреляцию(поСпирмену,r=0,72,р=0,000)междупоказателямииндуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (и.с.) и результатами пробы с АТР (мм).В настоящее время существующие тесты IGRA (квантифероновый и T-SPOT),использующие в качестве индуктора белки ЕSAT6 и CFP10, предлагаются длядиагностики ЛТИ и оценки высокого риска развития ТБ, реализующегося втечение последующих двух лет [254; 468].
С целью оценки информативноститеста in vitro для дифференцированной диагностики латентной и активнойтуберкулезной инфекции провели определение диагностических критериевпоказателя индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (таблица 6.14).Таблица 6.14 – Показатели диагностического уровня индуцированного ИФН- сЕSAT6-CFP10 у детей в группах сравнения (и.с.)группысравнения*ТБ, n=100ИФН- с ЕSAT6-CFP10,и.с.ME (Q25%:Q75%)КритерийМаннаУитни (U),р17,7 (6:9,3)-КритерийМаннаУитни(U), р2U=784,5p=0,000КритерийМаннаУитни (U),р3U=155,5p=0,000U=630,5p=0,001КритерийМаннаУитни (U),р4U=63p=0,000U=224p=0,201U=191p=0,662U=784,5p=0,000U=155,5U=630,5Т, n=350,2 (0,1:0,3)p=0,000p=0,001U=63U=224U=191ПВА, n=100,3 (0,1:0,6)p=0,000p=0,201p=0,662U=60U=306U=294U=54ПТА, n=120,2 (0,2:0,3)p=0,000p=0,415p=0,04p=0,692Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ – группа детей враннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группа ранее инфицированных МБТ;ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группа с положительной туберкулиновойанергией.р1 - Различия между группой ТБ и группами РППТИ, Т, ПВА и ПТА,р2 - Различия между группой РППТИ и группами ТБ, Т, ПВА и ПТА,р3 - Различия между группой Т и группами ТБ, РППТИ, ПВА и ПТА,р4 - Различия между группой ПВА и группами ТБ, РППТИ, Т и ПТА.РППТИ, n=601,3 (0,4:2,3)146Оценивая результаты индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 по и.с.,было установлено, что уровень до 2,0 может быть диагностически значим дляЛТИ, так, положительные реакции регистрировали у 9 пациентов (15%), чтосвидетельствовало об активной инфекции и высоком риске формирования ТБ удетей с ЛТИ.ПолученныеиндуцированногорезультатыИФН-сисследованияЕSAT6-CFP10поопределениюпозволилинамуровнявычислить«специфичность» и «чувствительность» теста.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
