Диссертация (1173211), страница 33
Текст из файла (страница 33)
Риск рецидива возрастал при появлении лимфоцитов вопухолевой ткани, периваскулярной лимфоидной инфильтрации, очаговойгиперплазии лимфоцитов, койлоцитоза, деструкции поверхности опухолевыхклеток.Обратнаязависимостьнаблюдаласьвотношенииналичиялейкоцитов в ткани опухоли.Наличие коррелятивных связей между присутствием ДНК ЦМВ и ВЭБв опухолевой ткани и составляющими лимфоцитарно-плазмоцитарногоинфильтрата, а также более высоких количественных показателей указанныхизменений, повышение риска прогрессии и рецидива заболевания приналичии или только появления этих изменений, позволяет нам сделать выводо влиянии латентной вирусной инфекции на прогрессию и возникновениерецидивов немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря.212ГЛАВАДАННЫЕVI.ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИХИССЛЕДОВАНИЙ.Превращение нормальной клетки в злокачественную - многостадийныйи последовательный процесс.
Он осуществляется при накоплении в геномеклетки достаточного количества повреждений генов, контролирующихклеточную пролиферацию, дифференцировку, морфогенетические реакции иапоптоз [140]. При этом повреждаются не только отдельные составляющиерегуляторных сетей, но и ключевые перекрестные звенья несколькихсигнальных путей. В результате накопления мутаций происходит нарушениенормального синтеза белков, белковый спектр опухоли значительноотличается от белкового спектра нормальной ткани.
Злокачественныйфенотипопухоливконечномсчетеопределяется качественным иколичественным изменением профиля белковых молекул, вовлеченных вканцерогенез. Сегодня в качестве этапов канцерогенеза мочевого пузырярассматриваются повреждения и поломки, накапливающиеся в ДНКопухолевой клетки.
Для всех типов опухолей показаны структурныеизменения ДНК - от хромосомных, при которых теряется или прибавляетсяхромосомный материал целых хромосом и их плеч, до точковых мутаций вгенах в виде замены одного нуклеотида на другой. Кроме того, собраномного данных об эпигенетической регуляции генной активности, прикоторой структура ДНК остается сохранной, но в результате ее химическоймодификации происходит изменение генной экспрессии и, как следствие,РНК и белков [140].2136.1.1.
Анализ пролиферативной активности клеток опухоли мочевогопузыря у пациентов с наличием вирусных ДНК в опухолевой ткани*Ki67 – белок, синтез которого начинается в G1-фазе и ускоряется в S иG2-фазах клеточного цикла, достигая пика во время митотического деления,после которого он деградирует.
Индекс Ki67 коррелирует с развитиемрецидива и прогрессии заболевания, особенно уротелиального рака [144146]. Ki67 - маркер пролиферативной активности, определяющий скоростьроста опухоли.Экспрессия Ki67 была исследована у 46 больных (26 пациентов сналичием вирусных ДНК в опухолевой ткани, 10 пациентов с отсутствиемтаковых, 10 больных ретроспективного анализа). Средний балл Ki67составил 5,1±2,6 (34,7%±27,8% в процентном соотношении). Значенияэкспрессии Ki67 значительно не отличались у пациентов с наличием иотсутствием вирусных ДНК в опухолевой ткани и составили 5,04±2,63 vs.5,70±2,50 (33,19%±26,69% vs. 40,00%±30,55%) соответственно. Однако, придетальном анализе пролиферативной активности в зависимости от стадии,рецидивного характера опухолевого процесса, степени анаплазии, нами быливыявлены существенные отличияПри анализе показателей экспрессии Ki67 нормальный уротелий непоказал экспрессии данного маркера. По мере озлокачествления отмеченоувеличение количества и степени экспрессии Ki67 в опухолевых клетках(рис.79)._________________________________________*Данные опубликованы в статье- Косова И.В.
