Диссертация (1174231), страница 15
Текст из файла (страница 15)
39).92Контроль0,1 ммоль/л хлорида лития0,2 ммоль/л хлорида лития0,5 ммоль/л хлорида лития1,0 ммоль/л хлорида литияРисунок 39 — Выживаемость культур нейронов при различных концентрацияххлорида лития и в контроле. Эмпирические функции распределениязначений выживаемости нейронов при различных концентрациях хлорида литиябез добавления глутаматаЗначения, характеризующие действие хлорида лития на культивированныезернистые нейроны мозжечка без воздействия глутамата, приведены в табл.
9.На фоне добавления различных концентраций хлорида лития в исследуемыхкультурах значимых изменений нами выявлено не было (p > 0,05). Так, медианавыживаемости в контроле составила 99,36 (q25% = 90,3, q75% = 114,1), в культуре с добавлением хлорида лития в концентрации 0,1 ммоль/л — 94,61(q25% = 83,8, q75% = 109, p = 0,77), при добавлении хлорида лития в концентрации 0,2 ммоль/л — 103,4 (q25% = 85,23, q75% = 116,9, p = 0,43), при добавлениихлорида лития в концентрации 0,5 ммоль/л — 104,6 (q25% = 89,48, q75% = 120,3,p > 0,05), при добавлении хлорида лития в концентрации 1,0 ммоль/л — 89,42(q25% = 79,33, q75% = 115,7, p = 0,51).Приведены примеры фотографий фиксированных культур нейронов, наблюдаемых при добавлении в культуру различных концентраций различныхконцентраций хлорида лития (рис.
40).93Таблица 9 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии хлорида лития на культивированные зернистые нейроны мозжечкаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение54,7168,3855,7161,9561,431-й квартиль, 25 %90,383,885,2389,4879,33Медиана99,3694,61103,4104,689,423-й квартиль, 75 %114,1109116,9120,3115,7Максимальное значение138,6164,3152,9161,9192,916,7321,8721,3622,0226,33Стандартная ошибка2,4943,2613,1843,2823,925Нижняя граница ДИ94,9792,2296,7297,6390,1Верхняя граница ДИ105105,4109,6110,9105,9СреднеквадратическоеотклонениеПримечание.
Отличий между группами не выявлено (р > 0,05) в соответствии с t-критерием.абгвдРисунок 40 — Зернистые нейроны мозжечка крыс в контроле (а)и после культивации с хлоридом лития в течение 5 суток в концентрации0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в), 0,5 ммоль/л (г), 1,0 ммоль/л (д). Стрелкамиуказаны интактные культивированные зернистые нейроны.Масштабный отрезок 15 мкм94В исследованном диапазоне концентраций (0,1; 0,2; 0,5 и 1 ммоль/л) хлорид лития не обладает токсическим действием, не влияя на выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без воздействия глутамата.Влияние аскорбата лития на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечка в культуреАнализ эмпирических функций распределения средних чисел выжившихклеток с помощью теста Колмогорова — Смирнова показал, что достоверныхразличий между распределениями чисел клеток при различных концентрацияхаскорбата лития, добавляемого к нейронам без использования глутаматной модели стресса, не установлено (рис.
41). Таким образом, в исследованном диапазоне концентраций аскорбат лития не был токсичен в диапазоне концентрацийот 0,1 до 1,0 ммоль/л для культивированных зернистых нейронов мозжечка.0,1 ммоль/ллития0,2 ммоль/ллития0,5 ммоль/ллития1,0 ммоль/ллитияКонтрольаскорбатааскорбатааскорбатааскорбатаРисунок 41 — Эмпирические функции распределения чиселвыживших нейронов при действии различных концентрациях аскорбата литиябез добавления глутамата95Приведены значения, характеризующие действие аскорбата лития накультивированные зернистые нейроны мозжечка без воздействия глутамата (табл.
10). На фоне добавления различных концентраций аскорбаталития в исследуемых культурах значимых изменений нами выявленоне было (p > 0,05). Так, медиана выживаемости в контроле составила 101,4(q25% = 88,75, q75% = 108,5), в культуре с добавлением аскорбата литияв концентрации 0,1 ммоль/л — 96,93 (q25% = 84,58, q75% = 105,6, p > 0,16),при добавлении аскорбата лития в концентрации 0,2 ммоль/л — 101,9(q25% = 88,24, q75% = 111,2, p > 0,81), при добавлении аскорбата лития в концентрации 0,5 ммоль/л — 97,5 (q25% = 85,34, q75% = 107, p = 0,21), при добавлении аскорбата лития в концентрации 1,0 ммоль/л — 92,99 (q25% = 76,43,q75% = 102,9, p > 0,37).Таблица 10 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии хлорида лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/л70,42676160,48311-й квартиль, 25 %88,5584,5888,2485,3476,43Медиана101,496,93101,997,592,993-й квартиль, 75 %108,5105,6111,2107102,9129,2122142,4134,6135,814,3513,4216,3216,3423,69Стандартная ошибка1,85222,4332,4353,058Нижняя граница ДИ96,3591,5895,8990,8881,03Верхняя граница ДИ103,899,65105,7100,793,26ЗначенияМинимальноезначениеМаксимальноезначениеСреднеквадратическоеотклонениеКонтрольПримечание.
