Диссертация (1141404), страница 16
Текст из файла (страница 16)
nivalisпредставлены в таблице 4.3.2.Таблица 4.3.2.Метрологическая характеристика методик количесвенного опредления БАС вГомЛРС двух видов подснежика (n = 5, f = 4, P = 95%, t(f,P) = 2,7764)ХОбъектБАСG. woronowiiнеохлорогеноваяхлорогеноваякриптохлорогеноваяхлорогеноваякриптохлорогеноваяG. nivalisS51,7±4,124,6±2,07,8±0,658,2±4,73,8±0,311,0612,6990,24314,4970,0763,3261,6430,4933,8080,2761,4870,7350,2201,7030,124ΔXE,%4,132,040,614,720,347,988,317,848,129,024.4. Изучение органических кислот ГомЛРС подснежниковОрганические кислоты (ОК) являются классом соединений, проявляющихширокийдиапазонбиологическойактивности.Дляниххарактернапротивовоспалительная, иммуномодулирующая, антиоксидантная активность,они участвуют в обмене веществ, оказывают положительное влияние на усвоениепищи, благодаря созданию благоприятных условий для жизнедеятельностиполезной микрофлоры кишечника [169].
Необходимо отметить особую рольянтарной кислоты (ЯК), которая является промежуточным универсальнымметаболитом цикла Кребса. ЯК проявляет антиоксидантные свойства, оказываетантиацидотическое и противогипоксическое действие, являясь естественнымфактором многофакторной устойчивости организма.
Сукцинат ион обнаружен вовсех клетках, которые способны к аэробному дыханию при этом энергетическая102мощность синтеза АТФ в ходе окисления ЯК значительно выше, чем в случаеокисления любого другого аналогичного субстрата [53].Содержание ОК в ГомЛРС G. woronowii составило 237,7±2,4 мг/100 г, а вГомЛРС G. nivalis 405,1±4,7 мг/100 г.
Основными обнаруженными ОК ГомЛРСявлялись: янтарная, яблочная и щавелевая кислоты (рис. 4.4.1., 4.4.2), результатыопределения представлены в табл. 4.4.1.Таблица 4.4.1.Органические кислоты ГомЛРС G. woronowii и G. nivalis (M±m, n=5)Органическаякислотаянтарная кислотаяблочная кислотащавелевая кислотаСуммаВремяудерживания, tR6,45,211,5Содержание, мг/ 100 г (в пересчете на сухоесырье)G.
woronowiiG. nivalis195,2±1,2334,7±2,329,3±0,842,4±1,813,2±0,428,0±0,6237,7 ±2,4405,1±4,7Рис. 4.4.1. ВЭЖХ-УФ хроматограмма органических кислот ГомЛРС G. woronowii:яблочная, янтарная, щавелевая кислоты.Рис. 4.4.2. ВЭЖХ-УФ хроматограмма органических кислот ГомЛРС G. nivalis:яблочная, янтарная, щавелевая кислоты.103Метрологические характеристики методик количесвенного опредленияорганических и гидроксикоричных кислот в G. woronowii и G. nivalisпредставлены в таб.
4.4.2.Таблица 4.4.2.Метрологическая характеристика методик количесвенного опредленияорганических кислот в двух видах подснежика (n = 5, f = 4, P = 95%, T(f,P) =2,7764)ОбъектОКG. woronowiiянтарнаяяблочнаящавелеваяянтарнаяяблочнаящавелеваяG. nivalisХ195,2±1,229,3±0,813,2±0,4334,7±2,342,4±1,828,0±0,6S1,0010,4340,1243,5082,1690,2341,0010,6590,3531,8731,4730,4830,4480,2950,1580,8380,6590,216ΔXE,%1,240,810,442,331,830,600,632,793,310,694,312,144.5. Изучение аминокислот ГомЛРС подснежниковСреди низкомолекулярных природных азотосодержащих органическихсоединений, которые синтезируются растениями, аминокислоты занимают одноизважнейшихмест.Функциональнаярольаминокислотчрезвычайноразнообразна: для них характерен широкий спектр биологического действия, онислужат структурными элементами белков и компонентами ферментов ивитаминов, участвуют в биосинтезе алкалоидов и гормонов.