Иммуногистохимические аспекты рака мочевого пузыря на фоневирусной инфекции / И.В. Косова, О.Б. Лоран, Л.А. Синякова и др.// Онкоурология.- 2018.- Т. 14.- № 2.- С. 142-154.214Рис.79. Выраженная экспрессия Ki67 (до 60% опухолевых клеток) показанострелками в переходноклеточной уротелиальной карциноме низкой степенизлокачественности (фрагмент опухоли). Ув.х40.По средним показателям, выраженных в баллах, у пациентов сотсутствиемвирусныхДНКпролиферативнаяактивностьбыластатистически достоверно выше (рис.80).F(1, 16)=6,3119, p=0,02309Вертикальными линиями отмечен 95% доверительный интервал8,07,57,06,5Ki67 (баллы)6,05,55,04,54,03,53,02,52,01,5отсутствие вирусных ДНКв опухолевой тканиналичие вирусных ДНКв опухолевой тканиРис.80. Экспрессия Ki67 (в баллах) у пациентов с наличием и отсутствиемвирусных ДНК в опухолевой ткани (сравнение средних показателей).Если у больных без наличия вирусных ДНК в опухолевой тканиотмечается четкая зависимость между экспрессией Ki67 и стадией процесса,215степенью анаплазии и рецидивом опухолевого процесса, что коррелирует сданными литературы [144-147], то у больных с наличием вирусных ДНК вопухолевой ткани такой зависимости не прослеживается.При анализе процентного соотношения пролиферативной активности упациентов с первичным или рецидивным характером процесса мы видимодинаковые показатели как у больных с наличием вирусных ДНК в опухоли,так и при их отсутствии (рис.81)Current effect: F(1, 49)=,00408, p=,94935Effective hypothesis decomposition7065605550Ki67 (в %)4540353025201510Отсутствиевирусных ДНКвирусов нетвирусы естьНаличиевирусных ДНК5первичнаярецидивнаяРис.81.
Экспрессия Ki67 (в процентах) у пациентов с наличием иотсутствием вирусных ДНК в опухолевой ткани и рецидивным характеромопухолевого процессаПроанализировавэкспрессиюKi67взависимостиотстадииопухолевого процесса, мы видим нарастание экспрессии по мере возрастаниястадии у пациентов с отсутствием вирусных ДНК в опухолевой ткани, тогдакакприналичиивируснойсоответствуют T2 (рис.82)инфекциимаксимальныепоказатели216Вертикальными линиями отмечен 95% доверительный интервал10080Ki67 (в %)6040200-20отсутствие вирусных ДНКв опухолевой ткани-401234наличие вирусных ДНКв опухолевой тканиСтадия опухолевого процессаРис. 82.
Экспрессия Ki67 (в процентах) у пациентов с наличием иотсутствием вирусных ДНК в опухолевой ткани в зависимости от стадиипроцесса.Как показано на рисунке 83, пролиферативная активность у пациентовсналичиемвирусныхДНКвопухолевойтканисвысоко-иумереннодифференцированными опухолями была выше таковой у пациентовс отсутствием вирусного поражения опухоли, хотя по средним показателямстатистическойдостоверностинеполучено.Даннаяпрослеживается как в процентном соотношении, так и в балльном.тенденцияCurrent effect: F(2, 48)=1,5447, p=,22379Vertical bars denote 0,95 confidence intervals217908070Ki67 (в %)6050403020100-1012стадияСтепеньGанаплазии3(G)Отсутствиевирусовнет вирусных ДНКНаличиевирусных ДНКвирусыестьРис.