Отличий между группами не выявлено (р > 0,05) в соответствии с t-критерием.96Вышеуказанные результаты иллюстрируются отдельными примерами фиксированных культур нейронов в контроле и после культивации с аскорбатом лития без воздействия глутамата (рис. 42).абгвдРисунок 42 — Зернистые нейроны мозжечка крыс в контроле (а)и после культивации с аскорбатом лития в течение 5 суток в концентрации0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в), 0,5 ммоль/л (г), 1,0 ммоль/л (д). Стрелкамиуказаны интактные культивированные зернистые нейроны.Масштабный отрезок 15 мкмВ исследованном диапазоне концентраций (0,1; 0,2; 0,5 и 1 ммоль/л) аскорбат лития не обладает токсическим действием, не влияя на выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без воздействия глутамата.Влияние цитрата лития на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечкаПроведение анализа эмпирических функций распределения средних чиселвыживших клеток посредством теста Колмогорова — Смирнова показал, чтодостоверных различий между распределениями чисел клеток при различных97концентрациях цитрата лития, добавляемого к нейронам без использования глутаматной модели стресса, не установлено (рис.
43). Эксперименты на культивированных зернистых нейронах мозжечка показали, что в семисуточных культурах в отсутствии глутамата при действии цитратом лития выживаемость нейронов не изменяется по сравнению с контролем.0,1 ммоль/ллития0,2 ммоль/ллития0,5 ммоль/ллития1,0 ммоль/ллитияКонтрольцитратацитратацитратацитратаРисунок 43 — Обобщение проведенных экспериментов: эмпирические функциираспределения значений выживаемости нейронов при различных концентрацияхцитрата литияПриведены значения, характеризующие действие цитрата лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка без воздействия глутамата (табл.
11).На фоне добавления различных концентраций цитрата лития в исследуемыхкультурах значимых изменений нами выявлено не было (p > 0,05). Так, медианавыживаемости в контроле составила 100,9 (q25% = 95,68, q75% = 108,3), в культуре с добавлением цитрата лития в концентрации 0,1 ммоль/л — 100,1(q25% = 90,84, q75% = 107,2, p > 0,1), при добавлении цитрата лития в концентрации 0,2 ммоль/л — 99,67 (q25% = 91,23, q75% = 104,7, p > 0,5), при добавлении цитрата лития в концентрации 0,5 ммоль/л — 99,67 (q25% = 89,4, q75% =106,1; p > 0,1), при добавлении цитрата лития в концентрации 1,0 ммоль/л —99,19 (q25% = 94,35, q75% = 106,9, p > 0,5). Описанные выше результаты иллю-98стрируются отдельными примерами фиксированных культур нейронов в контроле и после культивации с цитратом лития без воздействия глутамата (рис.
44).Таблица 11 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии цитрата лития на культивированные зернистые нейроны мозжечкаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение54,3665,3372,3168,9575,821-й квартиль, 25 %95,6890,8491,2389,494,35Медиана100,9100,199,6799,6799,193-й квартиль, 75 %108,3107,2104,7106,1106,9Максимальное значение114,9128,3124,7128,9124,710,8813,2211,7213,229,897Стандартная ошибка1,6211,971,7471,9711,475Нижняя граница ДИ96,7494,4895,4794,5597,33Верхняя граница ДИ103,3102,4102,5102,5103,3СреднеквадратическоеотклонениеабгвдРисунок 44 — Зернистые нейроны мозжечка крыс в контроле (а) и после культивациис цитратом лития в течение 5 суток в концентрации 0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в),0,5 ммоль/л (г), 1,0 ммоль/л (д). Стрелками указаны интактные культивированныезернистые нейроны.
Масштабный отрезок 15 мкм99В исследованном диапазоне концентраций (0,1; 0,2; 0,5 и 1 ммоль/л) цитратлития не обладает токсическим действием, не влияя на выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без воздействия глутамата.Влияние цитрата натрия на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечка в культуреВ соответствии с анализом эмпирических функций распределения методомКолмогорова — Смирнова, добавление цитрата натрия в концентрациях0,5 и 1,0 ммоль/л достоверно снижало выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка, добавляемого к нейронам без использования глутаматной модели стресса (p < 0,05), другие концентрации — 0,1 и 0,2 ммоль/л —не приводили к достоверным отличиям выживаемости (рис.
