Диссертация (1151541), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Объектом исследования служили цыплята кросса «Кобб 500» с суточного до 36-суточного возраста. Исследования, представленные в диссертации, проводились в соответствии с методологией, принятой при изучении вопросов питания, обмена веществ и здоровья сельскохозяйственной птицы (Сергиев Посад, ГНУ ВНИТИП, 2013).В ходе выполнения работы использовали общие методы научного познания: анализ, сравнение, обобщение; экспериментальные методы: наблюдение,сопоставление; специальные методы: зоотехнические, физиологические, биохимические, гистологические, экономические.
Полученные экспериментальные данные обрабатывали методом вариационной статистики, руководствуясь8методическими указаниями (Сергиев Посад, ГНУ ВНИТИП, 2013), на персональном компьютере с использованием программного обеспечения MicrsoftExcel.Положения, выносимые на защиту:– состав и структура микробиоты кишечника у цыплят-бройлеров на фонеприменения комбикормов различной структуры;– зоотехнические и физиологические показатели у цыплят-бройлеров присмене структуры и питательности комбикорма;– результаты поиска взаимосвязей между микрофлорой кишечника и основными зоотехническими и физиологическими показателями бройлеров;– экономическая эффективность использования кормовой добавки Целлобактерин-Т на фоне комбикорма с высоким уровнем некрахмалистых полисахаридов.Степень достоверности и апробация результатов.
Исследования выполнены на высокопродуктивном кроссе бройлеров «Кобб 500» с использованием современных методик сбора и обработки информации; биохимическиеисследования выполнены на сертифицируемом оборудовании в Испытательном центре ФНЦ «ВНИТИП» РАН, молекулярно-генетические исследованиявыполнены в лаборатории ООО «БИОТРОФ». Статистическая обработка полученных экспериментальных данных, их производственная проверка подтверждают обоснованность и достоверность основных выводов и предложений производству, сформулированных в диссертации.Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на: семинарах по повышению квалификации специалистов птицеводческих предприятий (Сергиев Посад, 2013-2017г.г.), XVIII международной конференции Российского отделения Всемирной научной ассоциации по птицеводству «Инновационное обеспечение яичного и мясного птицеводства России» (19-22 мая 2015 года, г.
Сергиев Посад), XXV World’s Poultry Congress(05-09 сентября 2016 года, Пекин, Китай), научно-практической (очно-заочной) конференции с международным участием «Современные тенденции9научного обеспечения в развитии АПК: фундаментальные и прикладные исследования» (26 октября 2017 года, г. Омск).Публикации результатов исследований. По материалам диссертацииопубликовано 9 научных работ, в том числе в журналах, рекомендованныхВАК РФ – 8.
Все публикации выполнены в рамках гранта российского научного фонда по научному проекту «Современные представления о микрофлорекишечника птицы при различных рационах питания: молекулярно-генетические подходы» № 14-16-00140.Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на133 страницах машинописного текста, включает 26 таблиц, 13 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложенийпроизводству, списка литературы, включающего 143 источников, в том числе104 на иностранных языках.101. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1.
Состав и роль микробиоты желудочно-кишечного тракта птицыСовременное птицеводство характеризуется высоким уровнем индустриализации, что подразумевает высокую концентрацию поголовья на сравнительно небольших производственных площадях, использование безоконных птичников с регулируемым микроклиматом, автоматизацию технологических процессов и т.д. (Фисинин В.И, 2009). При этом основные производственные затраты (68-72%) в мясном птицеводстве приходятся на корма(Aggrey S.E. et al., 2010). Благодаря успехам генетической селекции птицы,скорость метаболических процессов у современных мясных кроссов становится все выше, и лимитирующим фактором развития птицеводства оказывается способность пищеварительной системы птицы обеспечить высокий уровень и физиологическую эффективность метаболизации питательных веществрационов.
За последние 50 лет в мире достигнут значительный прогресс поскорости роста бройлеров и эффективности использования ими кормов(Havenstein G.B. et al., 2003, Панин И.Г. и др., 2011), причем этот генетическийпрогресс привел к изменениям в физиологии питания современной мяснойптицы и составе микрофлоры ее желудочно-кишечного тракта (ЖКТ)(Lumpkins B.S., et al., 2010, Подобед Л.И. и др., 2017). Поэтому для реализациисвоего генетического потенциала продуктивности она требует адекватнойфункциональной поддержки пищеварительного тракта и, в частности, регуляции состава его микрофлоры.Известно, что состав кормов оказывает непосредственное влияние на качественные и количественные характеристики микробного сообщества желудочно-кишечного тракта.
