Диссертация (1144820), страница 46
Текст из файла (страница 46)
Последняя находка особенно интересна, всвязи с тем, что между группами беременных с патологией и без нее отличийпо данному маркеру обнаружено не было (Глотов и др., 2011). Достоверноепреобладание генотипа Т/С у беременных в сравнении с популяционнойвыборкойпозволяетвысказатьрядпредположений.Известно,чтоэндотелиальная NO-синтаза (NOS3) участвует в метаболизме оксида озота(NO)., которому отводитсяпроцессах,включаяключевая роль во многих биологическихвазодилатацию,нейротрансмиссию,агрегацияютромбоцитов, реакцию иммунной системы, регуляция тонуса гладких мышци др. (Lowenstein et al., 1994, Nakaki, 1994).
Оксид азота обеспечиваетнормальныефункцииэндометрияматки,участвуетвпроцессахимплантации, в частности, определяет восприимчивость эндометрия кплодному яйцу (Duran-Reyes et al., 1999; Chwalisz, Garfield, 2000). Неисключено, что выявленные различия между беременными и группойдоноров могут быть связанны с тем, что генотип (-786T>C) гена NOS3является оптимальным для имплантации яйцеклетки. Показано, что NOдоноры могут быть полезны для повышения рождаемости, в то время какNO-ингибиторы перспективны для контрацепции (Maul et al., 2003). Местнаятерапия оксидом азота больных эндокринной формой бесплодия приводит кповышению секреции фолликулостимулирующего гормона и способствуетвосстановлению двухфазного цикла и овуляции (Грищенко и др., 2010).Можно предполагать наличие оптимального уровня оксида азота в тканях314315матки, который способствуют имплантации и наступлению беременности.
Неисключено, что у женщин, гетерозиготных по T/C полиморфизму (-786T>C)гена NOS3 уровень оксида азота в эндометрии и в мышечных клеткахсосудов матки является оптимальным для наступления беременности. И какбыло показано ранее, у женщин с различными генотипами по гену NOS3выявлены существенные различия в частоте повторных выкидышей (Tempferet al., 2001; Беспалова, 2007). Необходимы дальнейшие специальныеисследования для проверки данного предположения.4.2.1.1.2. Риск артериальной гипертензии и метаболического синдрома иожирения.Сравнительный анализ частот комбинаций аллелей и аллелей геновкандидатов у детей с АГ и детей контрольной группы позволил выявитьассоциацию с АГ одного из генов-кандидатов – гена AGTR2 (p<0,001).Почемуводномслучаеобнаруженыотличияумальчиков(гипертония), а в другом только у девочек (МС), на сегодняшний деньобъяснить сложно.
Однако факт того, что полиморфизм данного гена играетважную роль в развитии заболеваний, связанных с повышенным АД, невызывает сомнения. Ген рецептора 2 к ангиотензину II (AGTR2) кодируетбелок, который опосредует вазодилататорную функцию: натрийуретическоедействие, высвобождение NO и простациклина и антипролиферативноедействие. Полиморфный вариант 3123С>A, тесно сцеплен с вариантом+1675G>A в интроне 1, регулирующим начало транскрипции.
Наличие Ааллели,такимобразом,по-видимому,сопряженосболеенизкойэффективностью транскрипции гена (Jones et al., 2003a), и, как следствие, сосниженной вазодилататорской способностью. Данные об ассоциации данногополиморфизма гена AGTR2 с развитием АГ у мальчиков и МС у девочекнами получены впервые.315316Различия в частотах вариантных аллелей и их комбинаций междувыборкой детей, больных АГ или МС и контрольной выборкой приразделении по полу были отмечены и для других генов.В частности, было показано, что существуют статистически значимыеразличия в частотах аллелей гена APOE между девочками с АГ ишкольницами контрольной группы. Аналогичные закономерности былиустановлены и для полиморфизма -786T>C по гену NOS3. У школьниц былообнаружено преобладание генотипа T/C по сравнению с девочками,больными АГ (p=0,003; ОШ=0,12).
У девочек с МСО обнаруженопреобладание аллели С гена LPL в отличие от контрольной группы школьниц(p=0,048; ОШ=2,35).При изучении распределения частот комбинаций аллелей для генаAGTR1 раздельно по полу у мальчиков контрольной группы выявленопреобладание протективного генотипа A/C по сравнению с больными АГ(p=0,033; ОШ=0,55).Обнаруженныегенетическихзакономерностимаркеровдополнительныхвразвитиекомплексныхподчеркиваютзаболеваний,исследованийввкладданныходнакотребуютсвязиснебольшойстатистической значимостью устновленных закономерностей и с учетомвозможного эпистаза (см. п.
