Диссертация (1141404), страница 21
Текст из файла (страница 21)
nivalisпредставлены в таб. 5.4.2.Таблица. 5.4.2.Метрологические характеристики методик количесвенного опредления БАС вНГМ двух видов подснежика (n = 5, f = 4, P = 95%, t(f,P) = 2,7764)ОбъектБАСG. woronowiiнеохлорогеноваяхлорогеноваякриптохлорогеноваяхлорогеноваякриптохлорогеноваяG. nivalisХ3,78±0,301,80±0,140,86±0,073,04±0,240,13±0,01S0,05860,01330,00340,03660,00010,24200,11550,05810,19140,01000,10820,05160,02600,08560,0045ΔXE,%0,300,140,070,240,017,947,958,407,819,551375.5. Изучение органических кислот НГМ подснежниковСодержание ОК в НГМ G.
woronowii составило 86,84±1,74 мг/100 мл, а вНГМ G. nivalis 124,89±1,79 мг/100 мл. Основными обнаруженными ОК НГМявлялись: янтарная, яблочная кислота и щавелевая кислоты (рис. 5.5.1, 5.5.2),результаты определения представлены в таб. 5.5.1.Таблица 5.5.1.Органические кислоты НГМ G. woronowii и G.
nivalis (M±m, n=5)ВремяОрганическаяудерживания, tRкислота6,4янтарная кислота5,2яблочная кислота11,5щавелевая кислотаСуммаСодержание, мг/ 100 мл НГМG. woronowiiG. nivalis61,19±0,8164,25±0,8522,71±0,7432,17±0,682,94±0,1928,47±0,2686,84 ±1,74124,89±1,79Рис. 5.5.1. ВЭЖХ-УФ хроматограмма органических кислот НГМ G. woronowii:яблочная, янтарная, щавелевая кислоты.Рис.
5.5.2. ВЭЖХ-УФ хроматограмма ОК НГМ G. nivalis: яблочная,янтарная, щавелевая кислоты.138Метрологические характеристики методик количесвенного опредления ОКи ГКК в НГМ G. woronowii и G. nivalis представлены в таб. 5.5.2.Таблица. 5.5.2.Метрологические характеристики методик количесвенного опредления ОКв НГМ двух видов подснежиков (n = 5, f = 4, P = 95%, T(f,P) = 2,776)ОбъектG. woronowiiG. nivalisОКянтарнаяяблочнаящавелеваяянтарнаяяблочнаящавелеваяХ61,19±0,8122,71±0,742,94±0,1964,25±0,8532,17±0,6828,47±0,26SΔXE,%0,42320,351530,02300,47050,65060,59290,15170,68600,29090,26520,06790,30680,810,740,190,851,323,246,401,330,29730,04910,54520,22160,24380,09910,680,282,100,975.6. Изучение аминокислот НГМ подснежниковХроматограммы аминокислот НГМ G.
woronowii и G. nivalis изображены нарис. 5.6.1 и 5.6.2. Рассчитанное количественное содержание аминокислот НГМ G.woronowii и G. nivalis представлено в таб. 5.6.1 и на рис. 5.6.3.Установлено, что в НГМ G. woronowii и G. nivalis содержится 20аминокислот, из которых 8 незаменимых (№3 Val, №4 Ile, №5 Leu,№7 Thr,№ 10Lys, №11 OH-Lys, №15 Met, №16 Phe) и 12 заменимых (№ 1 Gly, № 2 Ala, № 6 Ser,№ 7 Thr, № 8 Asp, № 9 Glu, № 12 Arg, № 13 Orn, № 14 Cys, № 17 Tyr, № 18 His, №19 Pro, № 20 OH-Pro).По содержанию аминокислоты могут быть распределены следующимобразом (по убыванию): в НГМ G.
woronowii – Asp > Glu > Arg > Ala > Leu > Ser >Lys > Pro > Gly > OH-Lys > Thr > Val > Phe > Ile > OH-Pro > His > Met > Tyr > Orn> Cys; в НГМ G. nivalis – Asp > Glu > Arg > Leu > Pro > Ala > Ser > Lys > OH-Lys> Gly > Thr > Val > Ile > Phe > His > Met > Tyr > OH-Pro > Orn > Cys. Основнымиаминокислотами НГМ двух видов подснежников являются три заменимыеаминокислоты: аспартат, глутамат и аргинин.24681012141618202224262832ch1ch2163032Arg 41.523034Рис.
