Диссертация (1174225), страница 41
Текст из файла (страница 41)
5.7). Вне зависимостиот причины бесплодия в фолликулярной жидкости у подавляющего числа пациенток выявлялся окислительный стресс, затрагивающий в первую очередь белковоезвено: мы наблюдали снижение показателя ∆I, свидетельствующее об увеличенииуровня окислительной модификации альбумина и снижении антиоксидантногопотенциала системы глутатиона. При окислительном стрессе в фолликулярнойжидкости, затрагивающим белковое звено нарушается функциональная способность клеток гранулезы к выработке прогестерона [195].
Из-за отсутствия достаточной гормональной поддержки прогестероном созревание ооцитов замедляется,что негативно влияет на последующие процессы, включая оплодотворение, образование бластоцисты и развитие эмбрионов [332]. Глутатион, обладающий антиоксидантными свойствами, присутствует в клетках гранулезы на различных стадиях фолликулогенеза [345].
Снижение антиоксидантного потенциала системы223глутатиона свидетельствует о снижении активности клеток гранулезы, и косвенноотражает недостаточную зрелость ооцитов. Кроме того, известно, что глутатиониграет важную роль в функции веретена ооцитов и развитии пронуклеуса [284].В нашем исследовании показатели антиоксидантной защиты, обусловленныедействием сильных антиоксидантов - мочевой кислоты и аскорбата, были в пределах референтных значений, а у некоторых пациенток даже отмечалось некоторое повышение параметра S. Мы считаем, что данные изменения носят компенсаторный характер в ответ на повышение активности прооксидантного ферментаксантиоксигеназы.Табл. 5.7. Оксидантно-антиоксидантный профиль фолликулярной жидкости ипричина бесплодияПоказателихемилюминограммыПричина бесплодияДостоверностьНГЭ(n=22)ТПБ(n=18)ПозднийРВ(n=11)*p междуНГЭ иТПБ*p междуТПБ ипозднимРВS,×103имп/с,Ме(МР)339(138; 568)314(61; 631)361(46; 696)p=0,884p=0,438∆I,×103имп/с,Ме(МР)1,0(0,09; 3,98)1,03(0,03; 3,48)1,2(0,2; 1,2)p=0,632p=0,642INADH, ×103имп/с,Ме(МР)5,7(1,3; 32,8)9,8(0,3; 93,2)7,6(0,2; 28,9)p=0,305p=0,173Количество11 (50,0%)13 (72,2%)5 (45,5%)p>0,05p>0,05пациенток сокислительным стрессом (%)Литературные данные относительно показателей окислительного стресса вфолликулярной жидкости крайне противоречивы.
Маркер опосредованного окислением повреждения белка (АОРР) в фолликулярной жидкости у пациенток сНГЭ по сравнению с его отсутствием уровень был значительно повышен по дан-224ным Song et al., тогда как по данным Da Broi et al., повышение этого показателя убольных эндометриозом не наблюдалось. В работе Nakagawa et al. повышенияуровня окислительного стресса в фолликулярной жидкости между пациентами содносторонней эндометриомой и здоровыми пациентами также выявлено не было[275]. Наши результаты согласуются с исследованием Nishihara об отсутствиизначимых различий в концентрации глутатиона в фолликулярной жидкости у пациенток с эндометриозом в сравнении с группой ТПБ [284].
Следует учитывать,что в работах одних и тех же авторах нередко изучаются несколько маркеровокислительного стресса, авторы делают выводы о нарушениях окислительновосстановительного баланса в фолликулярной жидкости только на изменении одного-двух параметров, тогда как остальные показатели не отличаются по сравнению с пациентками с другими причинами бесплодия или даже регистрируютсяизменения в сторону увеличения антиоксидантов. Все это является предпосылкойк тому, что нельзя рассматривать маркеры окислительного стресса поотдельности, а должно проводиться изучение антиоксидантного и прооксидантного профиля, который позволяет оценить уровень окислительного стресса в разныхзвеньях свободно-радикального гомеостаза фолликулярной жидкости.Параметры свободно-радикального гомеостаза яичника зависят от схемыстимуляции суперовуляции.Табл.
