Диссертация (1139658), страница 23
Текст из файла (страница 23)
У детей группы «РППТИ» показатели были также достоверно выше, чемв группах «Т» (р=0,000), «ПВА» (р=0,0005) и «ПТА» (р=0,0007), что позволилорассматривать белок Rv2660c в качестве маркера ЛТИ для оценки ее раннейстадии развития, а, следовательно, это подтверждает участие данного белка вформировании адаптивного иммунитета.Былаустановленасильнаякорреляциямеждупоказателямииндуцированного ИФН- с ЕSAT6 и с Rv2660c (и.с.) (по Спирмену, r=0,77,р=0,000), а также умеренная между показателями индуцированного ИФН- сRv2660c и Ag85a (и.с.) (по Спирмену, r=0,58, р=0,000), и CFP32B (и.с.) (поСпирмену, r=0,69, р=0,000). Полученные результаты подтвердили роль белкаRv2660c в качестве антигена, связанного с ранним этапом развития туберкулезнойинфекции.По результатам исследования получили референсные значения для Rv2660c,так, показатель и.с.≤2,0 оценили как отрицательный результат (<160 пг/мл), и.с.выше 2,0 – как положительный.Таким образом, результаты наших исследований впервые позволили белокRv2660c рассматривать в качестве маркера ЛТИ на этапе РППТИ и его высокуюзначимость для дифференцальной диагностики.1356.6.
Комплексная оценка специфических белков на разных этапах развитиятуберкулезной инфекции у детейКомплексная оценка специфических белков позволила рассматривать вкладкаждого антигена и его значимость на разных стадиях развития туберкулезнойинфекции у детей. По результатам проведенного дисперсионного (кластерного)анализа по стандартизованным показателям и.с. индуцированного ИФН-специфическими антигенами выделили 3 кластера (рисунок 6.11).стандартизованные показатели и.с.
индуцированного ИФН-4,54,03,53,02,52,01,51,00,50,0-0,5-1,0-1,5-2,0ППД -ЛRv 2660cCFP32B85aESAT6ЕSAT6-CFP10Кластер 1Кластер 2Кластер 3специфические антигеныРисунок 6.11 – Кластерный анализ по стандартизованным показателям и.с.индуцированного ИФН- специфическими антигенами у детейДисперсионный анализ показал, что все антигены вносили значимый вкладпри развитии туберкулезной инфекции: ЕSAT6-CFP10 (F=228,005; р=0,000),CFP32B (F=120,464; р=0,000), Ag85а (F=115,828; р=0,000), ESAT6 (F=114,893;р=0,000), Rv2660c (F=96,181; р=0,000), ППД-Л (F=45,376; р=0,000). Прикластеризации было выделено 3 варианта специфического иммунного ответа.Первый вариант (кластер 1) характеризовался выраженным ответом на ППД-Л иЕSAT6-CFP10, а также слабовыраженным иммунным ответом на белки раннейстадии туберкулезной инфекции (CFP32B, Rv2660c, ESAT6, 85а).
Второй вариант(кластер 2) характеризовался отсутствием иммунного ответа на стимуляцию136антигенами. Третий вариант (кластер 3) характеризовался выраженным ответомна CFP32B, Rv2660c, ESAT6, 85а, слабовыраженным на ППД-Л и отсутствиемиммунного ответа на гибридный белок.Среди детей из группы «ТБ» на стадии активной инфекции основнойиммунный ответ регистрировали на стимуляцию ППД-Л и ЕSAT6-CFP10(рисунок 6.12), что соответствовало первому варианту иммунного ответа (кластер1, рисунок 6.11).40уровень индуцированного ИФН- , и.с.35302520151050-5ППД-ЛRv2660cCFP32BESAT685aЕSAT6-CFP10Средств о±SE±1,96*SEспецифические антигеныРисунок 6.12 – Уровень индуцированного ИФН- специфическими антигенами удетей группы «ТБ» (и.с.)При ранжировании показателей индуцированного ИФН- специфическимиантигенами в группе «ТБ» установили высокозначимые различия (р<0,000001).Для туберкулина и гибридного белка было установлено наибольшее значениесреднего ранга R 5,945 и R 4,573.
