Диссертация (1174231), страница 17
Текст из файла (страница 17)
56).112абвгдеРисунок 56 — Культивированные зернистые нейроны мозжечка крыс в контролепосле воздействия глутамата (а) и после культивации с хлоридом литияв глутаматной модели стресса в концентрации 0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в),0,5 ммоль/л (г), 1 ммоль/л (д), в контроле (е). Стрелками указаны интактныекультивированные зернистые нейроны. Масштабный отрезок 15 мкмПри цитотоксическом действии глутамата хлорид лития не имел достоверного влияния (p > 0,05) на выживаемость, незначительно снижая выживаемостьпо сравнению с глутаматом.
В условиях глутаматной токсичности хлорид литияв концентрации 0,5 ммоль/л снижал выживаемость КЗН на уровне статистической достоверности p = 0,13.Влияние аскорбата лития на выживаемость культивированных зернистыхнейронов мозжечка в условиях глутаматного стрессаПри цитотоксическом действии глутамата в концентрации 100 мкмоль/ласкорбат лития в указанном диапазоне концентраций оказывал выраженный нейропротекторный эффект. Результаты анализа функций распределения среднихчисел выживших нейронов при концентрациях аскорбата лития 0,2; 0,5113и 1,0 ммоль/л показали достоверное отличие от результатов, полученных придействии глутамата без добавления соли лития (рис.
57). При повышении концентрации соли лития выраженность отличий возрастала (значения р снижались), а при самой высокой (1,0 мМ) отличия между глутаматной токсичностьюи интактным контролем были на грани статистической значимости (р < 0,00001).Таким образом, аскорбат лития во всём исследованном диапазоне концентраций(0,2–1,0 мМ) достоверно повышал выживаемость нейронов при глутаматномстрессе.0,1 ммоль/ласкорбата лития0,2 ммоль/ласкорбата лития0,5 ммоль/ласкорбата лития1,0 ммоль/ласкорбата литияКонтрольРисунок 57 — Нейропротекторный эффект аскорбата литияпри цитотоксическом действии глутамата 100 мкмоль/л на культивированныезернистые нейроны мозжечкаЗначения, характеризующие действие аскорбата лития на КЗН мозжечкапри воздействии глутамата, приведены в табл. 16.
Рассчитаны следующие статистические показатели: медиана, стандартное отклонение (среднеквадратическоеотклонение), нижний и верхний квартили, минимум, максимум, и уровень надежности результатов (границы доверительного интервала средних). При добав-114лении аскорбата лития и глутамата в концентрации 0,2 ммоль/л медианасоставила 68,46 (q25% = 43,43, q75% = 84,52, p < 0,001), в концентрации0,5 ммоль/л — 79,85 (q25% = 34,45, q75% = 92,09, p < 0,0001), в концентрации1,0 ммоль/л — 82,84 (q25% = 40,75, q75% = 94,86, p < 0,0001).Таблица 16 — Основные статистические показатели при воздействии аскорбаталития на культивированные зернистые нейроны мозжечка в условиях глутаматного стресса0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/л19,948,7231714101-й квартиль, 25 %41,4229,4543,4334,4540,75Медиана52,848,0368,46*79,85*82,84*3-й квартиль, 75 %71,1986,7184,5292,0994,86112,2127,7137,1115,3116,820,4131,728,5631,8532,42Стандартная ошибка2,6354,0923,6874,1124,186Нижняя граница ДИ51,0349,2658,8758,8461,54Верхняя граница ДИ61,5865,6473,6375,378,29ЗначенияМинимальноезначениеМаксимальноезначениеСреднеквадратическоеотклонениеКонтроль* Отличия между группами (р < 0,05 по сравнению с контролем) в соответствии с t-критерием.Описанные выше результаты иллюстрируются отдельными примерамификсированных культур нейронов в контроле после воздействия глутамата и после культивации с аскорбатом лития в глутаматной модели стресса.
Мы видимзначительное увеличение количества выживших нейронов при добавленииаскорбата лития в концентрациях от 0,2 до 1,0 ммоль/л по сравнению с исходными данными (рис. 58).115абвгдеРисунок 58 — Культивированные зернистые нейроны мозжечка крыс в контролепосле воздействия глутамата (а) и после культивации с аскорбатом натрияв глутаматной модели стресса в концентрации 0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в),0,5 ммоль/л (г), 1 ммоль/л (д), в контроле (е). Стрелками указаны интактныекультивированные зернистые нейроны.В условиях глутаматного стресса аскорбат лития в концентрациях 0,2; 0,5и 1,0 мМ достоверно и дозозависимо повышал выживаемость КЗН мозжечка.Наиболее выраженный нейропротекторный эффект наблюдался при концентрации аскорбата в 1 мМ: выживаемость нейронов повышалась в среднем на 11%(p < 0,001).Влияние цитрата лития на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечкав условиях глутаматного стрессаПри цитотоксическом действии глутамата в концентрации 100 мкмоль/лцитрат лития оказывал выраженный нейропротекторный эффект.
Результатыанализа функций распределения средних чисел выживших нейронов при всех116концентрациях цитрата лития показал достоверное отличие от результатов, полученных при действии глутамата без добавления соли (рис. 59). Добавлениев культуру клеток цитрата лития в концентрации 0,2 ммоль/л приводило к достоверному отличию (р < 0,05). При повышении концентрации соли лития выраженность отличий оставалась достоверной (при использовании концентрации0,5 ммоль/л; р < 0,05).
