Диссертация (1146655), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Для определения достоверности различиймеждудвумягруппамипараметрическихкачественныхиспользовалсяпоказателейпоказателейиt-критерийкритерийОбработка[1].СтьюдентадляПирсонадлякорреляцииматериалапроводиласьсиспользованием программного пакета Microsoft Excel 2003, программы IBMSPSS Statistics v.23.2.6. Моделирование эндометриоза диафрагмы на лабораторных крысах.Экспериментальноеисследованиеразрабатывалосьнаоснове«Международныхрекомендацийпопроведениюбиомедицинскихисследований с использованием животных» (1985г.), а также «Закона о защитеживотных от жестокого обращения» (1998).
Животные содержались вспециализированномвиварии,соответствующемРД-АПК3.10.07.02-09«Методические рекомендации по содержанию лабораторных животных ввивариях научно-исследовательских институтов и учебных заведений». Работас животными проводилась сотрудниками, имеющими специальное образование52и навыки работы с лабораторными животными. Все медицинские манипуляциис животными проводились с адекватной анестезией сертифицированнымиветеринарными препаратами.С целью определения возможности создания патогенетической моделиторакального эндометриоза на базе вивария НИИФП проведен хроническийэксперимент с использованием 4 белых лабораторных крыс (Rattus norvegicus).Все 4 самки крыс имели здоровое потомство и находились в возрасте от 8 до 10месяцев.Вкачествеэкспериментальногоживотноговыбранабелаялабораторная крыса ввиду регулярности их эструса (каждые 5-6 дней), чтомогло стать ускоренным аналогом менструального цикла женщин.Дляиндукцииэндометриозапроводилосьподшиваниеучасткарезецированного рога матки к поверхности диафрагмы в надпеченочномпространстве.
Для анестезии использовалось внутрибрюшинное введениерометара в дозе 5 мг/кг и золетила в дозировке 10 мг/кг. После анестезииживотные фиксировались в положении на спине. Операция выполнялась черезсрединнуюлапаротомиювасептическихусловияхвоперационной.Непосредственно перед разрезом осуществлялось бритье передней брюшнойстенки, после чего операционное поле обрабатывалось спиртовым растворомйода (рис. 13).Рисунок 13 - Оперативный доступ53После ревизии брюшной полости визуализировался левый рог матки.На уровне его отхождения от тела матки проводилась его перевязкавикриловой нитью 4-0 (рис.
14).Рисунок 14 - Вид резецированного рога маткиРог резецировался, затем вскрывался вдоль. После этого, отсекалась частьрога, размерами 2х2мм.Этот отрезок подшивался к абдоминальной поверхности правого куполадиафрагмы в надпеченочном пространстве монофиламентной нитью 5-0.Фиксация осуществлялась эндометрием к поверхности диафрагмы 2-3 швами(рис. 15).Рисунок 15 - Подшитый к диафрагме участок эндометрия54Относительно тонкая диафрагма крыс позволяла оценивать прилегающуюбазальную поверхность легкого, что дало возможность исключить наличиемассивного пневмоторакса интраоперационно.Проводилась ревизия брюшной полости и культи рога матки с цельюгемостаза. Гемостаз достигался прошиванием и перевязкой крупных сосудовили раздавливанием мелких. Мышцы и брюшина ушивались в один слой тойже нитью непрерывным обвивным швом рассасывающейся полифиламентнойнитью 4-0, затем таким же швом ушивалась кожа.
Антибиотикопрофилактикиинтраоперационно и антибактериальной терапии в послеоперационном периодене проводилось, с целью исключения нежелательного взаимодействиялекарственных средств, которые недостаточно изучены у животныхВторой этап эксперимента проводился с разделением животных на 3 группы:1-группа индукции эндометриоза без гормональной стимуляции – 14 крыс2-группа индукции эндометриоза со стимуляцией эстрогенами ‒ 13 крыс3-контрольная группа, животные без подшивания эндометрия к диафрагме,подвергавшиеся стимуляции эстрогенами ‒ 4 крысы.01.03.2011 выполнена инъекция 0,03 мл 0,1% синестрола в/м 17 животнымиз 2 и 3 групп. По вышеописанной схеме проведена операция по подшиваниюучастка эндометрия к поверхности диафрагмы у 6 животных из 1 группы,02.03.2011 выполнена операция у 8 оставшихся крыс из этой группы.На следуюшие сутки оперированы 17 животных из 2 и 3 групп,подвергавшиеся стимуляцией эстрогенами.
При этом в группе контроляподшивания участка рога матки к диафрагме не проводилось, выполняласьлишь резекция рога матки с целью приближения контрольной группы кисследуемым животным по уровню травматичности доступа и операционногостресса.В послеоперационном периоде 17 животным из 2 и 3 групп проводилосьвнутримышечное введение 0,1% синэстрола в дозе 0,03 мл еженедельно с09.03.2011 по 30.07.2011.Через 157 дней все животные выведены из эксперимента.55Глава 3. Результаты моделирования эндометриоза у крыс.Первый этап использовался для отработки методики операции, исключениятехнических ошибок и оценки сроков выведения животных из эксперимента.Одно животное погибло в течение 1 суток после эксперимента, вероятно, ввидупередозировки препаратов для анестезиологического пособия.
