Диссертация (1139658), страница 22

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 22)

У детей группы «РППТИ» показатель был достоверно выше, чем вгруппе «Т» (р=0,0004), «ПВА» (р=0,036) и «ПТА» (р=0,005), при этом показателизначимо не различались между группой «ТБ» и группами «Т», «ПВА» и «ПТА»(Н=1,249; р=0,741).Таким образом, показатели индуцированного ИФН- с Ag85a позволяютрассматривать специфический антиген в качестве маркера раннего периодапервичной туберкулезной инфекции.Полученные референсные значения ИФН- для Ag85a (и.с. ≤ 1,0 –отрицательный результат (< 85 пг/мл), и.с.

выше 1,0 – положительный) позволилиоценить частоту положительных результатов у детей с разной степеньювыраженности туберкулезной инфекции.Анализ положительных результатов индуцированного ИФН- с Ag85aпоказал, что достоверно чаще они регистрировались у детей из группы «РППТИ»(29; 49,2%) (р=0,0005), при этом среди детей группы «ТБ» (29; 26,6%), групп «Т»(8; 17,8%) и «ПВА» (3; 17,6%) регистрировались с одинаковой частотой (р=0,421).Таким образом, по результатам наших исследований, антигены ESAT6 и 85aможно рассматривать в качестве маркеров ЛТИ на ее ранней стадии развития.При этом на Ag85a возможны реакции, обусловленные поствакцинальнымиммунитетом, что снижает его значимость для дифференциальной диагностикитуберкулезной инфекции у детей.1276.4.

Оценка уровня индуцированного ИФН- c CFP32B и его значимость приразвитии туберкулезной инфекции у детейОдним из недавно идентифицированных антигенов является белок CFP32B.Установлено, что белок CFP32B стимулирует гуморальный ответ, поэтому можнопредположить его роль в прогрессировании ТБ. При этом проводимыеисследования ограничены и противоречивы, что не позволяет оценить рольданного белка на этапах развития туберкулезной инфекции, также необходимоучитывать, что ген данного белка обнаружен и в геноме БЦЖ [197; 199; 222; 233;274; 368; 407; 433].Учитывая возможную роль CFP32B в прогрессировании ТБ, данныйспецифический белок был выбран для нашего исследования.

Оценивая уровеньИФН- после индукции CFP32B (пг/мл), мы установили значимые различия впоказателях обследуемых групп: «ТБ», «ЛТИ» и «НТ» (H=9,242; р=0,026)(таблица 6.9).Таблица 6.9 – Уровень индуцированного ИФН- с CFP32B (пг/мл) у детейисследуемых группКритерийКритерийКритерийГруппыnМанна-Уитни Манна-Уитни Манна-УитниMEQ25%:Q75%(U), р1(U), р2(U), р3U=6473;U=1305,5;ТБ*10982,612,9:120,0р=0,039р=0,151U=6473;U=975,5;ЛТИ*102146,515,8:151,0р=0,039р=0,005U=1305,5;U=975,5;НТ*2939,411,4:61,0р=0,151р=0,005Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; ЛТИ – группа с латентнойтуберкулезной инфекцией; НТ – группа не инфицированных МБТ.1- Различия между группой ТБ и группами ЛТИ, НТ,2- Различия между группой ЛТИ и группами ТБ, НТ,3- Различия между группой НТ и группами ТБ, ЛТИ.ИФН- с CFP32B (пг/мл)Так, среди детей группы «ТБ» уровень ИФН- (пг/мл) был снижен истатистически значимо отличался от показателей детей только группы «ЛТИ»(р=0,039), не было установлено различий с «НТ» (р=0,151).