Таким образом, цитрат лития в исследованном диапазонеконцентраций (0,2–0,5 мМ) достоверно повышал выживаемость нейронов приглутаматном стрессе.0,1 ммоль/лцитрата лития0,2 ммоль/лцитрата лития0,5 ммоль/лцитрата лития1,0 ммоль/лцитрата литияКонтрольРисунок 59 — Обобщение проведенных экспериментов: эмпирические функциираспределения значений выживаемости нейронов при различных концентрацияхцитрата лития в условиях глутаматного стресса при добавлении100 мкмоль глутаматаЗначения, характеризующие действие цитрата лития на КЗН мозжечка привоздействии глутамата приведены в табл.
17. При цитотоксическом действииглутамата цитрат лития в концентрации 0,2 и 0,5 ммоль/л оказывал выраженныйнейропротективный эффект (p < 0,05). При добавлении цитрата лития в концентрации 0,2 ммоль/л и глутамата медиана составила 69,95 (q25% = 39,58,q75% = 85,48, p < 0,05), в концентрации 0,5 ммоль/л и глутамата — 61,44(q25% = 45,87, q75% = 74,1, p < 0,05).117Таблица 17 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии цитрата лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка в условиях глутаматного стрессаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение20,5118,622,8921,4622,891-й квартиль, 25 %34,137,0839,5845,8739,52Медиана54,3749,2769,95*61,44*47,093-й квартиль, 75 %64,1781,2885,4874,166,98Максимальное значение105,9100,3111,589,69102,218,4924,1926,5116,220,18Стандартная ошибка2,7563,6063,9512,4153,009Нижняя граница ДИ45,8650,7857,155,8748,03Верхняя граница ДИ56,9665,3173,0265,660,16Среднеквадратическоеотклонение* Отличия между группами (р < 0,05 по сравнению с контролем) в соответствии с t-критерием.агбдвеРисунок 60 — Культивированные зернистые нейроны мозжечка крыс в контролев условиях глутаматного стресса (а) и после культивации с цитратом литияв течение 5 суток в концентрации 0,1 мМ (б), 0,2 мМ (в), 0,5 мМ (г), 1,0 мМ (д), вконтроле (е).
Стрелками указаны интактные культивированные зернистые нейроны. Масштабный отрезок 15 мкм118Описанные выше результаты иллюстрируются отдельными примерамификсированных культур нейронов в контроле после воздействия глутамата и после культивации с цитратом лития в глутаматной модели стресса (см. рис. 60).Наглядно показано увеличение количества выживших нейронов в концентрациях0,2 и 0,5 ммоль/л (см. рис. 60, в, г).В условиях сильного глутаматного стресса (при 100 мкМ глутаматавыживало в среднем 30% нейронов) наблюдалось дозозависимое возрастаниенейропротекторного эффекта цитрата лития.
Наибольший эффект наблюдался при концентрации 0,5 мМ (повышение выживаемости нейронов на 16%,p < 0,05).Влияние цитрата натрия на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечкав условиях глутаматного стрессаВ условиях глутаматного стресса цитрат натрия в концентрациях 0,1; 0,2и 0,5 ммоль/л не имел достоверного эффекта на выживаемость, а в концентрации1 ммоль/л, приводил к увеличению выживаемости нейронов (в среднем на 25%,p < 0,001 (рис. 61).Значения, характеризующие действие аскорбата натрия на КЗН мозжечкав условиях воздействия глутамата приведены в табл.
18.На фоне добавления различных концентраций цитрата натрия в условиях глутаматного стресса в исследуемых культурах при добавлении цитрата натрия в концентрации 1,0 мМ было выявлено достоверное изменение(p < 0,05). Так, при добавлении цитрата натрия и глутамата в концентрации 1,0 ммоль/л медиана составила 39,66 (q25% = 33,16, q75% = 50,07,p < 0,0001).1190,1 ммоль/лцитрата натрия0,2 ммоль/лцитрата натрия0,5 ммоль/лцитрата натрия1,0 ммоль/лцитрата натрияКонтрольРисунок 61 — Выживаемость культур нейронов при различных концентрацияхцитрата натрия. Эмпирические функции распределения значений выживаемостинейроновТаблица 18 — Основные статистические показатели при воздействии цитратанатрия на культивированные зернистые нейроны мозжечка в условиях глутаматного стрессаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение10,4014,3012,3516,2520,161-й квартиль, 25 %24,7124,3821,4625,3633,16Медиана31,8629,9131,8633,8139,66*3-й квартиль, 75 %37,7138,0446,4941,6150,07Максимальное значение52,6756,5763,0753,3272,1710,5510,3114,159,6612,01Стандартная ошибка1,5721,5372,1101,4411,791Нижняя граница ДИ27,8728,4029,8031,0838,38Верхняя граница ДИ34,2134,6038,3136,8945,60Среднеквадратическоеотклонение* Отличия между группами (р < 0,05 по сравнению с контролем) в соответствии с t-критерием.120Описанные выше результаты иллюстрируются отдельными примерами фотографий фиксированных культур нейронов в контроле после воздействия глутаматаи после культивации с цитратом натрия в глутаматной модели стресса (рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
