Диссертация (1174231), страница 19
Текст из файла (страница 19)
Аскорбат лития наиболее стабильно накапливался именно в лобной доле головного мозга, Clast лития составила 40,5 мкг/л. Это было самое высокое значение концентрации через 48 ч средивсех исследованных биосубстратов. Этот вывод подтверждает и значение площади под кривой, которое для лобной доли головного мозга составило 2094мкг/л×ч. Полученные данные показывают, что аскорбат и цитрат лития способствуют поддержанию стабильных концентраций иона лития в крови и в голов-129ном мозге, что важно для осуществления профилактического и терапевтическогопотенциала лития.Второй эксперимент состоял из 2 этапов.
На 1-м зернистые нейроны мозжечка выращивались в течение пяти суток при следующих концентрациях солейлития (LiCl, Li2CO3, LiС6Н7О, Li3C6H5O7) и натрия (Na3C6H5O7, NaC6H7O6): 0,1;0,2; 0,5 и 1,0 мМ. Соли лития и натрия добавляли в среду культивирования навторые сутки in vitro на весь срок культивирования (до 7 суток). На 7-е суткипроизводился подсчет КЗН мозжечка.В результате нами было установлено, что добавление солей лития (LiCl,Li2CO3, LiС6Н7О, Li3C6H5O7) и аскорбата натрия (NaC6H7O6) во всем диапазонеконцентраций (0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 ммоль/л) не изменяло выживаемость КЗН мозжечка, добавляемого к нейронам без использования глутаматной модели стресса(p > 0,05).Добавление же цитрата натрия (Na3C6H5O7) в концентрациях 0,5и 1,0 ммоль/л достоверно снижало выживаемость КЗН мозжечка без использования глутаматной модели стресса (p < 0,05).На 2-м этапе в модели глутаматного стресса зернистые нейроны мозжечкавыращивались в течение 5 суток при заданных концентрациях солей лития (LiCl,Li2CO3, LiС6Н7О, Li3C6H5O7) и натрия (Na3C6H5O7, NaC6H7O6): 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0ммоль/л.
Соли лития и натрия добавляли в среду культивирования на 2-е сутки invitro на весь срок культивирования (до 7 суток). На 6-е сутки осуществлялось добавление в культуру глутамата в концентрации 100 мкМ. На 7-е сутки производился подсчет клеток.В условиях глутаматного стресса при добавлении в культуру 100 мкмоль/лглутамата карбонат лития в концентрациях 0,1; 0,2 и 0,5 ммоль/л не имел достоверного влияния на выживаемость КЗН, а в концентрации 1,0 ммоль/л, наоборот,приводил к достоверному снижению выживаемости нейронов (в среднем на 25%,p < 0,001).При добавлении в культуру хлорид лития в концентрациях 0,1; 0,2; 0,5 и1,0 ммоль/л не имел достоверного влияния на выживаемость КЗН.130Аскорбат лития в модели глутаматного стресса оказывал выраженный нейропротекторный эффект.
Результаты анализа функций распределения среднихчисел выживших нейронов при концентрациях аскорбата лития 0,2; 0,5и 1,0 ммоль/л показали достоверное отличие от результатов, полученных придействии глутамата без добавления соли лития. Таким образом, аскорбат литияв исследованном диапазоне концентраций (0,2; 0,5 и 1,0 ммоль/л) достоверно повышал выживаемость нейронов при глутаматном стрессе.Цитрат лития также оказывал выраженный нейропротекторный эффект.
Результаты анализа функций распределения средних чисел выживших нейроновпри концентрациях цитрата лития 0,2 и 0,5 мМ показал достоверное (р < 0,05)отличие от результатов, полученных при действии глутамата без добавления соли. Следовательно, цитрат лития в исследованном диапазоне концентраций(0,2 и 0,5 ммоль/л) достоверно повышал выживаемость нейронов при глутаматном стрессе.В условиях глутаматного стресса цитрат натрия в концентрациях 0,1; 0,2и 0,5 ммоль/л не имел достоверного влияния на выживаемость, а в концентрации1 ммоль/л приводил к увеличению выживаемости нейронов (в среднем на 25%,p < 0,001).
Важно отметить, что в условиях глутаматного стресса действующиминейропротекторными началами цитрата лития являются и ион лития, и цитратанион. Это подтверждают результаты нейроцитологического исследования эффектов цитрата натрия. Заметим, что ион натрия не способствует повышениювыживания нейронов в условиях глутаматного стресса.При глутаматном стрессе аскорбат натрия в концентрациях 0,2 и 1,0 ммоль/лне имел достоверного влияния на выживаемость, а в концентрации 0,1 и 0,5 ммоль/лприводил к снижению выживаемости нейронов.В целом, полученные результаты позволяют сделать вывод о перспективности использования исследованных органических солей лития в качестве средства для лечения НДЗ головного мозга.131ВЫВОДЫ1.При введении per os крысам однократно цитрата лития в дозе 1 мг/кг отмечается преимущественное накопление лития в крови и головном мозге.2.Аскорбат лития, введенный per os однократно в дозе 1 мг/кг, вызывает увеличение содержания лития в крови, лобной доле головного мозга животных.3.Неорганические соли лития (карбонат, хлорид), органические соли лития(цитрат, аскорбат) при добавлении в культуру зернистых нейронов мозжечка нетоксичны во всем диапазоне концентраций 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мМ.4.Аскорбат натрия при добавлении в культуру зернистых нейронов мозжечканетоксичен во всем диапазоне концентраций 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мМ.
