Диссертация (1141404), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Изучение микроскопических признаков сырья подснежников3.2.1. Микроскопия листьевУ G. woronowii листовая пластинка дорзовентрального типа в основаниитреугольной формы имеет длинные края, которые загибаются во внутрь.Количество проводящих пучков 28-31 на поперечном срезе листа (рис. 3.2.1.1).Подробная характеристика микроскопии листа G. woronowii представлена вПриложении3ивработе[130].УG.nivalisлистоваяпластинкадорзовентрального типа в основании имеет форму вогнутого треугольника, скороткими краями.
Количество проводящих пучков 12-20 на поперечном срезелиста (рис. 3.2.1.1). Подробная характеристика микроскопии листа G. nivalisпредставлена в Приложении 5 и в работе [130].А21Б133442Рис. 3.2.1.1. Поперечный срез листа G. woronowii (А) и G. nivalis (Б), 40×.1 –эпидерма, 2 – мезофилл, 3 – проводящие пучки, 4 – воздухоносные полости.12Рис. 3.2.1.2. Верхний эпидермис листа G.
woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.6721Рис. 3.2.1.3. Нижний эпидермис листа G. woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.21рфрфРис. 3.2.1.4. Рафиды (рф) оксалата кальция в клетках мезофилла листа G.woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.Основныеанатомо-диагностическиепризнакилистьевдвухвидовцветковдвухвидовподснежников представлены на рис. 3.2.1.2-3.2.1.4.3.2.2. Микроскопия цветковОсновныеанатомо-диагностическиепризнакиподснежников представлены на рис. 3.2.2.1-3.2.2.3 и в Приложениях 3,5 и в работе[130].6812АА12ББРис. 3.2.2.1. Эпидермис листочка околоцветника с внешней стороны G.woronowii (1) и G.
nivalis (2), А – клетки эпидермиса; Б – сосочковидные выросты,400×.1Рис. 3.2.2.2. Пыльца G. woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.26921Рис. 3.2.2.3. Эпидермис цветоноса G. woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.3.2.3. Микроскопия луковицОсновныеанатомо-диагностическиепризнакилуковицдвухвидовподснежников представлены на рис.
3.2.3.1-3.2.3.6, в Приложениях 3,5 и в работе[130].12Рис. 3.2.3.1. Эпидермис наружной чешуи с внешней стороны G. woronowii(1) и G. nivalis (2), 400×.7012Рис. 3.2.3.2. Эпидермис наружной чешуи с внутренней стороны G.woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.12Рис. 3.2.3.3. Эпидермис запасающей чешуи с наружной стороны G.woronowii (1) и G.
nivalis (2), 400×.7112Рис. 3.2.3.4. Эпидермис запасающей чешуи с внутренней стороны G.woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.12Рис. 3.2.3.5. Поперечный срез запасающей чешуи G. woronowii (1) и G.nivalis (2), окрашивание раствором Люголя, 100×.7212кзкзРис. 3.2.3.6. Клетки паренхимы запасающей чешуи с крахмальными зёрнами(КЗ) G. woronowii (1) и G. nivalis (2), 400×.3.2.4. Микроскопия корнейОсновныеанатомо-диагностическиепризнакикорнейдвухвидовподснежников представлены в Приложениях 3,5.Сравнение микроскопических анатомо-диагностических признаков двухвидов подснежников представлено в таблице 3.2.1.Таблица 3.2.1.Сравнение микроскопических признаков ГомЛРС G.
