Диссертация (1141398), страница 13
Текст из файла (страница 13)
ТРО на всехизучаемых моделях солидных опухолей достигала 90%, на рак шейки маткиРШМ-5 ормустин вызывает излечение всех мышей в опытной группе.Представленные данные указывают на перспективность применения изучаемогоЛП при лечении различных опухолей и его дальнейшее изучение, в том числе вкомбинации с другими препаратами с целью повышения эффективности лечениярака.93Заключение по главе 5Проведены исследования по изучению противоопухолевой активностиизучаемого ЛП на различных лейкозах и солидных моделях. В опытах in vivo, намышах установлено, что ормустин дозозависимо ингибирует развитие опухолей.При исследовании его активности на двух лейкозах (P-388 и L-1210) былаопределена терапевтическая доза готовой ПЛФ ормустина – 125 мг/кг.
Даннаядоза использовалась для изучения специфической активности ЛП на различныхсолидных моделях. При терапии солидных опухолей наблюдалось значительноеТРО и полное излечение при лечении рака шейки матки РШМ-5. Представленныеданные указывают на перспективность дальнейшего изучения готовой ПЛФормустина.94ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕНесмотря на огромные достижения современной медицины, основнымиметодами лечения рака до сих пор остаются использование хирургическихопераций, лучевой терапии и прием различных групп противоопухолевыхпрепаратов.
Препараты группы алкилирующих соединений, в том числе АНМ,нашлиширокоеприменениевклиническойпрактикеприлечениизлокачественных новообразований различного генеза. Для АНМ характерноотсутствие перекрестной резистентности с другими алкилирующими агентами иширокий спектр действия.В Институте органической химии им.
И.Я. Постовского проводилискринингразличныхбиологическойсоединенийактивностиновыхклассаАНМ,веществвврезультатекачествеизученияперспективногопротиворакового средства был отобран ормустин. Молекула ормустина в качествефункциональной группы содержит остатки аминокислот, которые болееинтенсивно поглощаются опухолевыми клетками по сравнению с нормальными.Наличие аминокислотного остатка обеспечивает более эффективный транспортполучаемых препаратов через ГЭБ, что служит перспективой для применениятаких производных АНМ при первичных и метастатических опухолях головногомозга.На первом этапе исследования по разработке состава ПЛФ изучаласьрастворимость ормустина в различных водных растворителях, содержащих спирт,ВМС, органическую и неорганическую кислоты, сахара.
Использование 0,1Мраствора хлористоводородной кислоты позволило получить прозрачный 2,5%раствор ормустина. Полученный раствор был нестабилен, при его хранении прикомнатной температуре за 5 дней концентрация действующего веществаснижалась на 37%. Поэтому с целью получения ПЛФ с длительным срокомхранения проводили лиофилизацию.Для получения лиофилизата надлежащего качества проводили исследоваливлияние различных формообразователей на стабильность ормустина.
Введение95поливинилпирролидона марки Kollidon 17PF в несколько раз снизило скоростьразрушения действующего вещества в растворе.Отобранный состав раствора после фильтрации подвергали лиофилизации сиспользованием трех температурных режимов. В качестве режима, позволяющегополучить легко регидратируемый лиофилизат, выбран режим, при которомпрепарат замораживали до -45ºС на полке сублимационной установки ивыдерживали при данной температуре в течение 3-х ч, а затем включали вакуум.После выравнивания вакуума, температуры конденсатора и препарата проводилиравномерный подъем температуры со скоростью +2-3оС/ ч.На следующем этапе работы оценивали влияние растворителей длярегидратациилиофилизированнойПЛФормустинанаеестабильность.Установлено, что растворителями, обеспечивающими наиболее длительнуюстабильностьполученногораствора ЛФ,являютсявода дляинъекций,изотонический раствор натрия хлорида, 5% раствор глюкозы, фосфатныйбуферный раствор с pH=6,6-7,1.Создание любой новой ЛФ предполагает разработку методик контролякачества и стандартизации.
В качестве одного из метод определения подлинностиизучено влияние различных систем растворителей на подвижность компонентовЛФ при проведении ТСХ-анализа. Наиболее быстрое поднятие фронтарастворителя наблюдалось в системе н-бутанол:ЛУК:вода (12:3:5) с Rf ормустина0,42. Kollidon 17PF в практически во всех изучаемых системах, в том числе нбутанол:ЛУК:вода (12:3:5), был мало подвижен, для его идентификациипредложена система спирт 95%:аммиак водный (3:2) с Rf Kollidon 17PF- 0,78.Впроцессеразработкиивалидацииметодаколичественногоспектрофотометрического определения ормустина проводили изучение ЭСПсубстанции и ПЛФ ормустина в диапазоне 350-450 нм.
Спектры ПЛФ исубстанции ормустина идентичны, а ВВ не поглощают в данном диапазоне.Поглощения раствора ормустина до и после лиофилизации подчиняется законуБугера-Ламберта-Бера. Валидация разработанной методики подтверждена такимипараметрами, как специфичность, линейность, правильность и прецизионность.96В качестве показателей качества, по которым проводили исследованиязаложенных на хранение при двух температурных режимах (-18 оС и +4 оС) трехсерий готовой ПЛФ ормустина, выбраны: описание, подлинность, средняя масса иоднородность по массе, прозрачность и цветность раствора, pH раствора,отсутствие механических включений, изомерный состав, посторонние примеси,количественное определение, потеря в массе при высушивании, пирогенность,аномальная токсичность и стерильность.На основании проведенных исследований разработан проект НД на«Ормустин, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 125 мг» илабораторный регламент на получение.Исследования по изучению противоопухолевой активности изучаемого ЛПна различных лейкозах и солидных моделях проводили in vivo.