Показатели группы128«ЛТИ» значимо различались по уровню выраженности иммунного ответа отпоказателей группы «НТ» (р=0,005).При определении уровня и.с. в группах «ТБ» (n=109, и.с.=1,0±0,1; Q25%:Q75%0,2:1,6), «ЛТИ» (n=102, и.с.=2,3±0,4; Q25%:Q75% 0,2:2,4) и «НТ» (n=29,и.с.=0,7±0,15; Q25%:Q75% 0,2:1,1) также установили достоверные различия(Н=6,822; р=0,033). Учитывая низкий иммунный ответ при стимуляцииспецифическим антигеном CFP32B на этапе развития заболевания и болеевыраженных реакциях на этапе ЛТИ, можно говорить о значимости данного белкав качестве маркера латентной, а не активной туберкулезной инфекции.Сравнивая показатели уровня ИФН- после индукции CFP32B (и.с.) у детейгруппы «ТБ» в зависимости от формы заболевания, не установили достоверныхразличий(U=905;р=0,400),так,удетейгруппы«ТБ1»продукцияиндуцированного ИФН- регистрировалась на уровне 1,0±0,1 (n=85, Q25%:Q75%0,2:1,8), показатель детей группы «ТБ2» был на уровне 0,9±0,2 (n=24, Q25%:Q75%0,15:1,4).

Уровень индуцированного ИФН- с CFP32B у детей группы «ТБ1» вфазе инфильтрации (n=56, 1,0±0,1; Q25%:Q75% 0,2:1,55) и в фазе кальцинации (n=29,1,0±0,2; Q25%:Q75% 0,2:1,9) также не имел достоверных различий (U=773; р=0,718).Полученные результаты подтвердили низкую значимость белка CFP32B дляоценки активности инфекции и ее прогрессировании у детей.Для уточнения возможности применения CFP32B в качестве маркера ЛТИоценили результаты и.с.

индуцированного ИФН- с CFP32B в группах сравнения,которые представлены на рисунке 6.8 (Н=26,049; р=0,000).1295*уровень ИФН- с CFP32B, и.с.43210-1ТБРППТИТПВАСредств о±SE±1,96*SEПТАгру ппы срав нения **Рисунок 6.8 – Уровень индуцированного ИФН- с CFP32B у детей в группахсравнения (и.с.)Примечание: * р=0,000 (критерий Краскела-Уоллиса)**группы сравнения: ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ– группа детей в раннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группаинфицированных МБТ более года; ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группас положительной туберкулиновой анергией.Полученные результаты в группах сравнения потребовали уточнения,между какими группами имелись достоверные различия (таблица 6.10).Таблица 6.10 – Уровень индуцированного ИФН- с CFP32B (и.с.) у детей группсравненияГруппыnИФН- с CFP32B (и.с.)ME±Q25%:Q75%SEMТБ*1091,0±0,10,2:1,6РППТИ*593,5±0,60,4:3,8Т*430,6±0,090,2:0,8ПВА*190,9±0,20,2:1,2ПТА*100,6±0,20,2:0,4КритерийМанна-Уитни(U), р1U=4459,5;р=0,000U=2062,5;р=0,250U=1021,5;р=0,925U=419;р=0,227КритерийМанна-Уитни(U), р2U=4459,5;р=0,000U=647,5;р=0,000U=330;р=0,007U=133,5;р=0,006КритерийМанна-Уитни(U), р3U=2062,5;р=0,250U=647,5;р=0,000U=458,5;р=0,445U=182;р=0,453КритерийМанна-Уитни(U), р4U=1021,5;р=0,925U=330;р=0,007U=458,5;р=0,445U=72; р=0,291Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ – группа детей враннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группа инфицированных МБТ болеегода; ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группа с положительнойтуберкулиновой анергией.1301234-Различия между группой ТБ и группами РППТИ, Т, ПВА и ПТА,Различия между группой РППТИ и группами ТБ, Т, ПВА и ПТА,Различия между группой Т и группами ТБ, РППТИ, ПВА и ПТА,Различия между группой ПВА и группами ТБ, РППТИ, Т и ПТАТак, показатели индуцированного ИФН- с CFP32B (и.с.) у детей группы«ТБ» были достоверно ниже (р=0,000), чем в группе «РППТИ», но значимо неразличались с группами «Т», «ПВА» и «ПТА» (Н=2,622; р=0,454).

