Диссертация (1174231), страница 16
Текст из файла (страница 16)
48).103Таблица 13 — Основные статистические показатели при воздействии аскорбатанатрия на культивированные зернистые нейроны мозжечкаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение76,5369,7967,2376,6076,321-й квартиль, 25 %91,6587,3187,5388,8590,73Медиана99,6496,5795,53100,2098,373-й квартиль, 75 %108,20105,20103,10109,60105,20Максимальное значение124,80123,40124,30131,10126,0011,6812,6812,3014,0011,89Стандартная ошибка1,741,891,8342,091,79Нижняя граница ДИ96,4992,7192,0696,1694,89Верхняя граница ДИ103,5100,399,46104,60102,10СреднеквадратическоеотклонениеПримечание.
Отличий между группами не выявлено (р > 0,05) в соответствии с t-критерием.абгвдРисунок 48 — Зернистые нейроны мозжечка крыс в контроле (а)и после культивации с аскорбатом натрия в течение 5 суток в концентрации0,1 ммоль/л (б), 0,2 ммоль/л (в), 0,5 ммоль/л (г), 1,0 ммоль/л (д). Стрелкамиуказаны интактные культивированные зернистые нейроны.Масштабный отрезок 15 мкм104В исследованном диапазоне концентраций (0,1; 0,2; 0,5 и 1 ммоль/л) аскорбат натрия не обладает токсическим действием, не влияя на выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без воздействия глутамата.Сравнительная характеристика действия солей лития и натрияна выживаемость культивированных зернистых нейроновбез воздействия глутаматаРезультаты сравнительной характеристики действия солей лития и натрия навыживаемость КЗН без воздействия глутамата представлены на рис.
49–52. Добавление солей лития (LiCl, Li2CO3, LiAsc, Li3Cit) и натрия (NaAsc, NaCit) в концентрации0,1 ммоль/л не изменяло выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без использования глутаматной модели стресса (p > 0,05) (рис. 49).Рисунок 49 — Сравнение действия различных солей лития(в концентрации 0,1 ммоль/л) на культивированные зернистые нейроныПримечание: NaAsc — аскорбат натрия, NaCit — цитрат натрия, LiAsc — аскорбат лития,Li3Cit — цитрат лития. Статистическая значимость определялась в соответствии с критериемКолмогорова — Смирнова105Добавление солей лития (LiCl, Li2CO3, LiAsc, Li3Cit) и натрия (NaAsc,NaCit) в концентрации 0,2 ммоль/л не изменяло выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без использования глутаматной моделистресса (p > 0,05) (рис.
50).Рисунок 50 — Сравнение действия различных солей лития(в концентрации 0,2 ммоль/л) на культивированные зернистые нейроныПримечание: NaAsc — аскорбат натрия, NaCit — цитрат натрия, LiAsc — аскорбат лития,Li3Cit — цитрат лития. Статистическая значимость определялась в соответствии с критериемКолмогорова — СмирноваДобавление солей лития (LiCl, Li2CO3, LiAsc, Li3Cit) и аскорбата натрия(NaAsc) в концентрации 0,5 ммоль/л не изменяло выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без использования глутаматной моделистресса (p > 0,05).
Добавление цитрата натрия в концентрации 0,5 ммоль/л достоверно снижало выживаемость нейронов по сравнению с контрольной группой(p < 0,05) (рис. 51).106Рисунок 51 — Сравнение действия различных солей лития(в концентрации 0,5 ммоль/л) на культивированные зернистые нейроныПримечание: NaAsc — аскорбат натрия, NaCit — цитрат натрия, LiAsc — аскорбат лития,Li3Cit — цитрат лития. Статистическая значимость определялась в соответствии с критериемКолмогорова — СмирноваРисунок 52 — Сравнение действия различных солей лития(в концентрации 1,0 ммоль/л) на культивированные зернистые нейроныПримечание: NaAsc — аскорбат натрия, NaCit — цитрат натрия, LiAsc — аскорбат лития,Li3Cit — цитрат лития. Статистическая значимость определялась в соответствии с критериемКолмогорова — Смирнова107Добавление солей лития (LiCl, Li2CO3, LiAsc, Li3Cit) и аскорбата натрия(NaAsc) в концентрации 1,0 ммоль/л не изменяло выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка без использования глутаматной моделистресса (p > 0,05).
Добавление же цитрата натрия в концентрации 1,0 ммоль/лдостоверно снижало выживаемость нейронов по сравнению с контрольной группой (p < 0,05) (см. рис. 52).3.2.2. Оценка влияния солей лития на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечкав условиях глутаматного стрессаВлияние карбоната лития на выживаемость культивированныхзернистых нейронов мозжечка в условиях глутаматного стрессаВ условиях глутаматного стресса при добавлении в культуру 100 мкмоль/лглутамата карбонат лития в концентрациях 0,1; 0,2; 0,5 ммоль/л не имел достоверного эффекта на выживаемость, а в концентрации 1,0 ммоль/л, наоборот, приводил к достоверному снижению выживаемости нейронов (в среднем, на 25%,p < 0,001) (рис. 53).Приведены значения, характеризующие действие карбоната лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка при воздействии глутамата(табл. 14).