Несбалансированное кормление бройлеров приводит к нежелательным изменениям микробиоценоза, что является причинойснижения продуктивности и возникновения ряда заболеваний вследствиенарушения процессов пищеварения (Панин И.Г. и др., 2011).11В связи с этим, на протяжении последних десятилетий изучение ролимикроорганизмов желудочно-кишечного тракта цыплят-бройлеров в пищеварении и обмене веществ вызывает повышенный интерес как ученых, так ипрактиков-птицеводов, поскольку результаты этих исследований способствуют организации более рационального и полноценного кормления и другихмероприятий, необходимых для повышения продуктивности и улучшения состояния здоровья птицы (Ленкова Т.Н. и др.
2013, 2015, Манукян В.А., 2015,2016).Некоторые сведения о составе и роли микрофлоры желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) сельскохозяйственных птиц были получены с помощьюклассических методов микробиологии (Тимошко М.А., 1990, Engberg R.M. etal., 2000, Тараканов Б.В., 2006).Одним из наиболее перспективных на сегодняшний день является ТRFLP-анализ (Terminal restriction fragment length polymorphism) – молекулярно-генетический метод, основанный на анализе полиморфизма длин амплифицированных рестрикционных фрагментов ДНК микроорганизмов.
Онпредназначен для определения количества, относительной численности и таксономической принадлежности всех бактерий микробной экосистемы. Этодает возможность широкого и глубокого сравнительного изучения микробиологических сообществ в их развитии и изменении.В России метод T-RFLP в связи с высокой стоимостью оборудования дляанализа, а также отсутствием квалифицированных кадров используется в основном лишь для анализа почвы и кала человека.В связи с этим сотрудниками лаборатории молекулярно-генетическихисследований научно-производственной компании «БИОТРОФ» впервые вРоссии на основе анализа зарубежных исследований методика Т-RFLP быламодифицирована для изучения микрофлоры желудочно-кишечного трактасельскохозяйственных птиц (Егоров И.А.
и др., 2010, Егорова Т.А. и др. 2016).12Известно, что в просвете кишечника птицы, на всём его протяжении отротовой полости до края клоаки, обитает многочисленное разнотипное сообщество, состоящее из бактерий, грибковых, одноклеточных и вирусных микроорганизмов.Считается, что количество бактериальных клеток ЖКТ превышает количество клеток самого организма птицы в пропорции, примерно, 10:1.Последние исследования кишечника позволили сделать предположение,что желудочно-кишечный тракт птицы (на примере бройлеров) содержитоколо 640 разновидностей бактериальных микроорганизмов.
Численность иразнообразие кишечной микрофлоры варьируют в разных отделах кишечника,и очевидно, что отделы, имеющие менее благоприятные условия (желудок)или более быстрое прохождение содержимого кишечника (двенадцатиперстная кишка), имеют меньшее число бактерий (Фисинин В.И. и др, 2016).Принято считать, что развитие микрофлоры ЖКТ цыплёнка начинается вмомент его вывода. Это происходит благодаря поступлению бактериальныхмикроорганизмов в пищеварительную трубку из окружающего воздуха, кормаи от людей, работающих с цыплятами после вывода.Зоб птицы быстро колонизируется бактериальными организмами в течение первых 24 часов после вывода цыплят. Кроме того, за этот период микроорганизмы эпифитной микрофлоры из ротового отверстия продвигаются повсему желудочно-кишечному тракту и достигают слепых отростков толстогокишечника.
Это возможно только за счёт того, что в желудке суточного цыплёнка ещё нет характерного и достаточного кислотного барьера, а активностьпепсина в желудке, способного затормозить развитие микрофлоры, ещё оченьнизка.Через три дня после вылупления цыплёнка число бактериальных микроорганизмов в тонком и толстом кишечнике увеличивается примерно в 10 раз.К 2-х недельному возрасту микрофлора тонкого кишечника полностью стабилизируется по видовому и количественному составу, а к 30 суткам жизни заканчивает формирование микрофлора слепых отростков.13Естественно, что сроки и характер формирования биоценоза ЖКТ птицысущественно меняется в зависимости от фона микроорганизмов воздуха и оборудования птичника, где содержатся цыплята.
Ещё больший эффект на формирование микрофлоры ЖКТ оказывают: использование антибиотиков, пробиотиков, подкислителей, состав кормового рациона и микробиологическиехарактеристики питьевой воды (Руководство…: Сергиев Посад, 2013). По своему влиянию на организм птицы всю микрофлору желудочно-кишечноготракта можно разделить на нормальную, условно-патогенную и патогенную(Современные представления о микрофлоре…, 2017).Нормальная микрофлора (симбионтная) помогает пищеварительнойсистеме птицы переваривать питательные вещества корма в пристеночной области кишечника и служит барьером от негативного влияния патогеннойфлоры.Условно-патогенная флора в клинически здоровом организме со стабильным ценозом работает так же, как и нормальная.