Органическая соль натрия (цитрат натрия) в концентрациях 0,5 и 1,0 мМ достоверноснижала выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка,добавляемого к нейронам без использования глутаматной модели стресса.5.В условиях глутаматного стресса карбонат лития в концентрации 1,0 мМприводил к достоверному снижению выживаемости нейронов, хлорид литияв концентрациях 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мМ не имел достоверного влияния на выживаемость, аскорбат лития на модели глутаматной токсичности оказывалнейропротекторное действие, повышая в концентрациях 0,2; 0,5 и 1,0 мМвыживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка, цитрат лития на модели глутаматной токсичности оказывал нейропротекторное действие, повышая в концентрациях 0,2 и 0,5 мМ выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка.6.Цитрат натрия в модели глутаматного стресса в концентрациях 0,1; 0,2 и0,5 мМ не имел достоверного влияния на выживаемость, а в концентрации1 мМ приводил к увеличению выживаемости нейронов, аскорбат натрияв концентрации 0,1 и 0,5 мМ, приводил к снижению выживаемости нейронов в условиях глутаматного стресса.132ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИПолученные данные позволяют рассматривать органические соли лития(аскорбат, цитрат) как высокоэффективные и малотоксичные нейропротекторныесредства и рекомендовать их для дальнейшего доклинического изучения в качестве нейропротекторных препаратов для лечения нейродегенеративных заболеваний.Рекомендуется продолжить изучение действия органических соединенийлития для поиска новых нейропротекторов с целью лечения и профилактикинейродегенеративных заболеваний головного мозга.133СПИСОК СОКРАЩЕНИЙИ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙБПболезнь ПаркинсонаБАболезнь АльцгеймераБГболезнь ГентингтонаДИдоверительный интервалКЗНкультивированные зернистые нейроныНДЗнейродегенеративные заболеванияПТпротивотранспортAktпуть выживаемости протеинкиназы BAUCtплощадь под кривойBcl-2регулятор апоптозаBDNFнейротрофический фактор мозгаClastпоследняя измеренная концентрация литияCmaxмаксимальная концентрация лития в биосубстратеCLклиренсCREBтранскрипционный факторGSK-3glycogen synthase kinase-3 (киназа гликогенсинтетазы-3)Hsp70белок теплового шокаIMPинозитолмонофосфатазаLzнаклон участка финального выведенияLD50полулетальная дозаMRTtсреднее время удержанияNMDAN-метил-D-аспартат (аспарагиновая кислота)PI3Kпуть выживаемости фосфатидилинозитол-3-киназыT1/2период полувыведенияtmaxвремя достижения максимальной концентрацииTrkBтропомиозиновый тирозинкиназный рецептор134СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.Бабенкова, И.
В. Влияние антиоксидантного препарата на основе биофлавоноидов и витамина С на антиоксидантную активность плазмы крови /И. В. Бабенкова, Ю. О. Теселкин, A. B. Асейчев // Вопр. питания. — 1999. —Т. 68, № 3. С. 9–11.2.Гехт, А. Б. Медицинские и социальные аспекты болезни Паркинсона /А. Б. Гехт, Г. Р. Попов // Болезнь Паркинсона и расстройства движений / подред. С. Н. Иллариошкина, О.
С. Левина. — М. : Соверо-пресс, 2014. —С. 221–227.3.Гоголева, И. В. Влияние органических солей лития, магния, селена на элементный гомеостаз головного мозга на фоне экспериментальной хронической окклюзии общих сонных артерий : автореф. дис. … канд. мед. наук :14.00.25 / Гоголева Ирина Викторовна. — М., 2009. — 23 с.4.Гоголева, И. В. Соли лития в физиологической дозировке оказывают нейротропное и антиоксидантное действие / И.
В. Гоголева, А. В. Снегирёв,В. А. Афонина // I Всероссийская научная конференция студентов и молодых ученых с международным участием «Медико-биологические, клинические и социальные вопросы здоровья и патологии человека» : матер. конф.— Иваново, 2015. — С. 33–34.5.Громова, О. А. Систематический анализ молекулярно-физиологических эффектов миоинозитола: данные молекулярной биологии, экспериментальнойи клинической медицины / О. А. Громова, И. Ю.
Торшин, Т. Р. Гришина //Эффективная фармакотерапия. — 2013. — № 28. — С. 4–12.6.Гуреева, Н. В. Аскорбиновая кислота как стресс-реализующий фактор ибиотест в экологических исследованиях / Н. В. Гуреева // Вестн. Тюменского государственного университета. — 2011. — № 12. — С. 56–61.7.Гусев, Е. И. Возможности вторичной профилактики инсульта: значение антигипертензивной и антиагрегантной терапии / Е. И. Гусев, А.
Б. Гехт //135Журн. неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. Инсульт. Приложение. — 2002. — Вып. 5. — С. 43–49.8.Иллариошкин, С. Н. Возрастзависимые заболевания мозга становятся новойэпидемией XXI века / С. Н. Иллариошкин // Нервные болезни. — 2017. —№ 2. — С. 40–42.9.Казимирко, В. К. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия / В. К. Казимирко, В. И. Мальцев.
— Киев : Морион, 2004. — 160 с.10. Левин, О. С. Болезнь Паркинсона / О. С. Левин, Н. В. Федорова. — М. :МЕДПресс-информ, 2012. — 352 c.11. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология /А. П. Авцын [и др.]. — М .: Медицина, 1991. — 496 с.12. Нейродегенеративные заболевания: фундаментальные и прикладные аспекты / под ред. М. В. Угрюмова. — М. : Наука, 2010. — 448 с.13. Нейропротективные эффекты ноотропного дипептида ГВС-111 при кислородно-глюкозной депривации, глутаматной токсичности и оксидативномстрессе in vitro / Н.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
