Диссертация (1141398), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Введение в состав 4% лактозы и4% маннита привело к усилению деструкции ЛВ примерно в 2,5 раза. В связи свышесказанным,вкачественаиболееоптимальногоформообразователя,стабилизирующего раствор ормустина, выбран Kollidon 17PF в концентрации 6%.3.6. Изучение влияния фильтрующего материала на содержание ормустина враствореВ связи с тем, что разрабатываемую ЛФ ормустина планируется применятьдля парентерального введения, необходимо было выбрать метод ее стерилизациии оценить его влияние на содержание АФИ в ЛФ.Выделяют 4 основных метода стерилизации ЛП: термический (насыщеннымводным паром под давлением; горячим воздухом), химический (растворыантисептиков; газы), фильтрованием (через фильтры с требуемым размером пор)и радиационный (облучение продукта ионизирующим излучением) [24].Для растворов термолабильных веществ, к которым относится ормустин,наиболее эффективным методом стерилизации, оказывающим наименьшеенегативное воздействие на качество ЛП, является стерилизующая фильтрация.При этом раствор пропускают через фильтры с номинальным размером пор неболее 0,22 мкм, способные задерживать не менее 107 микроорганизмовPseudomonas diminuta на 1 см2 поверхности.56При выборе материала для фильтрации учитывают:• совместимость фильтруемой жидкости с материалами фильтрующейсистемы;• скорость фильтрации;• объем серии продукта;• пропускная способность фильтра и др.Исследования проводили путем фильтрации раствора ормустина черезнейлоновые и полиэфирсульфоновые мембранные фильтры.Таблица 5 – Влияние фильтрующего материала на содержание ормустина враствореСодержание ормустина в растворе, мг/млдо фильтрациипосле фильтрации25,0±0,324,8±0,525,0±0,314,0±0,5Фильтрующий материалнейлонполиэфирсульфонСкорость фильтрования была одинаково и составила 45-50 мл/мин.
Прииспользовании полиэфирсульфоновых фильтров наблюдалось значительноеснижение, более чем на 40%, содержание действующего вещества в растворе,тогда как при использовании нейлоновых фильтров потери не превышали 2%(табл. 5). Анализ полученных данных позволяет говорить о вероятномвзаимодействиисубстанцииполиэфирсульфоновымиилимембранамихлористоводороднойиневозможностиихкислотысдальнейшегоприменения в технологии получения инъекционной ЛФ ормустина.
Так какприменение нейлоновых фильтров не приводит к существенному снижениюсодержания ормустина их применяли в дальнейших исследованиях.3.7. Разработка режима лиофилизации раствора ормустинаПеред разработкой режима лиофилизации ЛФ проводили изучение влиянияпроцесса замораживания на стабильность действующего вещества. При этомфлаконы, содержащие по 5 мл раствора, выдерживали при температуре -18оС втечение 24 ч.
До заморозки и после разморозки определяли содержаниеормустина.57Содержаниеормустина, %2.521.5до1после0.50флакон1флакон2флакон3флакон4флакон5Рисунок 18 – Изменение содержания действующего вещества в ПЛФ послезаморозкиКак видно по данным графика, представленного на рисунке 18, снижениеконцентрации действующего вещества при заморозке было незначительным и непревышало 1,5%, следовательно, для данного раствора можно проводитьлиофилизацию.Перед выбором условий заморозки раствора ормустина определялитемпературуэвтектики(температуруполногозатвердеванияраствора)термическим методом, который основан на фиксации температуры примедленном оттаивании замороженного раствора [57].
Эвтектическая температурараствора ормустина находится в диапазоне от -23 до -26оС.В процессе разработки режима сушки сравнивали различные режимылиофилизации (рис. 10). Описание данных режимов приведено в разделе 2.2.2.Оценивалиэффективностьпродолжительностьпредложенныхлиофилизацииирежимовкачествопопараметрам:полученноголиофилизата(внешний вид, изменение рН, потери ЛВ при лиофилизации, регидратируемость)(табл. 6).58Таблица 6 – Сравнение параметров лиофилизатов ормустина, полученных приразличных режимах лиофилизацииПараметрпродолжительностьлиофилизации, чвнешний видлиофилизатарегидратируемостьводойдо лиофил.pH послелиофил.% потерьсодержанияормустина прилиофилизации1Режим лиофилизации23727672однородная пористая «таблетка»«таблетка» скристаллическойструктуройпроходит легкопроходит легкозатруднена2,12,12,12,12,12,10,61,41,1Использование 1 и 2 режимов позволяет получить лиофилизат надлежащегокачества с незначительными потерями действующего вещества (до 1,4%), однакотак как 1 режим требует меньших затрат времени, он предложен для полученияПЛФ ормустина, при котором препарат замораживали до -45ºС на полкесублимационной установки (температура полки -45оС) и выдерживали при даннойтемпературе в течение 3-х ч, а затем включали вакуум.
После выравниваниявакуума, температуры конденсатора и препарата повышали температуру полки на+5ºС/ч до достижения –25ºС. Далее подъем температуры вели (послепрохождения зоны эвтектики препарата) со скоростью +3ºС/ч. При достижениитемпературы на препарате 0ºС осуществляли постепенный подъем температурыдо +20ºС со скоростью +2ºС/ч., а после достижения заданной температуры напрепарате проводили досушивание (удаление остаточной влаги) в течение 3-х ч.График изменения температуры на препарате при выбранном режимепредставлен на рисунке 19.5925Температура, ⁰С155-5 051015202530354045505560657075-15-25-35-45Время, чРисунок 19 – График изменения температуры на препарате в процесселиофилизации3.8.