Все необходимые длянормального метаболизма аминокислоты растения синтезируют самостоятельно.Важно отметить, что ГомЛРС зачастую рассматриваются в качестве источниковаминокислот в легкоусвояемой форме. Аминокислоты также участвуют вобеспечении фармакологической безопасности и облегчают усвоение другихБАС, в то же время, потенцируя их фармакотерапевтические эффекты [4, 69, 137,167]. Повышение требований к качеству ГомЛРС делает необходимымколичественное определение основных классов БАС, одним из которых являютсяаминокислоты, важность значения которых для живого организма весьма труднопереоценить.104Хроматограммы аминокислот ГомЛРС G. woronowii и G. nivalis изображенына рис. 4.5.1 и 4.5.2.
Рассчитанное содержание аминокислот ГомЛРС G. woronowiiи G. nivalis представлено в таб. 4.5.1 и на рис. 4.5.3.Установлено, что в ГомЛРС G. woronowii и G. nivalis содержится 20аминокислот, из которых 8 незаменимых (№3 Val, №4 Ile, №5 Leu,№7 Thr,№ 10Lys, №11 OH-Lys, №15 Met, №16 Phe) и 12 заменимых (№ 1 Gly, № 2 Ala, № 6 Ser,№ 7 Thr, № 8 Asp, № 9 Glu, № 12 Arg, № 13 Orn, № 14 Cys, № 17 Tyr, № 18 His, №19 Pro, № 20 OH-Pro).По содержанию аминокислоты могут быть распределены следующимобразом (по убыванию): в ГомЛРС G. woronowii– Asp>Glu>Arg>Leu>Lys>Ala>Pro>Val>Ser>Phe>Gly>Ile>Thr>His>Met>OHLys>Tyr>OHPro>Cys>Orn; в ГомЛРС G.nivalis – Asp>Glu>His>Arg>Leu>Lys>Ala>Gly>Val>Ser>Pro>Ile>Phe>Thr>OHLys>Tyr>Met>OHPro>Cys>Orn.
Основными аминокислотами ГомЛРС G. woronowiiявляются три заменимых аминокислоты: аспартат, глутамат, аргинин. В ГомЛРСG. nivalis также обнаружено большое количество гистидина.Arg 56.07аммиак 72.94His 12.403mHis 2.34Lys 43.611718EA 2.2712OHLys 7.24Orn 0.85Tyr 6.23Phe 23.36Ile 29.87Leu 57.34Val+ 37.11Cys 0.73Met 4.47Ala 55.47Gly 65.20Pro 36.49OHPro 2.51Thr+ 29.84Ser 40.88Glu 71.50Asp 89.132545 mV27ch1ch22468101214161820222426283032343638Рис. 4.5.1. Хроматограмма аминокислот ГомЛРС G. woronowii.40min1053mHis 0.17Arg 20.93аммиак 56.101819His 4.00OHLys 2.08Orn 0.51Lys 12.18EA 0.96Leu 14.67Phe 6.6113Tyr 1.2511Ile 7.31Met 2.29Cys 0.69Val+ 9.98Ala 18.69Gly 13.83Pro 10.71Thr+ 7.63Ser 11.10OHPro 1.31Glu 38.06Asp 79.012545 mV28ch1ch2246810121416182022242628303234363840minРис.