1.4.1-1.4.2 и 4.2.1.4).4.2.1.2. Эффективность полногеномного скрининга для оценки рискаартериальной гипертензии у детей.Полногеномные ассоциативные исследования (GWAS – Genome WideAssociationStudies),начатыевскорепослезавершенияпрограммы«Гаплоидный геном» в 2000-м г., сыграли важную роль в идентификациигенов-кандидатов различных МФЗ.
На основании GWAS исследований быласозданы генетические карты многих болезней, в том числе и для АГ(Schnabel et al., 2012). Однако, несмотря на то, что такие локусы были316317установлены на больших выборках больных и контроля, имеется большоечисло исследований, противоречащих этим результатам (Zuk et al., 2012).Проведенный в данной работе анализ генетических маркеров АГ удетей, подтверждает это мнение (Kanaeva et al., 2014).Данное несоответствие может быть вызвано разными причинами. Вопервых, ограничениями самого метода GWAS (Speicher et al., 2010). Внастоящее время с помощью этого метода проанализировано более 300 МФЗ,что позволяет подвести некоторый итог этих исследований, оценить их вкладвпониманиеприродызаболеваний(http://www.ebi.ac.uk/fgpt/gwas/30.03.2014). Действительно, методом GWAS идентифицировано множествоновых локусов, ассоциированных с МФЗ.
Однако большинство такихассоциаций (до 60 %) представляет собой однонуклеотидные замены вмежгенных участках генома, в интронных областях, в генах, кодирующихрегуляторные РНК (Kathiresan et al., 2009). Такие ассоциации невозможновыявить традиционным методом функционально картирования, которыйбазируется на знаниях о предполагаемой функции продуктов этих генов визучаемом патологическом процессе (Zondervan et al., 2012). Непременнымусловием проведения GWAS-исследований является наличие большихвыборок пациентов с точно установленным диагнозом и соответствующейконтрольной группы, а также контрольных образцов для многократноготестирования и популяционной стратификации. Следовательно, метод GWASиз-забольшогомассивастатистическихданныхявляетсядовольнотрудоемким и обладает огромным потенциалом для получения ложноположительных результатов (Pearson, 2008).
Не случайно результаты GWASзачастую плохо воспроизводятся и не подтверждаются последующимиисследованиями(Zondervanetal.,2012).Приэтомлокусы,идентифицированные с помощью GWAS, могут объяснить лишь небольшуючасть (5–10 %) наследственного риска развития заболевания (Аульченко,2010; Speicher, 2010). И даже применение новых статистических подходов317318(метод фенотип-генотип корреляций (PCGC), значимо не позволяет«ликвидировать» проблему «исчезающей наследуемости» (Golan et al., 2014).Во-вторых, отсутствие статистически значимых отличий в нашемисследовании может быть обусловлено тем, что повышение АД в детскомвозрасте рассматривается как физиологическая реакция, направленная наподдержание кровоснабжения на оптимальном уровне при быстромувеличении роста и массы тела (Александров, 1997).
А значит, в качествегенов-кандидатов «детской гипертонии» необходимо рассматривать толькоте гены, белковые продукты которых контролируют физиологическиепроцессы (Образцова и др., 2013).В-третьих, следует отметить, что большинство ассоциативныхисследований проведены на когортах взрослых, а не детей. На сегодняшнийдень есть только одна работа, в которой у детей был изучен один из 4-хпроанализированных нами локусов (Wu et al., 2012). В этой работеустановлено, что полиморфизм rs11191548 ассоциирован с повышенным АДу девочек Китая.
Однако, учитывая существенные различия частоткомбинаций аллелей по маркеру rs11191548 в нашей выборке и в китайскойпопуляции(χ2>48,11;p<0,0001),можнопредполагать,чтоданныйполиморфизм, скорее, отражает этноспецифические особенности, а неявляется маркером патогенеза данного заболевания.По всей видимости, все перечисленные обстоятельства и объясняюттот факт, что в данной работе не было обнаружено достоверной ассоциациимежду ранее найденными методом GWAS маркерами и риском развития АГу детей, проживающих в Санкт-Петербурге.4.2.1.3. Корреляционный анализ генетических и клинических показателей.Одной из задач настоящей работы был анализ генетического сходства иразличий при одних и тех же клинических симптомах, общих для изученныхзаболеваний.
Основным общим клиническим симптомом при гестозе, АГ иМСО является повышенное артериальное давление, регистрируемое по318319показателям САД и ДАД. Предполагалось, что корреляционный анализгенетических и клинических показателей позволит оценить в какой мерегестоз, АГ и МСО являются синтропными, то есть имеют общиемолекулярные мезанизмы патогенеза (см. п. 1.5.4), о наличии которыхкосвенно свидетельствуют результаты исследования генных сетей этихзаболеваний (см.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
