Диссертация (1139658), страница 20
Текст из файла (страница 20)
≤ 1,0 оценили как отрицательный результат (< 90 пг/мл),выше 1,0 – как положительный), оценили частоту положительных результатов висследуемых группах.Порезультатамнашегоисследования,содинаковойчастотойрегистрировали положительные результаты среди детей групп «ЛТИ» (148;94,9%) и «ТБ» (107; 97,3%) (р=0,621), чуть реже – среди лиц группы «ПВА» (18;85,7%).114Таким образом, нами установлено, что в современных условиях может бытьзначимо применение ППД-Л в качестве индуктора (митогена) для общей оценкиуровня выраженности специфического иммунного ответа, при этом возможнытрудности в правильной интерпретации полученных результатов, учитываячастоту встречаемости положительных результатов у лиц с ПВА за счетперекрестной реактивности между МБТ и БЦЖ [480].
Дифференцированныйподход в оценке отдельных специфических белков, по нашему мнению, вдальнейшемпозволитвыбратьнаиболеезначимыедлядиагностикитуберкулезной инфекции на разных стадиях ее развития.6.2. Оценка уровня индуцированного ИФН- с ESAT6-CFP10 и егозначимость при развитии туберкулезной инфекции у детейПерспективными для диагностики туберкулезной инфекции, по оценкемногих исследователей, являются низкомолекулярные секретируемые белкиCFP10 и ESAT6 [206; 290; 332; 344; 418; 480], оба кодируются по регионамразности 1 (RD1), которые присутствуют в M. tuberculosis и M.
bovis, но которыеотсутствуют в M. bovis BCG. Важность этих рекомбинантных антигенов состоит вспособности к иммунному распознаванию с помощью Т-клеток, специфичных длятуберкулезной инфекции. Они являются основными компонентами новыхдиагностическихтестовипредназначеныдляобнаруженияскрытойтуберкулезной инфекции у людей [211]. Мы также в своих исследованияхпровели оценку гибридного белка ЕSAT6-CFP10 в качестве индуктора ИФН-.Уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (пг/мл) у детей исследуемыхгрупп представлен в таблице 6.3.115Таблица 6.3 – Уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (пг/мл) у детейисследуемых группКритерийКритерийКритерийГруппыnМанна-Уитни Манна-Уитни Манна-Уитни(U), р1(U), р2(U), р3U=14479;U=444,5;ТБ*110501,7103,0:915,0р=0,000р<0,0001U=14479;U=2793;ЛТИ*15675,09,1:39,0р=0,000р=0,059U=444,5;U=2793;НТ*4417,87,6:16,9р<0,0001р=0,059Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; ЛТИ – группа с латентнойтуберкулезной инфекцией; НТ – группа не инфицированных МБТ.1- Различия между группой ТБ и группами ЛТИ, НТ,2- Различия между группой ЛТИ и группами ТБ, НТ,3- Различия между группой НТ и группами ТБ, ЛТИ.ИФН- с ЕSAT6-CFP10(пг/мл)MEQ25%:Q75%Анализ результатов исследования показал, что среди детей группы «ТБ»уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (пг/мл) статистически значимоотличался от показателей детей группы «ЛТИ» (р=0,000) и «НТ» (р<0,0001), этопозволило нам утверждать, что выраженный иммунный ответ на гибридный белоксвидетельствовал об активности туберкулезной инфекции.