Выбор растворителя для регидратации парентеральной лекарственнойформы ормустина перед введениемНа завершающем этапе технологических исследований необходимо былоподобрать растворитель для регидратации полученного лиофилизата. С этойцелью оценивали влияние наиболее часто применяемых растворителей дляинъекционного пути введения (вода для инъекций, 0,9% раствор NaCl, 5% растворглюкозы, раствор Рингера, Гемодез-Н и фосфатный буферный раствор с pH=6,87,1) на значение рН и физическую стабильность раствора, получаемого послерегидратации лиофилизата ормустина (табл. 7).Таблица 7 – Изменение рН при добавлении различных объемов растворителей кПЛФ ормустинаОбъемЗначение рН при добавлении к лиофилизату раствора:добавляемого0,9%5%вода дляГемодез- Фосфатныйрастворителя,раствор раствор РингераинъекцийНбуфермлNaCl глюкозы2,1не52,02,02,02,3растворился102,12,02,12,12,56,5152,12,12,22,32,9-60Все растворители обеспечивали получение истинного раствора, нозначительное повышение pH обеспечило только применение фосфатногобуферного раствора.
В дальнейшем с целью выбора наиболее приемлемогорастворителя из шести предложенных оценивали их влияние на стабильностьормустина в получаемом после регидратации растворе. С этой целью лиофилизатормустина растворяли в 5 мл воды для инъекций, 0,9% растворе NaCl, 5%растворе глюкозы, растворе Рингера и Гемодез-Н и в 10 мл растворе фосфатногобуфера и измеряли содержание действующего вещества в контрольныхвременных точках – 1, 3, 8, 24 ч. (рис. 20).Содержание ормустина, мг/флакон130120Гемодез-Н110Рингер1000,9 % NaCl905 % глюкозаФосфатныйбуферВода дляинъекций807003691215182124Время после регидратации, чРисунок 20 – Стабильность растворов ормустина после регидратации прииспользовании различных растворителейПри применении растворов Рингера и Гемодеза-Н уже через 1 ч послерегидратации лиофилизата наблюдали снижение содержания действующеговещества, потери составили 4 и 8%, соответственно.
По прошествии одних сутокв растворах с упомянутыми растворителями концентрация ормустина падала на40% от первоначальной. Использование в качестве растворителей воды для61инъекций, изотонического раствора NaCI и фосфатного буферного растворапозволяло сохранить исходную концентрацию ормустина в течение 1 ч, а 5%раствора глюкозы – в течение 3 ч. Наименьшие потери действующего вещества навсехэтапахэкспериментанаблюдалиприиспользованиивкачестверастворителей 5% раствора глюкозы и раствора фосфатного буфера.
Однаконизкий показатель pH при внутривенном введении мышам приводил кпроявлению местно-тканевых реакций, поэтому для проведения доклиническихисследований предпочтительней использовать фосфатный буферный раствор сpH=6,8-7,1.3.9. Технологическая схема получения готовой ПЛФ ормустинаВ результате проведения ряда экспериментов была разработана ПЛФ«Ормустин, лиофилизат для приготовления инъекционного раствора 125 мг»следующего состава:Ормустин125 мгKollidon 17PF300 мгКислота хлористоводородная концентрированная16 мгТехнологическая схема приготовления данной ЛФ представлена на рисунке21. По разработанной технологии составлен лабораторный регламент наполучение готовой ПЛФ ормустина.62ВР-2.1.
Подготовка воздухаВР-2.2. Подготовкадезинфицирующих имоющих растворовВР-2.3. Подготовкапомещений иоборудованияВР-1. Подготовкаводыв канализациюПромстокВР-2. Санитарнаяобработкапроизводствав атмосферуПотериВР-2.4. Подготовкатехнологической одеждыВР-2.5. Подготовкаперсоналас ВР.1.ВР-3.1.
ПодготовкафлаконовВР-3.2. Подготовка пробокв канализациюВР-3. ПодготовкатарыВР-3.3. ПодготовкаколпачковПромстокНа свалкуОтходыТП-4.1. Приготовление 0,1М растворахлористоводороднойкислотыТП-4.2. Приготовление2,5 % раствора ормустинагидрохлоридаТП-4.3. Фильтрацияраствора и разлив вофлаконыВ канализациюТП-4. ПолучениестерильногораствораКт, КхПотериНа сжиганиеОтходыНа сжиганиеТП-5.1. ЗамораживаниеТП-5.2. Сублимационнаясушка с укупоркойфлаконовОтходыТП-5. Получениеготовогопродукта; Кт, КхВ канализациюПотериТП-5.3.
Обжим колпачкамиНа сжиганиеУМО-6.1. Просмотр готовойпродукцииУМО-6.2. МаркировкаУМО-6. Упаковка иоформлениеготовойпродукции; Кт, КхОтходыВ канализациюПотериНа склад готовой продукцииОБО. Обезвреживаниеотходов производстваРисунок 21 – Технологическая схема получения ПЛФ ормустина63Заключение по главе 3В ходе проведения исследований по созданию инъекционной ЛФ новогопроизводного АНМ ормустина изучена его растворимость в различных водныхрастворителях, содержащих спирт, ВМС, органическую и неорганическуюкислоты, сахар. Раствор0,1М хлористоводороднойкислотыпозволилзначительно повысить растворимость субстанции с образованием 2,5% раствораормустин. Оптимизировано время растворения ормустина путем изучениявлиянияразличныхтехнологическихприемовнаскоростьобразованияпрозрачного раствора. С целью получения стабильной во времени ЛФ разработанрежим лиофилизации, для эффективного применения данного процесса выбранполивинилпирролидон марки Kollidon 17PF в концентрации 6% в качествеформообразователя и сорастворителя, позволяющего получить лиофилизатнадлежащего качества.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
