Диссертация (1151505), страница 7

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 7)

Подсчет колониеобразующихединиц проводили по разведениям, в которых количество колонийнаходилось в пределах от 30 до 300 КОЕ/г.Наличие сальмонелл проводили по ГОСТ 7702.2.3-93 "Мясоптицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Метод выявлениясальмонелл". Метод основан на высеве определенного количества42продукта нанеселективные и селективные питательные среды свыделениемчистыхкультурнадиагностическихсредахсморфологическими и культуральными признаками сальмонелл; впроверке биохимических свойств выделенных культур; определенииантигеннойструктуры.Выращиваниебактериальныхкультурпроводили путем высева навески продукта в пептонно-буфернуюводу. После инкубации при температуре 36-38°С в течение 16-24часов культуру в объеме 10 см3 пересевали на магниевую средуобогащения и инкубировали в течение 48 часов при температуре 3638°С.

После чего магниевой среды обогащения пересевали культуруна висмут-сульфиный агар и инкубировали двое суток (48 ч) притемпературе 36-38°С.2.1.6 Методика гистологического исследованияГистологический метод исследования проводили по ГОСТ 2348179 "Мясо птицы. Метод гистологического анализа". Отбор пробгрудных и бедренных мышц проводили в течение 30 минут после убояптицы в количестве 6 проб от каждой группы. Для фиксациииспользовали 1% раствор формальдегида. В данной жидкости кусочкимышечной ткани толщиной 0,5-1 см фиксировали в течение 7-14суток.После фиксации материал промывали проточной водопроводнойводой в течение 24 часов, после чего провели обезвоживание иуплотнение по схеме:24 часа в 70% этиловом спирте и толуоле;24 часа в 80% этиловом спирте и толуоле;24 часа в 96% этиловом спирте и толуоле;24 часа в 100% этиловом спирте и толуоле.В смеси спирт и тулуол были взяты поровну.Далее фиксированные пробы были помещены в термостат на 3часа при температуре 37° С.

В смеси толуол и парафин взяты поровну;43две порции парафина (в термостате при температуре 50-55°С) по 2часа в каждой порции. После этого объекты были залиты новойпорцией парафина, который был заранее налит в чашки Петри. Дляполучениягистологическихсрезовпользовалисьротационныммикротом, системы Майонетта.Окраску мышечных срезов проводили гематоксилином и эозиномдля выявления общей гистологической характерис тики мышечнойтканицыплят-бройлеров,пикрофуксиномпоВан-Гизонудлявыявления волокнистой соединительной ткани (А.

Меркулов, 1961;Л.Ф. Бодрова, В.А. Шес таков, 2007).2.1.7 Методика токсико-биологического исследованияТоксичностьпробисследовалисогласно"Методическимуказаниям по ускоренному определению токсичности продуктовживотноводстваикормов"Теtrahymenapyriformis.Сутьприметодапомощьюсостоитвыживаемости инфузорий Теtrahymenapyriformisвинфузорийисследованиив среде, котораясодержит изучаемый продукт. Во флаконы из-под антибиотиковналивали по 2 мл дистиллированной воды, добавляли 200г.

мяса,которое предварительно растирают в ступке, после чего добавляли по0,1млкультурыинфузорийТеtrahymenapyriformis,которыевыращивались на пептонной среде в течение трех-пяти суток.Пептоннаясредаимеласледующийсостав(г/100млдистиллированной воды):- пептон бактериологический - 2,0;- глюкоза - 0,5 ;- дрожжевой экстракт - 0,1 ;- натрий хлористый - 0,1 ;- рН среды 7,0 - 7,5 ;Далее содержимое флаконов встряхивали каждые 10 минут.Жизнедеятельнос ть клеток оценивали каждый час в течение 3 часов44от начала опыта.

Для этого взбалтывали содержимое флаконов ипослетого,какпродуктоседалвтечение15секунд,бактериологической петлей брали каплю надосадочной жидкости иисследовали на наличиеи подвижность живых клетокподмикроскопом. Исследование каждого образца проводили дважды втрехкратной повторности.Определение относительной биологической ценнос ти (ОБЦ)определялисогласно"Методическимрекомендациямдляиспользования экспресс-метода биологической оценки продуктов икормов" (ВАСХНИЛ, 1990). Взвесь исследуемого мяса в количестве2,4 мг растирали в ступке в течение 2-3 минуты. Затем туда жедобавляли для анализа 8 мл.

среды следующего состава (г/100 млдистиллированной воды):- глюкозы - 0,5;- дрожжевого экстракта - 0,1;- натрия хлористого -0,1-рН среды 7,0 - 7,5.Содержимое ступки измельчали до однородной массы в течениенескольких секунд и переливали в пробирку. После взбалтыванияполученного субстрата из пробирки отбирали по 2 мл. содержимого иразливали в каждый из трех флаконов из-под антибиотиков. Флаконыкипятиливтечение30миндляинактивациипос тороннеймикрофлоры. Флаконы охлаждали до комнатной температуры, и встерильных условиях вносили в них по 0,05 мл трех - пятисуточнойкультуры инфузорий тетрахимен, выращенных на пептонной среде.Флаконы оставляли при на 4 суток. Два-три раза в день флаконывстряхивали для лучшей аэрации среды.Через четверо суток проводили подсчет выросших клетокинфузорий в счетной камере Фукса-Розенталя.