woronowii и G. nivalisПризнакКлетки эпидермисаУстьичный комплексЧастота встречаемостиустьиц с верхней сторонылистаЧастота встречаемостиустьиц с нижней сторонылистаКлетки мезофилла листаРафиды оксалата кальцияЧастота встречаемостиклеток с рафидамиG. woronowiiЛистПрямоугольные, длиной200-480 мкм, 25-35 мкмшириной.Тетрацитный тип (режепентацитный), округлые,диаметром 45-55 мкм.до 10-15 на 1 мм2G. nivalisПрямоугольные, длиной 185395 мкм, 23-31 мкм шириной.Тетрацитный тип (режепентацитный), округлые,диаметром 40-50 мкм.до 15 на 1 мм220-25 на 1 мм225-30 на 1 мм2Округлые, величиной 35-60мкм.70-120 мкм1-2,5 на 1 мм2Округлые, величиной 30-50мкм.45-50 мкм1,5-3 на 1 мм273Клетки эпидермисалисточка околоцветникаПыльцевые зернаПрицветникиКлетки эпидермисацветоносаУстьичный комплексЧастота встречаемостиустьицРафиды оксалата кальцияЧастота встречаемостиклеток с рафидамиВнешний эпидермиснаружной чешуиВнутренний эпидермиснаружной чешуиВнешний эпидермисзапасающей чешуиВнутренний эпидермисзапасающей чешуиКлетки основнойпаренхимыРафиды оксалата кальцияЧастота встречаемостиклеток с рафидамиКрахмальные зёрнаСтроениеСтроение ЦОЦ, егодиаметрКольцо деформированнойпаренхимыЦветокМногоугольные округлыепрямостенные диаметром60-80 мкм, ссосочковиднымивыростами.Овальные, однобороздные,гетерополярные, гладкие,длиной 21-26 мкм,шириной 16-19 мкм.По строению аналогичнылистуЦветоносПрямоугольные, длиной190-470 мкм, шириной 2334 мкм.Тетрацитный тип,округлые, диаметром 45-55мкм.19-22 на 1 мм2Многоугольные округлыепрямостенные диаметром 5070 мкм, с сосочковиднымивыростами.Овальные, однобороздные,гетерополярные, гладкие,длиной 18-20 мкм, шириной12-15 мкм.По строению аналогичнылистуПрямоугольные, длиной 180390 мкм, шириной 22-30 мкм.Тетрацитный тип, округлые,диаметром 40-50 мкм.23-28 на 1 мм275-135 мкм1-2,5 на 1 мм250-65 мкм1,5-3 на 1 мм2Луковицадлина – 120-230 мкм,ширина – 30-40 мкмдлина – 110-225 мкм,ширина – 25-35 мкмдлина – 130-245 мкм,ширина – 55-70 мкмдлина – 120-240 мкм,ширина – 45-65 мкмОкруглые, диаметром – 80105 мкм.85-145 мкм1,5-3 на 1 мм2длина – 100-210 мкм, ширина– 20-30 мкмдлина – 90-200 мкм, ширина –18-25 мкмдлина – 110-220 мкм, ширина– 50-65 мкмдлина – 100-215 мкм, ширина– 30-55 мкмОкруглые, диаметром –70-95мкм.60-75 мкм2-3,5 на 1 мм2Округло-яйцевидные,диаметром 5-45 мкмКорниПервичноеТетрархный, 55-60 мкмотсутствуетОкругло-яйцевидные,диаметром 2,2-26 мкмПервичноеТриархный, 45-50 мкмимеется во внешней частикоры74ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 31.
Изучены внешние признаки ГомЛРС подснежников Воронова ибелоснежного, установлены различия в характерных макродиагностическихпризнаках, а также линейные размеры органов растений. Для двух видовподснежников отмечено характерное для рода строение цветка – 3 наружныхлисточка околоцветника обратнояйцевидной формы, 3 внутренних листочкаоколоцветника клиновидной формы, плоские, наверху с выемкой и крупнымподковообразным зелёным пятном. Листья подснежника Воронова без восковогоналета, с выраженной складчатостью; листья подснежника белоснежного свосковым налетом ровные, без складок; наружные чешуи луковицы подснежникаВоронова расположены ступенчато, а у подснежника белоснежного на одномуровне.2.Проведеноизучениемикроскопическиханатомо-диагностическихпризнаков ГомЛРС подснежников Воронова и белоснежного: строение верхнего инижнего эпидермиса листа, эпидермиса цветоноса, эпидермиса лепестков свнутренней и внешней стороны, верхнего и нижнего эпидермиса кроющих чешуй,верхнего и нижнего эпидермиса запасающих чешуй, корней, размеры клеток иклеточных включений (рафид оксалата кальция, крахмальных зерен).
Для двухвидов подснежников характерны следующие признаки: тетрацитный типустьичного комплекса, прямоугольные клетки эпидермиса листа, клеткиэпидермиса листочка околоцветника с сосочковидными выростами, присутствиево всех органах за исключением цветка клеток с рафидами оксалата кальция.3.
Установлено, что имеются различия в линейных размерах как на макро-,так и на микроуровне. В целом размеры органов подснежника Вороновазначительно больше, чем у подснежника белоснежного, что также нашлоотражение и на линейных размерах клеточных структур. Таким образом,комплекс исследуемых признаков позволяет проводить видовую идентификациюсырья.75ГЛАВА 4. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕГОМЕОПАТИЧЕСКОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯПОДСНЕЖНИКОВВ ходе анализа литературных источников было установлено, чтокомпонентный состав БАС G. woronowii и G.
nivalis изучен не в полном объеме,поскольку основное внимание исследователи уделяли анализу алкалоиднойфракции. Нами проводилось изучение компонентного состава БАС методомкачественных реакций.Готовили водные и водно-спиртовые извлечения из ГомЛРС G. woronowii иG. nivalis: 10 г измельчённого ГомЛРС, растёртого в ступке до кашицеобразногосостояния, помещали в коническую колбу вместимостью 100 мл, заливали 50 млводы очищенной (для экстракции флавоноидов использовали 70% этиловыйспирт).