Не было установленозначимых различий в группах «ЛТИ» и «НТ», что снижало значимость антигенадля дифференциальной диагностики ЛТИ.При сравнении уровня и.с. индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 вгруппах «ТБ» (и.с.=7,3±0,8; Q25%:Q75% 1,4:9,8), «ЛТИ» (и.с.=0,9±0,2; Q25%:Q75%0,2:0,4) и «НТ» (и.с.=0,3±0,04; Q25%:Q75% 0,2:0,3) установили значимые различияпоказателей этих групп (Н=121,5; р=0,000).Сопоставляя показатели (и.с.) индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 удетей, больных ТБ, в зависимости от форм заболевания, установили достоверныеразличия(U=719;р=0,023),так,удетейгруппы«ТБ1»продукцияиндуцированного цитокина регистрировалась на уровне 8,1±0,9 (n=86, Q25%:Q75%2,2:11,4), показатель детей группы «ТБ2» был на уровне 4,3±1,1 (n=24, Q25%:Q75%0,55:6,8) (рисунок 6.3).1161110уровень ИФН-Y с ЕSAT6-CFP10, и.с.*987654321ТБ1ТБ2Средс тво±SE±1,96*SEгруппы с равнения**Рисунок 6.3 – Уровень индуцированного ИФН- c ЕSAT6-CFP10 у детей,больных туберкулезом (и.с.)Примечание: * р=0,023 (критерий Манна-Уитни)**ТБ1 – группа детей с первичными формами туберкулеза; ТБ2 – группа детей свторичными формами туберкулезаПолученные результаты позволили нам говорить о снижении выраженностиспецифического иммунного ответа (связанного с гибридным белком ЕSAT6CFP10) при развитии вторичных форм ТБ у детей.Сравнивая уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 у детейгруппы «ТБ1» в фазе инфильтрации (n=57, 6,7±1,1; Q25%:Q75% 1,4:7,2) и в фазекальцинации (n=29, 10,9±1,6; Q25%:Q75% 3,5:18,7), были установлены достоверныеразличия (U=1098; р=0,013), что свидетельствовало, с одной стороны, овосстановлении клеточного ответа, с другой, – о сохранении активностиинфекции.Результаты индекса стимуляции индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 вгруппах сравнения представлены на рисунке 6.4 (Н=125,6; р=0,000).117109*уровень ИФН- Y c ЕSAT6-CFP10, и.с.876543210Средство±SE±1,96*SE-1ТБРППТИТПВАподгруппы сравненияПТА**Рисунок 6.4 – Уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 у детей вгруппах сравнения (и.с.)Примечание: * р=0,000 (критерий Краскела-Уоллиса)**группы сравнения: ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ– группа детей в раннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группаинфицированных МБТ более года; ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группас положительной туберкулиновой анергией.Полученные результаты в группах сравнения потребовали уточнениядостоверности различий между группами (таблица 6.4).Таблица 6.4 – Уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (и.с.) у детейгрупп сравненияГруппыnИФН- с ЕSAT6-CFP10(и.с.)ME±Q25%:Q75%SEMТБ*1107,3±0,81,4:9,8РППТИ*751,2±0,40,2:1,0Т*810,6±0,20,2:0,3ПВА*210,4±0,070,2:0,3ПТА*230,2±0,020,2:0,2КритерийМанна-Уитни(U), р1КритерийМанна-Уитни(U), р2КритерийМанна-Уитни(U), р3КритерийМанна-Уитни(U), р4-U=1291,5;р<0,0001U=999,5;р<0,0001U=3542,5;р=0,073U=225;р<0,0001U=687,5;р=0,375U=958,5;р=0,371U=1291,5;р<0,0001U=999,5;р<0,0001U=225;р<0,0001U=186,5;р<0,0001U=3542,5;р=0,073U=687,5;р=0,375U=638;р=0,060U=958,5;р=0,371U=907,5;р=0,851U=294;р=0,217Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; РППТИ – группа детей враннем периоде первичной туберкулезной инфекции; Т – группа инфицированных МБТ болеегода; ПВА – группа с поствакцинальной аллергией; ПТА – группа с положительнойтуберкулиновой анергией.1181234-Различия между группой ТБ и группами РППТИ, Т, ПВА и ПТА,Различия между группой РППТИ и группами ТБ, Т, ПВА и ПТА,Различия между группой Т и группами ТБ, РППТИ, ПВА и ПТА,Различия между группой ПВА и группами ТБ, РППТИ, Т и ПТАТак, показатель у детей группы «ТБ» был достоверно выше, чем в группахсравнения.