При вскрытиипризнаков кровотечения не обнаружено, признаков пневмоторакса также невыявлено (рис. 16, 17). Выведение оставшихся 3 крыс из экспериментавыполнено через 3 месяца после операции.Выполнена лапаротомия, культя резецированного рога матки состоятельна,припаяна к брюшине, при ревизии надпеченочного пространства во всех 3случаях макроскопически выявлялись участки эндометрия, адгезированные ккуполу диафрагмы и поддиафрагмальной поверхности печени. При этом, состороны грудной полости признаков прорастания диафрагмы, перфораций невыявлялось (рис.
18,19). Сделано предположение о недостаточности сроковнаблюдения и необходимости изучения гормональной стимуляции.Рисунок 16 - Вид брюшной полости после выведения животного изэксперимента56Рисунок 17 - Вид участков рога матки на диафрагме через 1 сутки послеподшиванияРисунок 18 - Вид купола диафрагмы со стороны грудной полостиРисунок 19 - Участок эндометрия, фиксированный к диафрагме со стороныбрюшной полости57Второй этапВ группе №1 (животные без гормональной стимуляции) из 14 животных, у 1крысы выявлен поддиафрагмальный абсцесс в области операции, у 13выявлялись сращения между печенью и диафрагмой, у 1 в толще сращениисформировалась киста с прозрачным содержимым около 0,2 мл. Примикроскопическомисследованиирезецированныхучастковэндометрийвыявлен в 9 случаях (рис. 20).
В стенке кисты эндометрия не выявлено.Рисунок 21 - Участок диафрагмы и ткань эндометрия: 1-ткань диафрагмы, 2эндометрий, 3- фиброзная тканьВ группе №2 (оперированные животные со стимуляцией эстрогенами) из 13животных у 2 в зоне операции выявлены абсцессы без признаков прорыва вплевральную полость (рис. 22).58Рисунок 22 - Поддиафрагмальный абсцессУ оставшихся 11 крыс со стороны брюшной полости также макроскопическиопределялись сращения между диафрагмой и поверхностью печени, у 9 прирезекции этих участков определялся пересаженный участок рога матки, а у 2отмечалось наличие кист в зоне операции с прозрачным содержимым.Микроскопически в этой группе эндометрий в зоне операции выявлен у 11животных, в том числе, в стенке 2 кист выявлялись эндометриальные железы истрома (рис.
23).Рисунок 23 - Эндометриоидная киста: 1-ткань печени, 2- строма эндометрия,3- просвет кисты59Таблица 1 - Морфологические изменения, выявленные в экспериментеВыявленные измененияГруппы животныхБезСостимуляции стимуляциейМакроскопическиеАбсцесс12Спайки129Спайки и кисты1291104Микроскопические ЭндометриальныежелезыПризнаки инвазиив мышечный слойдиафрагмыМикроскопически эндометрий стимулированных животных отличался отэндометрия крыс из нестимулированной группы более высокими клетками,большим количеством митозов и более развитыми железами (рис.
24,25)Рисунок 24 - Эндометриальные железы с признаками деления клеток60Рисунок 25 - Эндометриальные железы с признаками деления клетокСамой главной находкой вгруппе стимулированных животных явиласьинвазия эндометрия в толщу диафрагмы (рис. 26).Рисунок 26 - Инвазия эндометрия в мышечный слой диафрагмы: 1мышечные волокна диафрагмы, 2-участок печени, 3-ткань эндометрия состромой и железамиОднако, сквозного прорастания диафрагмы ни у одного животного выявленоне было ни макро-, ни микроскопически.61Вгруппе№3(стимулированныеживотныебезоперации)из4стимулированных животных признаков спонтанно развившегося эндометриозавыявлено не было, несмотря на гормональную стимуляцию.
При ревизиибрюшнойполостивобластималоготазаидиафрагмыпризнаковэндометриоидных очагов не обнаружено.Таким образом, в ходе работы была создана модель эндометриозадиафрагмы,подобраноэкспериментаидозылабораторноелекарств.Вживотное,ходеотработанапроверкимоделитехникаотмеченажизнеспособность трансплантированного эндометрия и даже признаки егороста с сохранением эндометриальной выстилки и тенденцией к прорастанию вмышечный слой диафрагмы. Особенно эти изменения были выражены у крыс,перенесшихпослерезультатыкосвеннооперациигормональнуюподтверждаютэндометриоз-ассоциированногостимуляцию.анатомическуюпневмоторакса,теориюдоказываяПолученныепатогенезаспособностьнебольших участков эктопированного эндометрия к инвазии и пролиферациидаже в отсутствие питающего сосуда.62Глава 4. Результаты клинического исследования.4.1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