У детей группы«РППТИ» показатель был достоверно выше, чем в группах «Т» (р=0,000), «ПВА»(р=0,007) и «ПТА» (р=0,006). Учитывая полученные результаты, по нашемумнению, белок CFP32B может рассматриваться в качестве антигена раннейстадии туберкулезной инфекции.Дополнительно установили умеренную корреляцию между показателямиИФН- индуцированного ЕSAT6 и CFP32B (и.с.) (по Спирмену, r=0,69, р=0,000),Ag85a и CFP32B (по Спирмену, r=0,58, р=0,000), что также подтверждаловозможность применения данного белка (CFP32B) в качестве маркера для оценкиРППТИ у детей.Установили референсные значения для CFP32B, так, показатель и.с.

≤ 1,0оценили как отрицательный результат (< 85 пг/мл), и.с. выше 1,0 – какположительный.Таким образом, результаты нашего исследования впервые позволили белокCFP32B идентифицировать в качестве потенциального маркера для ЛТИ (вчастности, для раннего периода первичной туберкулезной инфекции), при этомнеобходимо отметить возможность регистрации реакций при формированиипоствакцинальногопротивотуберкулезногоиммунитета,чтоснижаетдиагностическую значимость данного белка.6.5.

Оценка уровня индуцированного ИФН- с Rv2660c и его значимость приразвитии туберкулезной инфекции у детейЕще одним перспективным антигеном МБТ для диагностики туберкулезнойинфекции среди недавно идентифицированных белков является белок Rv2660c.131Rv2660 относятся к области RD11, закодированной в МБТ [273]. Согласнолитературным данным, этот антиген больше ассоциирован с латентной стадиейинфекции [159; 355], хотя его функция до конца не определена [159]. Поэтомуоценка возможности распознавания иммунными клетками антигенов Rv2660c наразных стадиях туберкулезной инфекции позволит расширить представление онем.Оценивая уровень ИФН- после индукции Rv2660c (пг/мл), установилизначимые различия в результатах групп сравнения: «ТБ», «ЛТИ» и «НТ»(H=16,954; р=0,0007) (таблица 6.11).Таблица 6.11 – Уровень индуцированного ИФН- с Rv2660c (пг/мл) у детейисследуемых группКритерийКритерийКритерийМанна-Уитни Манна-Уитни Манна-УитниMEQ25%:Q75%(U), р1(U), р2(U), р3U=4674;U=1512,5;ТБ*109128,218,7:132,0р=0,001р=0,255U=4674;U=1089;ЛТИ*114210,836,0:272,0р=0,001р=0,0005U=1512,5;U=1089;НТ*3266,213,0:77,5р=0,255р=0,0005Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; ЛТИ – группа с латентнойтуберкулезной инфекцией; НТ – группа не инфицированных МБТ.1- Различия между группой ТБ и группами ЛТИ, НТ,2- Различия между группой ЛТИ и группами ТБ, НТ,3- Различия между группой НТ и группами ТБ, ЛТИ.ГруппыИФН- с Rv2660c (пг/мл)nТак, среди детей группы «ТБ» уровень ИФН- после индукции Rv2660c(пг/мл) был ниже и статистически значимо отличался от показателей детейгруппы «ЛТИ» (р=0,001), не было установлено различий с «НТ» (р=0,255).Результаты между группами «ЛТИ» и «НТ» имели статистически значимыеразличия (р=0,0005).При определении уровня и.с.