Ормустиндозозависимо ингибировал развитие опухолей. При исследовании его активностина двух лейкозах (P-388 и L-1210) была определена терапевтическая доза готовойПЛФ ормустина – 125 мг/кг. Данная доза использовалась для изученияспецифической активности ЛП на ряде опухолевых моделей. При примененииПЛФ в различных лейкозах излечение достигало 33,3-66,7%, на солидныхмоделях наблюдается значительное ТРО и полное излечение при лечении ракашейки матки РШМ-5. Представленные данные указывают на перспективностьдальнейшего изучения готовой ПЛФ ормустина.Таким образом, по результатам проведения ряда исследований разработанаготовая ЛФ ормустина для парентерального введения, которая в опытах in vivoпродемонстрировала высокую дозозависимую противоопухолевую активность.97ВЫВОДЫ1.В результате проведения технологических исследований подобран состав иразработанатехнологияполученияПЛФ«Ормустин,лиофилизатдляприготовления раствора для инъекций 125 мг».2.Изучена подвижность компонентов ЛФ при проведении ТСХ-анализа вразличныхсистемахрастворителейсприменениемпластинок«Sorbfil».Разработана и валидирована методика количественного спектрофотометрическогоанализа ормустина в составе ЛФ при длине волны (396±2) нм, в качестве растворасравнении из-за отсутствия поглощения ВВ в диапазоне 350-450 нм использовалираствор 0,01 М хлористоводородной кислоты.3.Определены нормы для показателей качества, вошедшие в проект НД на«Ормустин, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 125 мг» иизучена стабильность готовой ПЛФ ормустина в процессе хранения при двухтемпературных режимах (минус 18оС и 4 оС).4.ИзученаспецифическаяактивностьПЛФормустинанапятиэкспериментальных опухолевых моделях.
На лейкозах L-1210 и P-388 показаназависимость терапевтического и токсического действия ПЛФ ормустина от дозы.5.Наоснованиирезультатовпроведенныхисследованийразработанылабораторный регламент на получение готовой ПЛФ и проект НД на «Ормустин,лиофилизат для приготовления растворов для инъекций 125 мг».98СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1. Алеева,Г.Н.Рольвспомогательныхвеществвобеспечениифармацевтических и терапевтических свойств лекарственных препаратов(обзор) / Г.Н.
Алеева, М.В. Журавлева, Р.Х. Хафизьянова // Химикофармацевтический журнал. – 2009. – Т. 43, №4. – 51-56.2. Алексеев, К.В. Технология повышения биологической и фармацевтическойдоступности лекарственных веществ / К.В. Алексеев [и др.] // Вестник новыхмедицинских технологий.
– 2012. – Т. XIX, №4. – С. 43-47.3. Аршинова, О.Ю. Вспомогательные вещества в технологии лиофилизациилекарственных препаратов / О.Ю. Аршинова, Н.А. Оборотова, Е.В. Санарова //Разработка и регистрация лекарственных форм. – 2013. - №1(2). – С. 20-24.4. Аршинова,О.Ю.Особенностилиофилизациилипосомальныхлекарственных препаратов (обзор) / О.Ю. Аршинова, Е.В. Санарова, А.В.Ланцова, Н.А. Оборотова // Химико-фармацевтический журнал. – 2012. – Т. 46,№ 4. – С. 29-34.5.
Багирова, В.Л. Современные аспекты использования вспомогательныхвеществ в технологии лекарственных препаратов / В.Л. Багирова [и др.] //Фарматека. – 1998. - №6. – С. 34-36.6. Базин, И.С. Химиотерапия диссеминированного рака желудка / Н.С. Базин //Автореф. дисс. …. канд. мед. наук – М., 1995. – 26 с.7. Барышникова, М.А.
Противоопухолевая активность нового соединения изкласса нитрозоалкилмочевин / М.А. Барышникова [и др.] // МатериалыБелорусско-Российской научно-практической конференции с международнымучастием «Отечественные противоопухолевые препараты» Минск, 23-25 мая.Российский биотерапевтический журнал. – 2013. – Т. 12, №2. – С. 8.8. Бедняк, А.Е. Некоторые итоги исследования по анализу и стабильностинитрозоалкилмочевин / А.Е. Бедняк и [и др.] // Тез. докл. IV Всероссийскогосъезда фармацевтов. – Казань, 1986.
– С. 363-364.999. Беляев, А.А. Нитрозоалкилмочевины на основе алкилендиаммониевыхсолей и их противоопухолевая активность / А.А. Беляев [и др.] // Химикофармацевтический журнал. – 1988. – Т.22, №2. – С. 180-185.10.Береговых, В.В. Валидация аналитических методик для производителейлекарств / В.В. Береговых. – М.: Литтерра, 2008. – 132 с.11.Береговых,В.В.Переностехнологииприсозданиипроизводствалекарственного средства / В.В. Береговых, О.Р. Спицкий // Вестник РАМН. –2013. - №12. – С.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