83. Экспрессия Ki67 (в процентах) у пациентов с наличием иотсутствием вирусных ДНК в опухолевой ткани и степенью анаплазииЗначимых изменений пролиферативной активности у пациентов,страдающих раком мочевого пузыря, в зависимости от полифокальностипроцесса (единична опухоль - 35,94±26,15%, 4,70±2,26б., множественная38,27±27,81%, 5,43±2,07б.), мы не выявили.При анализе экспрессии Ki67 в зависимости от выделенного вирусанами было выявлено статистически достоверное повышение маркера Ki67(выраженного в процентах) у пациентов с наличием ДНК ВЭБ в опухолевойткани (48,92±24,68% vs. 30,16±25,40, p=0,0466, R=0,35), в балльномвыражении достоверности мы не получили (5,00±2,16 vs.
5,14±2,21). Данныепредставлены на рис.84.21890r = 0,3544; p = 0,0466807060Ki67 (в %)50403020100-10отрицательныйположительныйналичие ВЭБ в опухолевой ткани123456Рис.84. Коррелятивные связи между экспрессией Ki67 (в процентах) иналичием ДНК ВЭБ в опухолевой ткани (высокий процент корреляции)Выявлены коррелятивные связи (рис.84) между наличием ВЭБ вопухолевой ткани и маркером пролиферации Ki67 (R=0,354, p=0.047, n=32).Если же рассматривать коррелятивные связи внутри группы с наличием ДНКразличных вирусов в опухолевой ткани, то эти связи становятсястатистически достоверно высокими (R=0,611, p=0,003, n=21).При сравнении медиан показателя Ki67 у пациентов с наличиемвирусных ДНК ВЭБ в опухолевой ткани и их отсутствием, установлено, чтопролиферативная активность в целом у пациентов в первом случае выше(48,92 % vs 30,16%, p=0,0466), данные представлены на рис.85.21990807060Ki67 (в %)50403020100-10отрицательныйположительныйналичие ВЭБ в опухолевой тканиМедиана25%-75%Min-MaxРис.
85. Экспрессия Ki67 (в процентах) у пациентов с наличием иотсутствием вирусных ДНК ВЭБ в опухолевой ткани.Так, Guelly ML и соавторы подчеркивают, что “ВЭБ является не простосторонним наблюдателем развития аденокарциномы желудка, но тесносвязан с патогенезом развития и поддержания опухолевого процесса“ [148].Liang и соавт.
выявили около 5 сигнальных путей, на которые влияют толькоВЭБ-ассоциированные геномные и эпигеномные альтерации со снижениемпериода выживания у пациентов с ВЭБ-положительным раком желудка(P=0.006) [149]. Chuang и соавт. выявили наличие ДНК ВЭБ более, чем в 50%случаев уротелиальной карциномы в стадии Та-Т1, при этом высокая степеньанаплазии опухоли коррелировала с количеством геномов ВЭБ в опухоли[150]. Мы также не исключаем, что степень анаплазии и инвазии у этойкатегории больных зависит от количества геномов ВЭБ в опухоли.У пациентов с наличием вирусных ДНК нами получены статистическидостоверные коррелятивные связи между уровнем анти–ВЭБ IgG-VCA ипролиферативной активностью Ki67 (в процентах) (R=0,337, p=0,05), чтосвидетельствует о влиянии именно латентной вирусной инфекции напролиферативную активность опухоли, как у пациентов с наличием вирусной220ДНК в опухолевой ткани, так и в их отсутствии.
Такая же тенденциянаблюдается и при анализе экспрессии Ki67 в баллах, представлена нарис.86.Correlation: r = ,493368,58,07,5Ki67 (баллы)7,06,56,05,55,04,54,03,50100200300400500anti Ig-VCAАнти—ВЭБIgG-VCA6007008000,95 Conf.Int.Рис. 86. Экспрессия Ki67 (в баллах) у пациентов, страдающих ракоммочевого пузыря.Мы выявили высокие обратные корреляции между стадией процесса иэкспрессией Ki67 (в баллах) у пациентов с наличием вирусных ДНК вопухолевой ткани (R=-0,805, p=0,016), при этом у пациентов с наличием ВЭБкорреляционная зависимость усиливается (R=-0,926, p=0,074).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