4.5.2. Хроматограмма аминокислот ГомЛРС G. nivalis.Рис. 4.5.3. Содержание аминокислот в ГомЛРС G. woronowii и G. nivalis(%·103): №1 – ГомЛРС G. woronowii, №2 – ГомЛРС G. nivalis.106Таблица 4.5.1.Компонентный состав и содержание аминокислот в ГомЛРС G. woronowii и G.nivalis (в %)№Название Обознаминоки ачениеслотыХимическое наименованиеТривиальноеСистематическоеАлифатические моноаминомонокарбоновыеα-аминоуксуснаяаминоэтановая1.ГлицинGly G2.АланинAla Aα-аминопропионовая3.Валин*Val Vαаминоизовалериановаяα-амино-β-этил-βметилпропионоваяα-аминоизокапроновая2-аминопропановая8.АспартатAsp D2-амино-3метилбутановая2-амино-3метилпентановая2-амино-4метилпентановаяα-амино-β2-амино-3оксипропионоваягидроксипропановаяα-амино-β2-амино-3оксимаслянаягидроксибутановаяАлифатические моноаминодикарбоновыеα-аминоянтарнаяаминобутандиовая9.ГлутаматGlu Eα-аминоглютаровая4.5.Изолейцин*Лейцин*Ile ILeu L6.СеринSer S7.Треонин*Thr T10.
Лизин*Lys K11. Оксилизин*12. АргининOHLysArg R13. Орнитин14. Цистеин15. Метионин*16. Фенилаланин*OrnCys CMet MPhe, F2аминопентандиоваяАлифатические диаминомонокарбоновыеα,ε2,6диаминокапроноваядиаминогексановаяα,ε-диамино-σ2,6-диамино-5оксикапроноваяоксигексановаяα-амино-σ-гуанидил-н- 2-амино-5валериановаягуанидинопентановаяα-, δ2,5диаминовалериановаядиаминопентановаяАлифатические серосодержащиеα-амино-β2-амино-3тиопропионоваямеркаптопропановаяα-амино-γ-метилтио-н- 2-амино-4масляная(метилтио)бутановаяАроматическиеα-амино-β2-амино-3фенилпропионоваяфенилпропановаяСодержание вГомЛРС, %G.G.
nivalisworonowii0,05660,14460,09080,14600,06380,12830,05230,11570,10490,22220,06360,12730,04950,10550,57340,35140,30530,31120,09710,18830,01840,03470,19880,28840,00470,00420,00910,00520,01870,01970,05960,114010717. Тирозин18. Гистидин19.
Пролин20. Оксипролин21. ЭтаноламинСуммаTyr YHis Hα-амино-β2-амино-3-(4оксифенилпропионова гидроксифенил)прояпановаяГетероциклическиеα-амино-β2-амино-3-(1Нимидазолилпропионов имидазол-4аяил)пропановаяпирролидин-αпирролидин-2карбоноваякарбоноваяOH-Pro β-оксипирролидин-α3-оксипирролидинкарбоновая2-карбоноваяАминоспиртыEA0,01230,03340,03390,30290,06720,12700,00940,00970,00240,00301,89172,7825Pro P* - незаменимые аминокислоты4.6. Изучение углеводов ГомЛРС подснежниковК первичным метаболитам, которые вносят свой вклад в лечебный эффект,проявляемый ЛП, относятся также углеводы.
Углеводы, как и их различныепроизводные в живых клетках осуществляют структурную и пластическуюфункции, служат в качестве поставщиков энергии, играют роль регуляторов, атакжевыступаютсубстратамидляцелогокомплексабиохимическихспецифических процессов [67].Углеводы ЛР могут существовать в 2-х формах, одной из которых являетсясвободная форма – моносахариды (или монозы), другая форма, связанная, к нейотносятся ди- и полисахариды (иначе гликаны).
В число наиболее частообнаруживаемых моносахаридов входят пентозы (рибоза, арабиноза, ксилоза) игексозы (манноза, глюкоза, фруктоза), а дисахаридов – сахароза [175].Полученные ВЭЖХ-хроматограммы свободных углеводов ГомЛРС G.woronowii и G. nivalis представлены на рис. 4.6.1, связанных углеводов – на рис.4.6.2. Результаты определений содержания свободных и связанных углеводовГомЛРС G. woronowii и G. nivalis описаны в таб.