Диссертация (1141404), страница 15
Текст из файла (страница 15)
4.2.2, №4).МИ m/z 296 в режиме PS обнаружен для пика с RT=10,9 мин (рис. 4.2.4). Врежиме NS ионизация для этого вещества отсутствует (рис. 4.2.5).92n1n130-Mar-2015 13:36:01 DMP-300315-5QBA127DMP-300315-5 13085 (10.905) Cm (13029:13182-(12708:12881+13424:13698))263.802.378e-2QBA12730-Mar-2015 13:36:011: Scan ES+2962.90e810.941002.0e-2AU%1.5e-21.0e-25.0e-300.00DMP-300315-50.0DMP-300315-5 1202 (10.941) Cm (1196:1210-(1155:1186+1233:1263))296.152.03e710010.0020.006.425.0e-230.002: Diode Array360Range: 5.293e-21.33%AU4.0e-23.0e-22.0e-28.06 10.902.641.0e-2025050075010000.00.00m/z125010.00Time30.0020.00Рис.
4.2.4. ВЭЖХ-хроматограмма и масс-спектр неизвестного вещества сУФ-поглощением при длине волны 360 нм в ГомЛРС G. woronowii в режиме PS.n1n130-Mar-2015 12:22:11QBA127QBA127DMP-300315-3 890 (8.101) Cm (883:898-(907:957+858:874)) DMP-300315-3462.551.24e6 1001001: Scan ES6252.40e7%CH400.00DMP-300315-33.41%%11.7110.002.269.8000.00DMP-300315-3962.412.0600.00DMP-300315-3DMP-300315-3 645 (5.871) Cm (635:654-(665:698+585:623))624.631.05e6 10010019.337.4213.8124.8630.001: Scan ES6394.89e710.0020.0030.001: Scan ES4632.98e720.0030.002: Diode Array360Range: 5.547e-2%%%9.6310.00020040060080010001200AU5.0e-2 1.331251.531400m/z0.00.0030.001: Scan ES4772.30e720.005.8700.00DMP-300315-31004.6928.5910.008.10100236.8123.6520.006.4500.00DMP-300315-3462.6230.001: Scan ES6934.77e69.88%564.9414.9310.00100020.005.84100222.5430-Mar-2015 12:22:115.882.646.438.06 10.9010.0020.00Time30.00Рис.
4.2.5. ВЭЖХ-хроматограммы и масс-спектры ГомЛРС G. woronowii врежиме NS.93Таблица 4.2.2.Результаты идентификации флавоноидов в ГомЛРС G.woronowii№1.Название флавоноида,структурная формулагиперозид (3-О-β-D-галактозидкверцетина)Время Величинаудержи m/z в ES+вания,мин8,1464,6 (487)Величинаm/z в ES462,65,8625OHOHHOOOHOOHOHOOOHHO2.кверцетин-3-галактозил-(1→6)галактозидHO649кверцетин-O-софорозидHOOHOOHOHOOHOHHOOHOHOOHOOHOHOOHOизорамнетин -3-галактозил-(1→6)галактозидOOOHOH6,5OHHOHO3.OHOOOOHOOH641 (663)639изорамнетин-O-софорозидHOHOOOHOOOOOOHOHOOHOHOHOOHOOH 3COHOHOOHOOHOOHHOH3CHOOHOOHOHOH944.изорамнетин-3-галактозидO9,9CH3479 (501)изорамнетин-3-глюкозидOHOHOCH3OOHOHOOH477HOOOHOOOOHOHHOOOHOHOOHOHНа ВЭЖХ-хроматограмме извлечения ГомЛРС G.
nivalis наблюдается 1интенсивный пик и еще 1 пик, интенсивность которого значительно меньше (рис.4.2.6).2QBA127DMP-030315-204-Mar-2015 16:19:151: Scan ES+2872.05e76.83100%3.1011.828.3900.00DMP-030315-218.1025.1428.8310.0020.0030.001: Scan ES+3032.57e810.0020.0030.002: Diode Array360Range: 1.369e-15.71%1002.6900.00DMP-030315-25.69AU1.0e-15.0e-210.0020.0030.001: Scan ES+TIC5.10e94.35%0.00.00DMP-030315-233.513.462.1000.007.93 11.8210.0019.3120.0025.4930.00TimeРис. 4.2.6.