Среди белков ранней стадии туберкулезнойинфекции значение среднего ранга для Rv2660c установили на уровне R 3,216;ESAT6 – R 2,624; CFP32B – R 2,413 и 85а – R 2,229.Для уточнения возможных вариантов иммунного ответа при развитиитуберкулеза у детей дополнительно провели кластерный анализ в группе «ТБ».137При проведении кластерного анализа по результатам оценки индуцированногоИФН- специфическими антигенами в группе «ТБ» было выделено 3 вариантастандартизованные показатели индуцированного ИФН-, и.с.иммунного ответа (рисунок 6.13).3,02,52,01,51,00,50,0-0,5-1,0-1,5ТБCFP32BППД-ЛESAT6Rv2660cЕSAT6-CFP1085aКлас тер 1Клас тер 2Клас тер 3с пецифичес кие антигеныРисунок 6.13 – Кластерный анализ по стандартизованным показателям и.с.индуцированного ИФН- специфическими антигенами у детей группы «ТБ»Первые два кластера (варианта иммунного ответа) сформированы порезультатам оценки индуцированного ИФН- специфическими антигенами удетей, больных первичными формами ТБ (ТВЛУ, ПТК), третий кластер (вариант)– при формировании вторичных форм заболевания (ИТЛ).Среди детей с ТБ первичного генеза было выделено два вариантаспецифического клеточного иммунного ответа: кластер 1 с выраженным ответом,кластер 2 с низким ответом после стимуляции специфическими антигенами.Кластер 2 и 3 имели равные значения, что позволило считать низкие значенияпоказателей при развитии ТБ риском неблагоприятного течения заболевания(коэффициент риска 1,73; 95% ДИ 1,059 – 2,828).Среди детей из группы «ЛТИ» основное значение имели результаты приоценке ИФН- после стимуляции ППД-Л и белками ранней стадии туберкулезной138инфекции – CFP32B, Rv2660c, ESAT6, 85а (рисунок 6.14), – что соответствовалотретьему варианту иммунного ответа (кластер 3, рисунок 6.11).16уровень индуцированного ИФН- , и.с.14121086420-2ППД -ЛRv 2660cCFP32BESAT685aЕSAT6-CFP10Средств о±SE±1,96*SEспецифические антигеныРисунок 6.14 – Уровень индуцированного ИФН- специфическими антигенами удетей группы «ЛТИ» (и.с.)При ранжировании показателей индуцированного ИФН- специфическимиантигенами в группе «ЛТИ» установили высокозначимые различия (р<0,000001).Для ППД-Л было установлено наибольшее значение среднего ранга R 5,667.Среди белков ранней стадии туберкулезной инфекции значение среднего рангадля Rv2660c установили на уровне R 3,984; ESAT6 – R 3,411; CFP32B – R 3,016,85а – R 2,958 и гибридного белка R 1,964.Для уточнения возможных вариантов иммунного ответа при развитии ЛТИдополнительно провели кластерный анализ.
При проведении кластерного анализапо результатам оценки индуцированного ИФН- специфическими антигенами вгруппе «ЛТИ» было выделено сначала 2 варианта-кластера (с учетом групп ЛТИ –РППТИ и Т) (рисунок 6.15), затем 3 варианта иммунного ответа-кластера(рисунок 6.16).3,02,52,01,51,00,50,0-0,5-1,0ЕSAT6-CFP1085aESAT6Rv2660cCFP32B-2,0ППД-Л-1,5ЛТИстандартизованные показатели индуцированного ИФН-, и.с.139Кластер 1- ТКластер 2- РППТИспецифические антигеныРисунок 6.15 – Кластерный анализ по стандартизованным показателям и.с.индуцированного ИФН- специфическими антигенами у детей группы «ЛТИ» свыделением двух кластеровстандартизованные показатели индуцированного ИФН-, и.с.14121086420-2-4ППД -ЛRv 2660cCFP32B85aESAT6ЕSAT6-CFP10Кластер 1Кластер 2Кластер 3специфические антигеныРисунок 6.16 – Кластерный анализ по стандартизованным показателям и.с.индуцированного ИФН- специфическими антигенами у детей группы «ЛТИ» свыделением трех кластеров140Первые два кластера (рисунок 6.16) сформированы по результатам оценкииндуцированного ИФН- специфическими антигенами у детей в РППТИ, третийкластер – при инфицировании МБТ более года.Среди детей в РППТИ было выделено два варианта специфическогоклеточного иммунного ответа: кластер 1 с выраженным ответом на белки раннейстадии туберкулезной инфекции и отсутствием ответа при стимуляциигибридным белком, кластер 2 – снижение выраженности ответа на белки раннейстадии туберкулезной инфекции и выраженный ответ на ЕSAT6-CFP10, приравных значениях на туберкулин.
Значения кластера 2 соответствовало кластеру 1(рисунок 6.13), что позволило данный вариант иммунного ответа у детей с ЛТИрассматривать в качестве высокого риска развития ТБ (коэффициент риска 4,047;95% ДИ 2,797 – 5,856). Значения кластера 3 (отсутствие иммунного ответа у ранееинфицированных МБТ) позволили говорить о дормантном состоянии МБТ уранее инфицированных.Таким образом, при ЛТИ значимыми являлись показатели оценкииммунного ответа на белки ранней стадии ее развития в РППТИ, а регистрациявыраженного иммунного ответа на гибридный белок среди данной категориипациентов позволяла выделить группу высокого риска по ТБ.Среди детей группы «НТ» результаты не имели значимого ответа (рисунок6.17).3,5уровень индуцированного ИФН-, и.с.3,02,52,01,51,00,50,0-0,5-1,0ППД-ЛRv2660cCFP32BESAT685aЕSAT6-CFP10Средство±SE±1,96*SEспецифические антигеныРисунок 6.17 – Уровень продукции индуцированного ИФН- специфическимиантигенами у детей группы «НТ» (и.с.)141Припроведениикластерногоанализапорезультатамоценкииндуцированного ИФН- специфическими антигенами в группе «НТ» былостандартизованные показатели индуцированного ИФН- , и.с.выделено 3 варианта иммунного ответа (рисунок 6.18).76543210-1-2-3ППД-ЛRv2660cCFP32B85aЕSAT6-CFP10ESAT6Кластер 1Кластер 2Кластер 3специфические антигеныРисунок 6.18 – Кластерный анализ по стандартизованным показателям и.с.индуцированного ИФН- специфическими антигенами у детей группы «НТ»Так как среди детей группы «НТ» были пациенты с ПВА (дети раннеговозраста) и не инфицированные МБТ по результатам туберкулинодиагностики (сПТА), кластеризация позволила уточнить возможные варианты иммунного ответапристимуляцииспецифическимиантигенами.Прикластеризациистандартизованных показателей и.с.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