Для этого в каждыйфлакон, для фиксации клеток,вносили по одной капле 5%-го45спиртового рас твора йода и добавляли по 8 мл дистиллированнойводы. После этого флакон встряхивали, отбирали пастеровскойпипеткой содержимое и вносили в счетную камеру. Подсчетосуществляли в 10-ти больших квадратах (по 5 квадратов в каждойсетке) для получения среднего результата. Затем рассчитываликоличество выросших клеток инфузорий в 1 мл питательной среды.Относительнуюбиологическуюценностьопределялипутемотношения количества клеток, выросших на исследуемом продукте, кколичеству клетокна контрольномпродукте,выраженного впроцентах.2.1.8 Дегустационная оценкаМясо дегустировали после тепловой обработки варкой и, в т. ч.,проводили оценку качества бульона.

Преимущество данного методасостоит в том, что появляется возможность дать оценку основныхорганолептических показателей продукта: цвета, вкуса, аромата,консистенции, сочности и др. Во ВНИИМПе была разработанынаучно обоснованные методы органолептического анализа мяса,которые включали в себя методику отбора и подготовки дегустаторов,били разработаны методические указания по применению 9-бальнойшкалы для оценки качества исследуемых проб мяса при дегустации.Отбор проб для дегустации. Образцы мяса берут от исследуемыхтушек цыплят-бройлеров различных групп, но при обязательномусловии - из аналогичных участков.

Для варки используют грудныемышцы (белое мясо) и бедренные мышцы (красное мясо). Мясокладут кусками в кастрюлю с холодной водой (в соотношении 1:3),закрывают крышкой и варят в течение 40 минут. По окончанию варкимясо вынимают из бульона и охлаждают до 30-40ºС. После остыванияпробы мяса нарезают на небольшие ломтики для каждого дегустатора.Оценка мяса происходит по следующим показателям: внешний вид,аромат, вкус, консистенция, сочность. Бульон разливают в стаканчики46(объемом примерно по 20 мл) и оценивают внешний вид, цвет, аромат,вкус, наваристость.

Лучшим считается бульон, который получилболее высокие оценки по всем показателям по сравнению с другимиисследуемыми группами. Дегустаторам не разрешается делитьсямнениями о пробах. Следующая порция может быть оценена толькочерез три минуты, перед этим необходимо устранить послевкусие отпредыдущего мяса несладким чаем или питьевой водой. Оценкизаносятсявзаранееподготовленныедегустационныелисты,розданные каждому дегустатору.2.1.9 Статистическая обработка результатов исследованияОбработку цифровых данных проводили по методу Стьюдента дляпрямых измерений. Вычисление средних значений, которое позволяетприблизится к дейс твительному значению, является начальнымэтапом статистической обработки данных эксперимента. Далеенеобходимо установить границы и величину интервала, в котором сопределеннойзаранеезаданнойвероятностьюзаключенодействительное значение - доверительный интервал.

Максимальнодопустимая вероятность, которая рекомендуется при вычислениидоверительных интервалов во многих исследованиях, составляет 95%.Величина доверительного интервала зависит от числа проведенныхопытов и степени варьирования полученных результатов. Одной изнаиболее распространенных характерис тик варьирования, котораяучитывает все полученные данные, является квадратичное отклонение(  ), которое вычисляется по формуле: где(    )i2(  )n 12сумма квадратов отклонений результатов отдельныхвеличин от средней арифметической, n- число отдельных измерений.m   / n47где m - средняя квадратичная ошибка.Е = t  m, где t - коэффициент Стьюдента, определяемый по таблице, взависимости от числа степеней свободы (k = n - 1) и требуемогоуровня вероятности доверительного интервала (Р = 0,95).

Оформлениедиссертационной работы проводили с помощью пакета MicrosoftOffice 2013 на персональном компьютере.483. Результаты собственных исследований3.1 Мясная продуктивность цыплят-бройлеровОдним из показателей припроведении экспериментов нацыплятах-бройлерах является живая масса, очень сильное влияние накоторую оказывает содержание и кормление птицы, а также влияниеразличных факторов, наличие которых неизбежно при промышленномсодержании на птицеводческих хозяйствах.

В течение всего временипроведения опыта цыплята обеих групп сохраняли активность,аппетит и жажду. Гребень бледно-розового цвета, клюв чистый,блестящий. Оперение чистое, гладкое. Истечений из естественныхотверстий не наблюдали. Дефекация в норме, примесей крови в калене обнаружено. Термометрия не выходила за физиологическую норму(40-42 ºС). Взвешивание проводили в первый день опыта, далее на 7-е,14-е и 35-е сутки.

Динамика массы цыплят-бройлеров в первой серииопытов с первых суток до 35-х суток представлена в таблице 3.Таблица 3 - Динамика живой массы цыплят-бройлеров (1-ая серия)Группы1контроль2 опыт3 опыт*(р≤0,05),Средняя живая масса г М±m1 сутки200±3,1200±2,5200±2,1n=407 сутки14 сутки 35 сутки230,4±1049,6±2173,2±7,327,835,29260,1±11,6 1203,2±6,4265±1205,6±2389,1±10,45,056,3*Среднесуточныйприрост61,4±2,164,8±2,166,3±2,3Убой цыплят-бройлеров второй опытной группы и части первойпроводили на 14-е сутки. Убой цыплят-бройлеров третьей опытнойгруппы и оставшейся части птицы контрольной - на 35-е сутки.Цыплята как контрольной, так и опытной групп имеют схожуюсреднюю живую массу в начале эксперимента.

После началаэксперимента цыплята-бройлеры опытных групп набирали живую49массу быстрее, чем в контроле. По живой массе вторая и третьягруппы цыплят-бройлеров превосходили контрольную уже в концепервой недели на 12% и 15% соответственно.

Характеристики

Список файлов диссертации