ВЭЖХ-хроматограмма ГомЛРС G. nivalis в режиме PS.95В режиме PS наблюдается МИ m/z 303 у пика с RT=5,7 мин (рис. 4.2.7).Предположительно, что этот компонент – производное кверцетина.2204-Mar-2015 16:19:15QBA127QBA127%DMP-030315-2 629 (5.730) Cm (622:633-(638:687+566:607)) DMP-030315-2302.661.74e7 1001001: Scan ES+6277.60e65.712.188.12 12.59 17.5000.00DMP-030315-2359.6904-Mar-2015 16:19:1523.73 27.7310.0020.0030.001: Scan ES+3032.57e810.0020.0030.002: Diode Array360Range: 1.369e-15.71%1002.69%00.00DMP-030315-25.69AU1.0e-15.0e-20.00.00DMP-030315-2263.7533.513.4610.0020.0030.001: Scan ES+TIC5.10e94.35648.71%464.65144.662.100100200300400500600700m/z00.007.93 11.8210.0019.3120.0025.4930.00TimeРис. 4.2.7.
ВЭЖХ-хроматограммы и масс-спектр флавоноида, производногокверцетина, в ГомЛРС G. nivalis в режиме PS.Пик с RT=5,7 мин в режиме PS соответствует МИ [М+Н] m/z 626,7, а врежиме NS m/z 624,7. Возможные структуры для этого пика – кверцетин-3галактозил-(1→6)-галактозид или кверцетин-3-O-софорозид (таб. 4.2. 3, №1).962QBA12704-Mar-2015 16:19:15DMP-030315-2 751 (6.841) Cm (745:755-(702:736+765:793))21.67e6286.63100QBA127DMP-030315-204-Mar-2015 16:19:151: Scan ES+6336.28e66.83100%9.3612.053.4800.00DMP-030315-210.0017.06 21.0020.001: Scan ES+2872.05e76.83%10025.59%3.1011.82141.798.3900.00DMP-030315-210.0018.1021.49 25.14 28.1920.002: Diode Array360Range: 1.365e-15.69632.61412.38207.63572.07708.69AU1.0e-1501.605.0e-201002003004005006007001.34m/z3.460.00.0010.0020.00TimeРис.
4.2.8. ВЭЖХ-хроматограммы и масс-спектр флавоноида, производногокемпферола, в ГомЛРС G. nivalis в режиме PS.МИ 287,0 в режиме PS наблюдается для одного оставшегося пика с RT=6,83мин (рис. 4.2. 8). Предположительно, этот компонент – производное кемпферола.Пик с RT=6,83 мин в режиме PS соответствует МИ [М+Na]+ m/z 632,6, а в режимеNS m/z 609. Одна из возможных структур для этого пика – кемпферол-3галактозил-(1→6)-галактозид или кемпферол-3-O-софорозид (таб. 4.2.3, №2).972QBA12704-Mar-2015 18:09:52DMP-030315-5 749 (6.823) Cm (745:757-(684:732+766:827))609.2410024.33e5QBA127DMP-030315-504-Mar-2015 18:09:521: Scan ES6098.87e66.83%%1002.46174.75409.30304.76552.069.500676.56745.1510.00DMP-030315-528.3420.001: Scan ES6258.24e75.73100023.8715.09DMP-030315-5 629 (5.730) Cm (620:637-(545:611+657:710))624.703.66e6%100010.00%DMP-030315-520.002: Diode Array360Range: 1.385e-15.69AU1.0e-1692.5901002003004005006007005.0e-2m/z1.343.470.010.00Time20.00Рис.
4.2.9. ВЭЖХ-хроматограммы и масс-спектры образца ГомЛРС G.nivalis в режиме NS.Таблица 4.2.3.Результаты идентификации флавоноидов в ГомЛРС G. nivalis№Название флавоноида,структурная формула1.кверцетин-3-галактозил-(1→6)галактозидHOВремяВеличина Величинаудержив m/z в ES+m/z в ESания,мин5,7626,7624,7кверцетин-3-O-софорозидOHHOOOHOHOOOHOOHOOHOHOHOHOOOHOOOOHOHOOHHOOHOOHHOHOHOOH982.кемпферол-3-галактозил-(1→6)галактозид6,8HO632,6609кемпферол-3-O-софорозидOHHOOHHOOOHOOOHOOHOOOOHOOHHOOHOHOOHOOOHOOHOHOHHOOHСодержание кверцетина в ГомЛРС G. woronowii составило 0,606±0,008%, ав ГомЛРС G. nivalis – 0,252±0,009%; содержание изорамнетина в ГомЛРС G.woronowii – 0,345±0,005 %, кемпферола в ГомЛРС G.