5.6.2. Хроматограмма аминокислот НГМ G. nivalis.34363mHis 6.45аммиак 68.43Thr+ 7.39Ser 11.4236Arg 19.693mHis 1.57His 2.61Orn 0.30Lys 7.90EA 2.92OHLys 5.91Phe 4.41Tyr 1.27Leu 9.75Ile 4.90Met 1.55Cys 0.15Val+ 7.50Ala 20.47Gly 13.24Pro 9.0818 20His 3.8028Lys 13.5026EA 3.1224OHLys 12.1622Orn 0.4620Phe 6.7918Tyr 2.2816Leu 19.6614Ile 10.5112Met 2.7710Val+ 13.628Cys 0.131679 mV6Ala 24.474Glu 51.952Asp 75.753Gly 23.99Thr+ 14.31Ser 19.41GSH0.69OHPro3.77аммиак 104.57Glu 68.36Asp 106.731679 mVPro 18.63OHPro 0.9513928ch1ch238384040minРис. 5.6.1. Хроматограммы аминокислот НГМ G. woronowii.25min140Рис.
5.6.3. Содержание аминокислот в НГМ G. woronowii и G. nivalis (%·104): №1– НГМ G. woronowii, №2 – НГМ G. nivalis.Таблица 5.6.1.Компонентный состав и содержание аминокислот в НГМG. woronowii и G. nivalis (в %)№НазваниеаминокислотыОбозначение1.ГлицинGly G2.АланинAla Aα-аминопропионовая2-аминопропановая3.Валин*Val Vαаминоизовалериановаяα-амино-β-этил-βметилпропионоваяα-аминоизокапроновая2-амино-3метилбутановая2-амино-3метилпентановая2-амино-4метилпентановая2-амино-3гидроксипропановая4.5.6.Изолейцин*Лейцин*СеринХимическое наименованиеТривиальноеIle ILeu LSer SСистематическоеАлифатические моноаминомонокарбоновыеα-аминоуксуснаяаминоэтановаяα-амино-βоксипропионоваяСодержание вНГМ, %G.G. nivalisworonowii0,00500,00780,00910,00950,00440,00690,00320,00600,00640,01120,00600,00901417.Треонин*Thr T8.АспартатAsp Dα-амино-β2-амино-3оксимаслянаягидроксибутановаяАлифатические моноаминодикарбоновыеα-аминоянтарнаяаминобутандиовая9.ГлутаматGlu Eα-аминоглютаровая10.
Лизин*Lys K11. Оксилизин*12. АргининOHLysArg R13. Орнитин14. Цистеин15. Метионин*16. Фенилаланин*17 ТирозинГистидин18. Пролин19. Оксипролин20. ЭтаноламинСуммаOrnCys CMet MPhe, FTyr YHis H2аминопентандиоваяАлифатические диаминомонокарбоновыеα,ε2,6диаминокапроноваядиаминогексановаяα,ε-диамино-σ2,6-диамино-5оксикапроноваяоксигексановаяα-амино-σ-гуанидил-н- 2-амино-5валериановаягуанидинопентановаяα-, δ2,5диаминовалериановаядиаминопентановаяАлифатические серосодержащиеα-амино-β2-амино-3тиопропионоваямеркаптопропановаяα-амино-γ-метилтио-н- 2-амино-4масляная(метилтио)бутановаяАроматическиеα-амино-β2-амино-3фенилпропионоваяфенилпропановаяα-амино-β2-амино-3-(4оксифенилпропионова гидроксифенил)япропановаяГетероциклическиеα-амино-β2-амино-3-(1Нимидазолилпропионов имидазол-4 ил)аяпропановаяпирролидин-αпирролидин-2карбоноваякарбоноваяOH-Pro β-оксипирролидин-α3-оксипирролидинкарбоновая2-карбоноваяАминоспиртыEA0,00440,00760,07100,04420,05030,03340,00580,00860,00480,00860,01720,03140,00030,00030,00020,00010,00120,00180,00360,00490,00120,00180,00200,00260,00520,01000,00250,00050,00070,00060,20430,2069Pro P* - незаменимые аминокислоты1425.7.
Изучение углеводов НГМ подснежниковПолученные ВЭЖХ-хроматограммы свободных углеводов в НГМ G.woronowii и G. nivalis представлены на рис. 5.7.1, связанных углеводов – на рис.5.7.2. Результаты определений содержания свободных и связанных углеводовНГМ G. woronowii и G. nivalis описаны в таб. 5.7.1 и 5.7.2 [35, 134].12Рис. 5.7.1. ВЭЖХ-хроматограммы свободных углеводов НГМ G. woronowii(1), G. nivalis (2): fructose – фруктоза, glucose – глюкоза, sucrose – сахароза,glycerol – глицерин.Таблица 5.7.1.Содержание свободных углеводов в НГМ G.