ИФН- после индукции Rv2660c в группах«ТБ» (n=109, и.с.=1,6±0,3; Q25%:Q75% 0,3:1,7), «ЛТИ» (n=114, и.с.=3,4±0,5;Q25%:Q75% 0,4:3,4) и «НТ» (n=32, и.с.=1,0±0,2; Q25%:Q75% 0,25:1,4) также установилидостоверныеразличия(Н=10,826;р=0,004).Полученныенамиданные132подтвердилипредположениеотом,чтоRv2660cявлялсябелком,характеризующим ЛТИ.Сравнивая показатели ИФН- после индукции Rv2660c (и.с.) у детей группы«ТБ» в зависимости от форм заболевания, установили достоверные различия(U=724,5; р=0,031), так, у детей группы «ТБ1» продукция индуцированного ИФН регистрировалась на уровне 1,9±0,3 (n=85, Q25%:Q75% 0,4:2,0), показатель детейгруппы «ТБ2» был на уровне 0,8±0,2 (n=24, Q25%:Q75% 0,2:0,85), при этомсохранениеиммунногоответанаRv2660cмоглосвидетельствоватьоблагоприятном течении туберкулеза и возможном участии данного белка вформировании протективного иммунитета (рисунок 6.9).2,6*2,4уровень ИФН- с Rv2660c, и.с.2,22,01,81,61,41,21,00,80,60,40,2ТБ1ТБ2Средств о±SE±1,96*SEгру ппы срав нения **Рисунок 6.9 – Уровень индуцированного ИФН- с Rv2660c у детей, больныхтуберкулезом (и.с.)Примечание: * р=0,031 (критерий Манна-Уитни)**ТБ1 – группа детей с первичными формами туберкулеза; ТБ2 – группа детей свторичными формами туберкулезаСравнивая уровень индуцированного ИФН- с Rv2660c у детей группы«ТБ1» в фазе инфильтрации (n=56, 1,9±0,4; Q25%:Q75% 0,4:2,05) и в фазекальцинации (n=29, 1,75±0,4; Q25%:Q75% 0,5:1,9), в показателях различий не былоустановлено (U=832,5; р=0,849).133Уточняя роль белка Rv2660c на этапе латентной инфекции, оценилирезультаты индекса стимуляции индуцированного ИФН- с Rv2660c в группахсравнения, которые представлены на рисунке 6.10 (Н=35,616; р=0,000).7*уровень ИФН- с Rv2660c, и.с.654321Средств о±SE±1,96*SE0ТБРППТИТПВАПТАгру ппы срав нения **Рисунок 6.10 – Уровень индуцированного ИФН- с Rv2660c у детей в группахсравнения (и.с.)Примечание: * р=0,000 (критерий Краскела-Уоллиса)**группы сравнения: ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ– группа детей в раннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группаинфицированных МБТ более года; ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группас положительной туберкулиновой анергией.Установленные различия также потребовали уточнения, в каких группахзначим данный показатель (таблица 6.12).Таблица 6.12 – Уровень индуцированного ИФН- с Rv2660c (и.с.) у детей группсравненияME±SEMQ25%:Q75%КритерийМанна-Уитни(U), р1-ИФН- с Rv2660c (и.с.)ГруппыnТБ*1091,6±0,30,3:1,7РППТИ*615,1±0,81,1:6,9Т*531,4±0,40,3:1,2ПВА*201,2±0,30,25:1,7ПТА*120,8±0,20,25:1,15U=4887;р=0,000U=2724,5;р=0,558U=1104;р=0,927U=573,5;р=0,485КритерийМанна-Уитни(U), р2КритерийМанна-Уитни(U), р3КритерийМанна-Уитни(U), р4U=4887;р=0,000U=2724,5;р=0,558U=760;р=0,000U=1104;р=0,927U=294;р=0,0005U=578,5;р=0,549U=760;р=0,000U=294;р=0,0005U=138;р=0,0007U=578,5;р=0,549U=299,5;р=0,754U=101;р=0,460134Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ – группа детей враннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группа инфицированных МБТ болеегода; ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группа с положительнойтуберкулиновой анергией.1- Различия между группой ТБ и группами РППТИ, Т, ПВА и ПТА,2- Различия между группой РППТИ и группами ТБ, Т, ПВА и ПТА,3- Различия между группой Т и группами ТБ, РППТИ, ПВА и ПТА,4- Различия между группой ПВА и группами ТБ, РППТИ, Т и ПТАТак, показатель индуцированного ИФН- с Rv2660c (и.с.) у детей группы«ТБ» был достоверно ниже (р=0,000), чем в группе «РППТИ», при этомпоказатели значимо не различались с группами «Т», «ПВА» и «ПТА» (Н=0,853;р=0,837).

Характеристики

Список файлов диссертации