5.8. Оксидантно-антиоксидантный профиль фолликулярной жидкости приразных схемах стимуляции суперовуляцииДлинныйпротокол ЭКО(n = 17)Короткий протоколЭКО (n = 31)pS, Ме(МР)254 (61; 563)385,49 (45,81; 696,16)0,035∆I, Ме(МР)1,24 (0,21; 3,67)1,13 (0,03; 3,98)0,632IOx , Ме(МР)7,68 (0,3; 91,18)5,67 (0,22; 63,29)0,1237 (41,2%)5 (16,1%)р > 0,05Показатели свободнорадикальногопрофиля*Количество пациентокс окислительнымстрессом, %225Нами было установлено, что в длинном (n=17) протоколе индукции суперовуляции Me (S) составила 254 (61; 563) имп/с, Me (∆I) = 1,24 (0,21; 3,67)имп/с, Me (INADH) = 7,68 (0,30; 91,18) имп/с (Табл.
5.8). При этом из 17 пациентококислительный стресс по двум показателям диагностирован у n = 3, по белковомупоказателю у n = 4; нормальные показатели или небольшое превышение антиоксидантной активности у n = 10. Анализ соответствующих данных при коротком(n=25) протоколе ЭКО показал, что Me (S) составила 385 (45;696) имп/с, Me (∆I) =1,12 (0,03; 3,98) имп/с, Me (INADH) = 5,66 (0,22; 63,29) им/с.
В итоге, из 25 пациенток, получавших ант-ГнРГ окислительный стресс по двум показателям диагностирован у 2, по белковому показателю также у 2; нормальные показатели или небольшое повышение антиоксидантной активности у n = 27. В естественном циклеЭКО Me (S) составила 355 (264; 514) имп/с, Me (∆I) = 0, 83 (0,52; 1,29) имп/с, Me(INADH) = 16,43 (7,24; 22,63) имп/с. Сопоставление схем стимуляции суперовуляции, причины бесплодия и параметров хемилюминограмм представлены в Табл.5.9.Табл.
5.9. Описательная статистика хемилюминограмм по протоколам стимуляции ЭКО с учетом причины бесплодияПричина бесплодияТПБНГЭПоздний РВПротоколКороткий (n=9)Длинный (n=8)Короткий (n=13)Длинный (n=8)Короткий (n=9)Длинный (n=1)Медиана S,Ме (МР)388 (171; 631)216 (61; 296)340 (138; 392)352 (176; 564)449 (45; 696)320 (213; 383)% окислительногостресса11,1%25,0%15,3%25,0%33,3%0%Нами было установлено, что при длинном протоколе стимуляции суперовуляции наблюдается снижение антиоксидантной активности фолликулярной жидкости (параметр S), что согласуется с результатами других исследователей.
В работе Mathyk et al. было показано, что общая антиоксидантная активность фолликулярной жидкости значительно выше у пациенток, которые вступили в протоколс а-ГнРГ, по сравнению с теми, кто использовал протокол ЭКО с ант-ГнРГ [116].226Развитие окислительного стресс в длинных протоколах может быть связано с использованием больших доз гонадотропинов по сравнению с короткими циклами.Известно, что с увеличением дозы гонатропинов наблюдается нарастание индексаокислительного стресса в фолликулярной жидкости [116].С другой стороны, мы не наблюдали существенных различий в показателе∆I при стимуляции суперовуляции с применением а-ГнРГ и ант-ГнРГ, что свидетельствует об отсутствии влияния протокола стимуляции овуляции на уровеньокислительной модификации альбумина и опосредованно на антиоксидантныйпотенциал системы глутатиона.
В исследовании Celik et al. также было показано,что средние концентрации глутатионпероксидазы и глутатиона не различались вфолликулярной жидкости пациенток, которые вступили в протокол с а-ГнРГ, посравнению c циклами с ант-ГнРГ [152].Исследования влияние применяемых анестетиков на показатели оксидантно-антиоксидантного профиля фолликулярной жидкости проводились совместно с Ушаковым И.Л.Табл. 5.10. Оксидантно-антиоксидантный профиль фолликулярной жидкости взависимости от препарата для анестезииПоказателисвободнорадикальногопрофиля*АнестетикДостоверностьpp между p междумежду севофл.