45).Контроль0,1 ммоль/лнатрия0,2 ммоль/лнатрия0,5 ммоль/лнатрия1,0 ммоль/лнатрияцитратацитратацитратацитратаРисунок 45 — Обобщение проведенных экспериментов: эмпирические функциираспределения значений выживаемости нейронов при различных концентрацияхцитрата натрия100Приведены значения, характеризующие действие цитрата натрия на культивированныезернистыенейронымозжечкабезвоздействияглутамата(табл. 12). На фоне добавления различных концентраций цитрата натрия в исследуемых культурах нами было выявлено достоверное изменение выживаемостиКЗН в концентрациях 0,5 и 1,0 мМ (p < 0,05).
Так, при добавлении цитрата натрия в концентрации 0,5 ммоль/л медиана составила 85,18 (q25% = 75,75,q75% = 108,3; p < 0,05), при добавлении цитрата натрия в концентрации1,0 ммоль/л — 80,95 (q25% = 73,47, q75% = 101,1, p < 0,001).Таблица 12 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии цитрата натрия на культивированные зернистые нейроны мозжечкаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение68,2763,7253,9757,8756,571-й квартиль, 25 %87,4582,5782,2575,7573,47Медиана100,188,4394,2885,18*80,95*3-й квартиль, 75 %111,2110,5109,9108,3101,1Максимальное значение140,4146,3133,9135,2128,118,1420,1617,7819,2318,52Стандартная ошибка2,7053,0052,6512,8662,928Нижняя граница ДИ94,5291,4689,8285,3280,24Верхняя граница ДИ105,4103,6100,596,8892,09Среднеквадратическоеотклонение* Отличия выявлены при добавлении цитрата натрия в концентрациях 0,5 и 1,0 ммоль/л(р < 0,05) в соответствии с t-критерием.Вышеуказанные результаты иллюстрируется отдельными примерами фиксированных культур нейронов в контроле и после культивации в течение 5 суток с цитратом натрия без воздействия глутамата.
Прослежено снижение количества КЗН мозжечка при добавлении цитрата натрия в концентрациях 0,5 и 1,0 мМ (рис. 46, г, д).101абвдгРисунок 46 — Зернистые нейроны мозжечка крыс в контроле (а)и после культивации с цитратом натрия в течение 5 суток в концентрации0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в), 0,5 ммоль/л (г), 1,0 ммоль/л (д). Стрелкамиуказаны интактные культивированные зернистые нейроны.Масштабный отрезок 15 мкмВ указанном диапазоне концентраций (0,5 и 1 ммоль/л) цитрат натрия достоверно снижает выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка в отсутствии глутамата (p < 0,05).Влияние аскорбата натрия на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечка в культуреВ соответствии с анализом эмпирических функций распределения методом Колмогорова — Смирнова добавление аскорбата натрия не снижало выживаемость КЗН мозжечка без использования глутаматной модели стресса(рис.
47).102Контроль0,1 ммоль/лнатрия0,2 ммоль/лнатрия0,5 ммоль/лнатрия1,0 ммоль/лнатрияаскорбатааскорбатааскорбатааскорбатаРисунок 47 — Обобщение проведенных экспериментов: эмпирические функциираспределения значений выживаемости нейронов при различных концентрацияхаскорбата натрияПриведены значения, характеризующие действие аскорбата натрия накультивированные зернистые нейроны мозжечка без воздействия глутамата(табл. 13). На фоне добавления различных концентраций аскорбата натрияв исследуемых культурах значимых изменений нами выявлено не было(p > 0,05). Так, медиана выживаемости в контроле составила 99,64 (q25% == 91,65, q75% = 108,2), в культуре с добавлением аскорбата натрия в концентрации 0,1 ммоль/л — 96,57 (q25% = 87,31, q75% = 105,2; p > 0,1), при добавлении аскорбата натрия в концентрации 0,2 ммоль/л — 95,53 (q25% = 87,53,q75% = 103,1; р > 0,05), при добавлении аскорбата лития в концентрации0,5 ммоль/л — 100,2 (q25% = 88,85, q75% = 109,6; p > 0,89), при добавленииаскорбата лития в концентрации 1,0 ммоль/л — 98,37 (q25% = 90,73, q75% =105,2; p > 0,5).Вышеуказанные результаты иллюстрируется отдельными примерамификсированных культур нейронов в контроле и после культивации в течениепяти суток с цитратом натрия без воздействия глутамата (рис.