Диссертация (1144820), страница 51
Текст из файла (страница 51)
К таким микроРНК относятся и 11 микроРНКC19MC кластера. Для восьми из них (miR-515-3p, miR-515-5p, miR-516a-5p,miR-518c-3p, miR-518f-3p, miR-519e-5p, miR-520a-3p, miR-524-3p) ранеебыла показана повышенная экспрессия в плацентах женщин с гестозом всравнении с контролем (Ishibashi et al., 2012; Wang et al., 2012; Zhu et al.,2009; Xu et al., 2014), для трех (miR-518a-3p, miR-518a-5p, miR-518e-3p) –такая ассоциация была выявлена впервые.Следует отметить, что некоторые микроРНК ранее были обнаруженыне только в плаценте, но и в крови беременных женщин. MiR-515-3p, miR515-5p, miR-518c-3p и miR-518e-3p находили в плазме беременных женщин,но не детектировали на следующий день после родоразрешения (Miura et al.,2010).
Концентрация miR-515-5p, miR-518a-3p, miR-518a-5p, miR-518e-3p,miR-519e-5p и miR-524-3p в сыворотке крови была существенно выше втретьем триместре беременности в сравнении с небеременными женщинами340341(Gilad et al., 2008). Янг с коллегами (Yang et al., 2011) обнаружилповышенную экспрессию miR-518e в сыворотке крови пациенток спреэклампсией по сравнению с контролем, а Ли с коллегами (Li et al., 2013)выявил подобные изменения для miR-515-3p. Эти находки свидетельствуют отом, что микроРНК могут стать удобными прогностическими биомаркерамиразвития гестоза.В дополнении к микроРНК C19MC кластера в плаценте рожениц сгестозом на фоне гипертонии была выявлена дисрегуляция еще восьмимикроРНК (miR-210, miR-195, miR-223, miR-1, miR-34c, miR-193b, miR-let7f, miR-31).MiR-210, ответственная за митохондриальную функцию плаценты(Muralimanoharan et al., 2012), является одним из самых значимых маркеровгестоза (Pineles et al., 2007; Zhu et al., 2009; Enquobahrie et al., 2011; Ishibashiet al., 2012; Xu et al., 2014; Luo et al., 2014; Weedon-Fekjær et al., 2014).
Такаясвязь обнаружена во многих работах. Уровень экспрессии miR-210существенно повышен в плаценте больных гестозом женщин по сравнению снормой (Gunel et al., 2011; Zhang et al., 2012; Xu et al., 2014). Было так жеустановлено, что повышенная экспрессия miR-210 может быть индуцированагипоксией тканей плаценты, а микроРНК miR-210 является маркером именноэтого состояния (Zhu et al., 2009). Важно, что локальная гипоксия и ишемияплацентыявляютсяважнымпатофизиологическиммеханизмом,запускающим развитие гестоза (Zhu et al., 2009). Таким образом, выявленныев данной работе закономерности не только подтверждают полученные ранееданные, но и конкретизируют связь повышенной экспресии miR-210 сразвитием гестоза на фоне имеющейся гипертонии.На сегодня существует много работ, посвященных исследованиюпотенциальных мишеней для miR-210 (Zhang et al., 2012; Ishibashi et al., 2012;Luo et al., 2014).
Показано что повышенная экспрессия данной микроРНКподавляет миграцию и способность к инвазии клеток трофобласта,воздействуя на белки эфрин А3 и гомеобокс А9, ответственные за клеточную341342миграцию и ремоделирование сосудистой стенки (Zhang et al., 2012).Абберантная экспрессия miR-210 может влиять на развитие гестоза,воздействуя на сигналинг модулирующего фактора 1 кальциевого канала KCMF1 (Luo et al., 2014). Данная микроРНК (наряду с выявленной miR518c), согласно компьютерному анализу, является одной из пяти микроРНК,которые могут подавлять экспрессию одного из самых важных белков вразвитии плаценты - гидроксистероид 17-β-дегидрогеназы 1 (HSD17B1),конвертирующей эстрон в 17-β-эстрадиол (Ishibashi et al., 2012; Zhao et al.,2013). Известно, что уровень этого белка в плазме крови на срокахбеременности 20-23 и 27-30 недель существенно ниже у женщин с гестозомпо сравнению женщинами, имеющими физиологическую беременность(Ishibashi et al., 2012).
Полученные результаты указывают на перспективуиспользования комплексных биохимических и молекулярно-генетических(микроРНК) исследований в ранней профилактике гестоза (Zhao et al., 2013).В настоящем исследовании в плаценте рожениц с гестозом на фонегипертонии обнаружено снижение экспрессии miR-195, что согласуется сданными ряда авторов (Zhu et al., 2009; Bai et al., 2012; Xu et al., 2014).Однако, наши результаты противоречат исследованию плацент от рожениц стяжелым гестозом, где уровень экспрессии данной микроРНК напротивповышен (Hu et al., 2009). Повышенная экспрессия miR-195 провоцируетинвазию трофобласта путем репрессирования секреции белка ACVR2A (Baiet al., 2012). Сниженная экспрессия данной микроРНК приводит кувеличению синтеза белка ACVR2A, следствием чего является нарушениеинвазии трофобласта и процесса ремоделирования спиральных артерий, чтохорошо согласуется с центральной патофизиологической гипотезой развитиягестоза (Bai et al., 2012).