Колбу помещали на 15 мин в ультразвуковую ванну. Извлечениепрофильтровывали сквозь складчатый бумажный фильтр. С полученными такимобразом извлечениями проводились качественные реакции на главные группыБАС, включенные в ГФ ХIII изд. [51], а также описанные в научной литературе.Для подтверждения наличия солей АА к водным извлечениям из ГомЛРСприбавляли несколько капель 1 % р-ра кремневольфрамовой кислоты, появляласьмуть, которая переходила в хлопьевидный осадок (амариллисовые алкалоиды)[27].Для определения свободныхуглеводов в анализируемых объектахпроводилась качественная реакция с реактивом Фелинга (на восстанавливающиесахара по Бертрану), наблюдалось выпадение оранжево-красного осадка закисимеди (свободные углеводы) [27].В случае добавления избытка спирта 96 % к водному извлечению изГомЛРС начинали появляться хлопьевидные сгустки, которые при стояниираствора выпадали в осадок (полисахариды) [27].Присутствие флавоноидов в ГомЛРС подтверждалось с растворомалюминия хлорида и цианидиновой пробой.
В случае добавления 1 % р-ра76алюминия хлорида в 95 % спирте наблюдалось жёлто-зелёное окрашивание.Последобавления95%спирта,порошкаметаллическогомагнияихлористоводородной кислоты концентрированной постепенно появлялось красноеокрашивание.После добавления к водному извлечению из ГомЛРС 1% р-ра нингидрина ипоследующегонагреваниянаблюдалосьсине-фиолетовогоокрашивание(аминокислоты) [27].Реакция пенообразования была отрицательна для извлечения из ГомЛРСдвух видов подснежников, формирования стойкой пены не происходило(отсутствие сапонинов).С целью определения дубильных веществ проводили специфическуюреакцию осаждения желатином (1 % р-р желатина на 10 % р-ре хлорида натрия).ВслучаеанализаизвлеченийизГомЛРСненаблюдалосьпоявленияхлопьевидного осадка или мути, которые исчезали при добавлении избыткажелатина.
Отрицательная реакция с раствором желатина свидетельствовала оботсутствии дубильных веществ. Также проводилась реакция с растворомжелезоаммониевых квасцов (ЖАК). К 4 мл извлечения из ГомЛРС (в фарфоровойчашке) прибавляли 3 капли раствора ЖАК, окрашивания не наблюдалось(отсутствие дубильных веществ) [27].Для определения антраценопроизводных к водному извлечению добавлялинесколькихокрашиваниекапель10%раствораотсутствовало.натрияИспользовалигидроксида,такжевишнево-красноереакциюБорнтрегера.Измельченное сырье в количестве 5,0 г несколько минут кипятили с 10 мл 10%спиртового раствора натрия гидроксида, затем фильтровали. После охлажденияфильтрат подкисляли кислотой хлороводородной, разведенной до слабокислойреакции, далее прибавляли 10 мл диэтилового эфира. Эфирный слой в желтыйцвет не окрашивался.
5 мл эфирного извлечения взбалтывали с 5 мл растворааммиака, который не окрашивается в вишневый цвет. Реакция была отрицательна.Результаты фитохимического анализа БАС ГомЛРС представлены в таб. 4.1.77Таблица 4.1.БАС ГомЛРС подснежников Воронова и белоснежного [24, 27]Группа БАССоли алкалоидовУглеводымоносахаридыполисахаридыАминокислотыГликозиды флавоноидовСапониныДубильные веществаАнтраценопроизводныеИспользуемый реактивG.woronowiiG.nivalisНаблюдаемый эффектреакции1 % р-р++кремневольфрамовоймуть, переходящая вкислотыхлопьевидный осадокРеактив Фелинга++оранжево-красный осадок95% этиловый спирт++++хлопьевидный осадокНингидриновый реактив++сине-фиолетовое окрашивание95 % спирт, Mg, HCl;++красное окрашиваниеСпиртовой 1% р-р AlCl3++жёлто-зелёное окрашиваниеРеакция пенообразования––формирование стойкой пены непроисходилоОсаждение желатином––муть не появляетсяЖАК––отсутствие окрашивания10% раствора натрия––гидроксидавишнево-красное окрашиваниене наблюдалосьРеакция Борнтрегера––отсутствие окрашиванияэфирного слояВ ходе предварительного фитохимического анализа было установлено, что вГомЛРС двух видов подснежников содержится комплекс БАС: соли алкалоидов,углеводы(моносахариды,полисахариды),аминокислоты,гликозидыфлавоноидов.4.1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