пропоф.севоф. и бези безианест. анест.проп.Севофлуран(n = 20)Пропофол(n = 21)Без анестезии(n = 10)S, Ме (МР)395(229; 696)306(84; 630)272(45; 538)0,010,020,12∆I, Ме (МР)1,3(0,1; 3,6)0,5(0,03; 2,3)0,8(0,2; 2,4)0,080,380,08IOx, Ме (МР)2,8(0,2; 32,7)5,1(2,3; 93,1)11,6(0,3; 32,7)0,060,50,17Количествопациенток сокислительн.стрессом, %4 (20,0%)12(57,1%)6 (60,0%)0,030,02р > 0,05227У пациенток, у которых при проведении анестезии с использовался севофлуран, были вычислены следующие показатели свободно-радикального гомеостазафолликулярной жидкости: Me S = 395 (229; 696), Me ∆I =1,3 (0,10; 3,67), Me INADH= 2,80 (0,22; 32,77). Средние значения антиоксидантной и прооксидантной активности фолликулярной жидкости при использовании пропофола были следующими: Me S = 306 (84; 630), Me ∆I = 0,55 (0,03; 2,35), Me INADH = 5,18 (2,39; 93,18).
Вгруппе пациенток, пункция которым проводилась без анестезии показатели хемилюминограмм были следующими: Me S = 272 (45; 538), Me ∆I = 0,86 (0,21; 2,46),Me INADH =11,6 (0,3; 32,77).Клинические исследования последних лет показали, что женщины, которымвыполняли процедуру ЭКО с использованием севофлурана, имели значительноболее высокие показатели оплодотворения по сравнению с теми, кто получалпропофол или тиопентал натрия [259].Табл. 5.11. Описательная статистика хемилюминограмм по используемому анестетику с учетом причины бесплодияПричина бесплодияТПБНГЭПоздний РВАнестетикСевофлуран (n=8)Пропофол (n=6)Без анестезии (n=4)Севофлуран (n=7)Пропофол (n=13)Без анестезии (n=2)Севофлуран (n=5)Пропофол (n=2)Без анестезии (n=4)Медиана S,Ме (МР)392 (351; 495)226 (224; 385)216 (61; 296)340 (238; 492)252 (176; 364)226349 (45; 396)223226 (116-322)% окислительногостресса12,5%50,0%25,0%14,2%69,2%50,0%20,0%50,0%75,0%Наши результаты могут объяснить это положительное влияние севофлуранана результат ЭКО.
Как следует из данных, представленных в табл. 5.9 и табл. 5.10при использовании севофлурана отмечается значимое увеличение антиоксидантной емкости фолликулярной жидкости, что, по-видимому, связано с эффектомпрекондиционирования, ранее описанным при кардиохирургических операциях сприменением севофлурана [123]. Прекондиционирование относится к адаптаци-228онным механизмам, который позволяет тканям лучше переносить серьезное неблагоприятное событие (например, ишемию), если эти ткани уже подвергалисьвоздействию и адаптировались к незначительным неблагоприятным явлениям.Известно, что некоторые ингаляционные анестетики, например, севофлуран, обладают эффектом прекондиционирование.
Защитные свойства севофлурана обусловлены сохранением уровней АТФ во время ишемии, снижением адгезии полиморфноядерных нейтрофилов, увеличением продукции оксида азота и ингибированием продукции свободных радикалов [49]. К сожалению, литературные данные о влиянии анестетика на показатели свободно-радикального гомеостаза вфолликулярной жидкости в литературе отсутствуют. Наши исследования являются пилотными в этой области и имеют большую перспективу. Полученные намиданные об увеличении антиоксидантной емкости фолликулярной жидкости у пациенток, получавших севофлуран, подтверждаются описанной ранее возможностью севофлурана ингибировать продукцию свободных радикалов в сердце и головном мозге.В нашем исследовании была выявлена связь между уровнем окислительногостресса в фолликулярной жидкости и качеством эмбрионов (Табл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