Данный факт особенно важен, так как ген ACVR2Aявляется одним из генов-кандидатов преэклампсии (см. п. 3.2.1.2.2 и 4.2.2.2).Согласно базе данных miRDB (http://mirdb.org), мРНК гена ACVR2Aможет быть мишенью для miR-223, уровень экспрессии которой такжеснижен в плаценте женщин с гестозом. Сниженная экспрессия miR-223 на342343фоне преэклампсией показана ранее во многих работах (Zhu et al., 2009; Yanget al., 2011; Ishibashi et al., 2012; Choi et al., 2013; Xu et al., 2014) в тканяхплаценты, но и при анализе крови беременных женщин с патологией (Yang etal., 2011; Li et al., 2013). Более того, низкий уровень экспрессии данноймикроРНК более характерен для раннего гестоза (Weedon-Fekjær et al., 2014).Благодаря связи miR-195 и miR-223 с регуляцией экспрессии гена ACVR2A,их исследование представляется одним из приоритетных направлений впоиске наиболее значимых маркеров гестоза.Пониженная экспрессия miR-34c при осложненной беременности внашем исследовании соответствует данным литературы (Enquobahrie et al.,2011; Wang et al., 2012).
MiR-34c принадлежит к семейству miR-34, котороепринимают участие в p53-зависимой супрессии пролиферации клетокэндометрия, что критично при развитии эндометриоза, но может иметь изначение в развитии гестоза (Enquobahrie et al., 2011).Гиперэкспрессия микроРНК miR-1, обнаруженная нами в плацентахженщин с гестозом на фоне гипертонии, коррелирует с аналогичныминаходками в работах Зу и Энкубахри (Zhu et al., 2009; Enquobahrie et al.,2011). Высказано предположение, что микроРНК miR-1 потенцирует рискразвития гестоза, воздействуя на кальциевый сигналинг (Enquobahrie et al.,2011).
Другие исследователи считают, что влияние mir-1 на развитиезаболевания реализуется через ген TIMP3 (Lim et al., 2005). Ген TIMP3который кодирует ингибитор 3 металлопептидаз, экспрессирующихся вплаценте и влияющих на инвазию клеток трофобласта (Xiang et al., 2013).Наши результаты подтверждают данные о связи повышеннойэкспрессией miR-193b в плаценте с развитием гестоза (Ishibashi et al., 2012;Xu et al., 2014).
Согласно последним данным, ген PLAU, кодирующийурокиназподобный активатор плазминогена, является одной из важныхмишеней для miR-193b (Ikeda et al., 2012). Сниженная экспрессия генаприводит к уменьшению фибринолитической активности в сосудах плаценты(Buchholzetal.,2003).Активностьданногофакторарегулируется343344ингибитором активатора плазминогена (PAI1). Баланс факторов PLAU иPAI1 в материнской и плодовой отделах плаценты является необходимымусловием нормальной инвазии эндометрия трофобластом зародыша (Lam etal., 2009).Согласно нашим данным, другая микроРНК - let-7f, экспрессируетсязначительно меньше в плаценте у женщин с гестозом по сравнению сконтролем. Это хорошо согласуется с данными других авторов, а также стем, что уровень микроРНК let-7f снижен в крови женщин с гестозом (Yanget al., 2011).
В каком именно патогенетическом звене гестоза принимаетучастие let-7f-5p не ясно. Известно, однако, что отдельные члены семействаlet-7 участвуют в регуляции таких важных биологических процессов какпролиферация, апоптоз, восполение (Yang et al., 2011).Увеличение экспрессии miR-31 в цитотрофобласте женщин с гестозомподтверждает вклад данной микроРНК в риск развития этого заболевания(Ishibashi et al., 2012). Участие MiR-31 в развитии гестоза может происходитьчерез активацию гипоксии, воздействуя на продукт гена - фактораиндуцибильного гипоксией (FIH) (Liu et al., 2010), и путем сниженияэкспрессии интегрина β3 (Augoff et al., 2011).В проведенном исследовании отмечены изменения уровня экспрессиикак микроРНК кластера C19MC, так и других микроРНК. Так, уровеньэкспрессии miR-135b и miR-98 был снижен у пациенток с гестозом посравнению с контрольной группой, а miR-4532 – напротив, повышен.
Вкладданных микроРНК в риск развития гестоза можно обосновать с помощьюбиоинформатического подхода. Среди их генов-мишеней имеются гены,ассоциированныеспатогенезомпреэклампсии.Например,miR-98,контролирует экспрессию гена IL6, повышенная концентрация продуктакоторого обнаружена в плазме крови женщин с гестозом и в пуповиннойкрови плаценты (Tosun et al., 2010). Мишенью miR-135b, согласно базеданныхmiRDB(http://mirdb.org),являетсяРо-ассоциированнаясуперспирализованная киназа 2 (ROCK2).
Концентрация данного фермента в344345плацентах при гестозе повышена (Ark et al., 2005). Ранее методом сцепленияген ROCK2 был картирован как ген-кандидат преэклампсии (Peterson et al.,2009). MiR-135b экспрессируется как в плаценте, так и в крови матери (Chimet al., 2008), что является дополнительным аргументом в пользу важной ролиданной микроРНК в патологии беременности.
MiR-4532 может влиять наразвитие гестоза через экспрессию гена COL1A1 - главного компонентавнеклеточного матрикса (He et al., 2014). Показано, что снижение экспресиимРНК гена COL1A1 коррелирует с развитием ранних форм преэклампсии (Heet al., 2014). Несмотря эти данные и существующие гипотезы, подтверждениевклада miR-98-5p, miR-135b-5p, и miR-4532 в развития гестоза, требуетдальнейших исследований.В нашем исследовании не выявлено различий между уровнемэкспрессии miR-155 при гестозе в сравнении с нормой, установленные ранее(Zhao et al., 2013). Хотя данную микроРНК рассматривают в качестве одногоизтриггеровренин-ангиотензиновойсистемы-miR-155подавляетэкспрессию гена AGTR1 (Yang et al., 2013).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