woronowii и G. nivalisНГМG. woronowiiG. nivalisСодержание углеводов,%фруктозаглюкозасахароза0,0230,0250,0030,0280,0340,001сумма0,0510,06314312Рис. 5.7.2. ВЭЖХ-хроматограммы связанных углеводов в НГМ G. woronowii(1) и G. nivalis (2): mannose – манноза, glucosamine – глюкозамин, glucose –глюкоза, galactose – галактоза.Таблица 5.7.2.Содержание связанных углеводов в НГМ G. woronowii и G. nivalisНГМарабинозаG. woronowiiG. nivalis––Пентозыксилоза––Содержание углеводов,%Гексозысумма глюкоза галакто маннозаза–0,1770,014––0,1460,0120,005сумма0,1910,163Содержание полисахаридов в НГМ G.
woronowii и G.nivalis представлено в таб.5.7.3.Таблица 5.7.3.Содержание полисахаридов в НГМ G. woronowii и G. nivalisНГМСодержание полисахаридов,%G. woronowiiG. nivalis0,231±0,0110,282±0,0141445.8. Изучение элементного состава НГМ подснежниковРезультаты определения катионов в НГМ двух видов подснежниковпредставлены в таблице 5.8.1.Таблица 5.8.1Содержание катионов в НГМ G. woronowii и G. nivalisКатионK+Ca2+Na+Mg2+Al3+РезультатыСодержание, ppm (мг/л)G. woronowiiG. nivalis828,3867,321,426,267,353,543,469,665,427,4определениятяжелыхметалловвНГМдвухвидовподснежников представлены в таблице 5.8.2.Таблица 5.8.2.Содержание тяжелых металлов и мышьяка в НГМ G. woronowii и G.
nivalisЭлементG. woronowiiPbCdHgAs< 0,03< 0,010,005 ± 0,006< 0,03Содержание, ppm (мг/л)Предельно допустимоеG. nivalisсодержание поОФС.1.4.1.0019.15«Настойки»< 0,03Не более 0,001 %(10 мг/л)< 0,010,004 ± 0,001< 0,03Содержание тяжелых металлов и мышьяка в исследуемых НГМ двух видовподснежниковсоответствуетдокументации (ОФС.1.4.1.0019.15).требованиямдействующейнормативной145Таким образом, нами исследован комплекс БАС в НГМ G. woronowii и G.nivalis. Данные по содержанию основных групп БАС представлены в таблице5.8.3.Таблица 5.8.3.Содержание основных БАС НГМ G.
woronowii и G. nivalisСодержание, %Группа БАСG.woronowiiG.nivalisАмариллисовые алкалоиды (СФМ)0,0840,063Флавоноиды0,1180,040ГКК0,0060,003ОК0,0860,124Аминокислоты0,2040,208Связанные сахара0,1910,163Свободные сахара0,0510,063ПСХ0,2310,282Из таблицы 5.8.3 видно, что в НГМ G. woronowii и G. nivalis переходят всегруппы БАС, входящие в состав ГомЛРС. Таким образом, НГМ являетсякомплекснымпрепаратом,определяется всей суммой БАС.фармакотерапевтическийэффекткоторого146ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 51. В сравнительном аспекте исследован химический состав НГМ двух видовподснежников методом ГХ-МС.
13 соединений идентифицировано в НГМподснежника Воронова, 42 соединения – в НГМ подснежника белоснежного.Общие компоненты двух настоек – этил-α-D-рибозид, этил-α-D-глюкопиранозид,линолевой кислоты этиловый эфир и 2,3-дигидро-3,5-дигидрокси-6-метил-4Hпиран-4-он.2. В ходе анализа амариллисовых алкалоидов в НГМ подснежникаВоронова идентифицированы: галантамин, 2,4-дидегидро-2-десгидрокси-ликорин,тацеттин, галантин, ликорин; в НГМ подснежника белоснежного определены:микелалбин, 6α-деокси-тацеттин, 6α-дезокси-6-метокси-кривеллин, тацеттин,ликорин.
Сумма амариллисовых алкалоидов (метод СФМ) в НГМ подснежникаВоронова в пересчёте на галантамин составила 0,084±0,005 %, а в НГМподснежника белоснежного в пересчёте на ликорин – 0,063±0,003 %.3. Определён флавоноидный профиль НГМ двух видов подснежниковметодом УЭЖХ-УФ-МС. В НГМ подснежника Воронова идентифицированы:гиперозид, кверцетин, изорамнетин (или рамнетин), изорамнетин-O-софорозид,изорамнетин-3-O-галактозид. В НГМ подснежника белоснежного определены:кверцетин-3-галактозил-(1→6)-галактозид(кверцетин-3-O-софорозид),кемпферол-3-галактозил-(1→6)-галактозид(кемпферол-3-O-софорозид).Агликонами флавоноловых гликозидов являются кверцетин (0,075±0,0047%) иизорамнетин (0,043±0,0028%) в НГМ подснежника Воронова, кверцетин(0,029±0,0026%) и кемпферол (0,011±0,0009%) в НГМ подснежника белоснежного(метод ВЭЖХ-УФ, ТСХ).4.