nivalis – 0,172±0,006%.ВЭЖХ-хроматограммы представлены на рис. 4.2.10 и 4.2.11. Метрологические характеристики методики представлены в таб. 4.2.4.Рис 4.2.10. ВЭЖХ-хроматограмма агликонов флавоноидов G. woronowii.Рис 4.2.11. ВЭЖХ-хроматограмма агликонов флавоноидов G. nivalis.99Таблица 4.2.4.Метрологические характеристики методики количественного определенияагликонов флавоноидов в ГомЛРС двух видов подснежников (n =5, Px = 0,95,t(p,f)=2,776)ОбъектS2x,%НазваниеSx,%ΔxсоединенияG.
woronowiiG. nivalisкверцетин0,6063,9·10-50,0062290 0,0027857 0,0081,28изорамнетин0,3451,9·10-50,0043359 0,0019391 0,0051,56кверцетин0,2525,6·10-50,0074967 0,0033526 0,0093,69кемпферол0,1722,0·10-50,0044944 0,0020100 0,0063,25Результаты ТСХ-анализа флавоноидов ГомЛРС G. woronowii и G. nivalisпредставлены в Приложениях 3, 5 раздел «Подлинность; 2. Тонкослойнаяхроматография (флавоноиды)».4.3.
Изучение гидроксикоричных кислот ГомЛРС подснежниковГидроксикоричныекислоты(ГКК)–наиболеераспространенныеполифенольные кислоты в высших растениях, представлены сложными эфирамикофейной кислоты с винной, шикимовой и хинной кислотами, в виде гликозидов,а также комплексами с белками, лигнином и целлюлозой.
ГКК обладаютвыраженными антиоксидантными и антирадикальными свойствами, показаннымив тестах in vitro; отмечены также их противовоспалительная, противовирусная ииммуностимулирующаяактивность.ОпределениеГККпроводилирядисследователей, как в ЛРС, так и в пищевых продуктах [57, 76].Суммарное содержание производных ГКК кислот в ГомЛРС G. woronowiiG. nivalis составило 84,1±6,7 мг/100 г, а в ГомЛРС G.
nivalis 62,0±5,0 мг/100 г.ПолученнаяхроматограммаГККГомЛРСG.woronowii(обнаруженынеохлорогеновая, хлорогеновая и криптохлорогеновая кислоты) представлена нарис.4.3.1.ВГомЛРСG.nivalisбылиобнаруженыхлорогеноваяикриптохлорогеновая кислоты (рис. 4.3.2). Полученные результаты определения100индивидуальныхГККпредставленывтаблице4.3.1.Формулыидентифицированных ГКК представлены на рис. 4.3.3.123Рис. 4.3.1. ВЭЖХ-УФ хроматограмма ГомЛРС G. woronowii. 1 – неохлорогеноваякислота, 2 – хлорогеновая кислота, 3 – криптохлорогеновая кислота.x10 1 DAD1 - A:Sig=330,4 Cinnam_Bx772_2015_08_03.d* 12.5562.62.42.2121.81.61.41.210.80.620.40.20-0.2-0.4-0.645678910111213141516171819202122Response Units vs.
Acquisition Time (min)232425262728293031323334Рис. 4.3.2. ВЭЖХ-УФ хроматограмма ГомЛРС G. nivalis. 1 – хлорогеноваякислота, 2 – криптохлорогеновая кислота.неохлорогеноваяхлорогеноваякриптохлорогеноваяРис. 4.3.3. Формулы идентифицированных гидроксикоричных кислот.101Таблица 4.3.1.Гидроксикоричные кислоты ГомЛРС G. woronowii и G. nivalis (M±m, n=5)ГККнеохлорогеновая кислотахлорогеновая кислотакриптохлорогеновая кислотаСуммаВремяудерживания,tR9,512,613,0Содержание, мг/100 г (в пересчете насухое сырье)G. woronowiiG. nivalis51,7±4,1Не обнаружено24,6±2,058,2±4,77,8±0,63,8±0,384,1±6,762,0±5,0Метрологические характеристики методик количесвенного опредленияорганических и гидроксикоричных кислот в ГомЛРС G. woronowii и G.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