На фоне добавления различных концентраций карбоната лития приусловии воздействия глутамата в концентрации 100 мкмоль/л в исследуемыхкультурах произошло достоверное снижение выживаемости при добавлении карбоната лития в концентрации 1,0 ммоль/л. Медиана выживаемости при воздействии глутамата составила 68,7 (q25% = 55,87, q75% = 79,32), в культуре с добавлением карбоната лития в концентрации 0,1 ммоль/л — 67,35 (q25% = 53,75,q75% = 75,07; p > 0,8), в концентрации 0,2 ммоль/л — 63,22 (q25% = 51,27,108q75% = 109,3; p > 0,5), в концентрации 0,5 ммоль/л — 64,21 (q25% = 45,62,q75% = 77,26; p > 0,3), в концентрации 1,0 ммоль/л — 45,06 (q25% = 36,42,q75% = 62,09, p < 0,0005).
При добавлении карбоната лития в концентрации1,0 ммоль/л произошло достоверное снижение выживаемости культивированныхзернистых нейронов мозжечка (р < 0,05 по сравнению с контролем) в соответствии с t-критерием.Результаты морфологических исследований представлены в фотографиях,где мы видим снижение количества нейронов мозжечка в глутаматной моделистресса при добавлении карбоната лития в концентрации 1,0 ммоль/л (рис. 54, д).Таким образом, при непосредственном воздействии раствора карбоната лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка в условиях глутаматногостресса в концентрации 1,0 ммоль/л происходит снижение выживаемости культивированных зернистых нейронов мозжечка. Настоящее исследование позволяет утверждать скорее нейротоксический, чем нейропротекторный эффект этойсоли лития.0,1 ммоль/лкарбоната лития0,2 ммоль/лкарбоната лития0,5 ммоль/лкарбоната лития1,0 ммоль/лкарбоната литияКонтрольРисунок 53 — Выживаемость культур нейронов при различных концентрацияхкарбоната лития.
Эмпирические функции распределения значенийвыживаемости нейронов109Таблица 14 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии карбоната лития на культивированные зернистые нейроны мозжечкав условиях глутаматного стрессаЗначенияКонтроль0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/лМинимальное значение35,3634,6532,5330,41291-й квартиль, 25%55,8753,7551,2745,6236,42Медиана68,767,3563,2264,2145,06*3-й квартиль, 75%79,3275,0778,8577,2662,09Максимальное значение87,3584,1689,7193,4890,6514,3213,2615,6817,3616,99Стандартная ошибка2,6142,5062,8633,1693,103Нижняя граница ДИ6159,6758,2156,143,92Верхняя граница ДИ71,6969,9569,9269,0656,61СреднеквадратическоеотклонениеабвгдеРисунок 54 — Культивированные зернистые нейроны мозжечка крыс в контролепосле воздействия глутамата (а), после культивации с карбонатом литияв течение 2 суток в глутаматной модели стресса в концентрации 0,1 ммоль/л (б),0,2 ммоль/л (в), 0,5 ммоль/л (г); 1,0 ммоль/л (д), в контроле (е).
Стрелками указаныинтактные культивированные зернистые нейроны. Масштабный отрезок 15 мкм110Влияние хлорида лития на выживаемостькультивированных зернистых нейронов мозжечкав условиях глутаматного стрессаВ условиях глутаматного стресса при добавлении в культуру 100 мкмоль/лглутамата хлорид лития в концентрациях 0,1–1,0 ммоль/л не имел статистическизначимого влияния на выживаемость (рис. 55). Более того, при глутаматной токсичности хлорид лития в концентрации 0,5 ммоль снижал выживаемость КЗНна уровне статистической значимости p = 0,13.0,1 ммоль/лхлорида лития0,2 ммоль/лхлорида лития0,5 ммоль/лхлорида лития1,0 ммоль/лхлорида литияКонтрольРисунок 55 — Выживаемость культур нейронов при различных концентрацияххлорида лития. Эмпирические функции распределения значений выживаемостинейронов при различных концентрациях хлорида литияЗначения, характеризующие воздействие хлорида лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка при воздействии глутамата, приведены втабл. 15.
При цитотоксическом действии глутамата хлорид лития не имел достоверного эффекта (p > 0,05), незначительно снижая выживаемость КЗН по сравнению с глутаматом.111Таблица 15 — Основные статистические показатели выживаемости при воздействии хлорида лития на культивированные зернистые нейроны мозжечка в условиях глутаматного стресса0,10,20,51,0ммоль/лммоль/лммоль/лммоль/л22,826,2219,3820,5214,821-й квартиль, 25 %46,7351,8641,2336,4333,48Медиана65,4666,6360,255,5258,133-й квартиль, 75 %84,3581,2470,4277,1572,76182,40131,40115,70204,30142,9032,7523,1925,9737,9131,30Стандартная ошибка4,8823,4573,8715,6514,665Нижняя граница ДИ60,1260,2852,6251,7549,05Верхняя граница ДИ79,8074,2168,2374,5367,86ЗначенияГлутаматМинимальноезначениеМаксимальноезначениеСреднеквадратическоеотклонениеПримечание. Отличий между группами не выявлено (р > 0,05) в соответствии с t-критерием.Медиана выживаемости при воздействии глутамата составила 65,46(q25% = 46,73, q75% = 84,35), в культуре с добавлением хлорида лития в концентрации 0,1 ммоль/л и глутамата — 66,63 (q25% = 51,86, q75% = 81,24, p > 0,5),вконцентрации0,2ммоль/лиглутамата—60,2(q25%=41,23,q75% = 70,42, p > 0,1), в концентрации 0,5 ммоль/л и глутамата — 55,52(q25% = 36,43, q75% = 77,15, p > 0,3), в концентрации 1,0 ммоль/л и глутамата —58,13 (q25% = 33,48, q75% = 72,76, p > 0,05).Описанные выше результаты иллюстрируются отдельными примерами фиксированных культур нейронов в контроле после воздействия глутамата и после культивации с хлоридом лития в глутаматной модели стресса(рис.