У детей групп «РППТИ», «Т», «ПВА» и «ПТА» показатели значимо неразличались,чтоснижалозначимостьантигенадлядифференциальнойдиагностики туберкулезной инфекции. Сравнивая выраженность иммунногоответа на разных стадиях туберкулезной инфекции, полученные результатыуровня индуцированного ИФН- с ЕSAT6-CFP10 (и.с.) позволили нам говорить означимости гибридного белка на этапе активной туберкулезной инфекции.Установленные референсные значения уровня ИФН- для ЕSAT6-CFP10(и.с. ≤ 1,0 оценили как отрицательный результат (<100 пг/мл), выше 1,0 – какположительный) позволили оценить частоту положительных результатов висследуемых группах.Анализируя частоту положительных результатов ИФН- после стимуляцииЕSAT6-CFP10 установили, что чаще они регистрировались у детей группы «ТБ»(87; 79,1%), чем у детей группы «ЛТИ» (24; 15,4%) (р<0,0001).
Среди детейгруппы «НТ» положительные результаты не регистрировались.Таким образом, результаты оценки гибридного белка ЕSAT6-CFP10позволили нам рассматривать его в качестве маркера активной туберкулезнойинфекции, преимущественно на стадии развития заболевания или высокого рискатуберкулеза.6.3. Оценка уровня индуцированного ИФН- белками ранней стадиитуберкулезной инфекции (ESAT6, 85а) и их значимость при развитииспецифического процесса у детейСреди ранее изученных специфических белков МБТ в настоящее время длядальнейшего исследования представляют интерес два: ESAT6 и 85а.119Так, среди факторов, оказывающих непосредственное воздействие наорганизм хозяина для подавления защитных механизмов, рассматривается белокESAT6.
При этом результаты исследований по данному антигену весьмапротиворечивы [202; 381; 387], с одной стороны, его можно было бырассматривать в качестве маркера латентной туберкулезной инфекции [234], сдругой – маркером активного специфического процесса [387].Учитывая полученные противоречивые данные о ESAT6 при развитиитуберкулезной инфекции, мы провели исследование среди детей с разнойстепенью выраженности туберкулезной инфекции.
Оценивая уровень ИФН-после индукции ESAT6 (пг/мл), установили значимые различия в результатахгрупп сравнения: «ТБ», «ЛТИ» и «НТ» (H=14,274; р=0,003) (таблица 6.5).Таблица 6.5 – Уровень индуцированного ИФН- с ЕSAT6 (пг/мл) у детейисследуемых группКритерийКритерийКритерийМанна-Уитни Манна-Уитни Манна-УитниMEQ25%:Q75%(U), р1(U), р2(U), р3U=7029;U=1274,5;ТБ*110100,911,4:125,0р=0,019р=0,255U=7029;U=940;ЛТИ*108178,718,0:216,0р=0,019р=0,004U=1274,5;U=940;НТ*2743,010,8:60,0р=0,255р=0,004Примечание: *ТБ – группа с установленным диагнозом туберкулез; ЛТИ – группа с латентнойтуберкулезной инфекцией; НТ – группа не инфицированных МБТ.1- Различия между группой ТБ и группами ЛТИ, НТ,2- Различия между группой ЛТИ и группами ТБ, НТ,3- Различия между группой НТ и группами ТБ, ЛТИ.ГруппыИФН- с ЕSAT6 (пг/мл)nТак, среди детей группы «ТБ» уровень индуцированного ИФН- (пг/мл) былниже и статистически значимо отличался от показателей детей группы «ЛТИ»(р=0,019). Не было установлено различий в показателях у детей из групп «НТ» и«ТБ» (р=0,255).При определении уровня и.с.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
