Диссертация (1141345), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Индивидуальные значения активностей эноксапарина натрияпосле введения лекарственного средства Клексан, МЕ/мл№Время, чкролика00,5123468102410,000,290,390,300,230,200,190,130,140,0020,000,380,290,270,250,210,170,120,100,0030,000,240,290,310,290,240,180,170,000,0040,000,110,370,320,280,220,230,170,120,0050,000,240,360,310,270,240,160,140,100,0060,000,180,440,320,300,250,170,110,000,0070,000,160,360,320,290,260,160,110,000,0080,000,180,350,210,260,220,160,100,000,00Mean0,000,220,360,300,270,230,180,130,060,00GMean0,000,210,350,290,270,230,180,13------SD0,000,080,050,040,020,020,020,030,060,00CV0,0037,9513,9112,948,699,0013,3820,54109,1Median0,000,220,360,310,270,230,170,130,060,00Доверит0,000,050,030,020,010,010,010,020,04---L-90 %0,000,170,330,270,260,220,160,120,02---U - 90 %0,000,270,390,320,280,240,190,150,09---0,00 -менее предела количественного определения«---» - расчет величины не может быть произведен98Таблица 36.
Усредненные фармакокинетические параметры эноксапаринаAUC0-T/AUC0-∞Cmax/AUC 0-T,ч-1MRT, чT1/2, чAUC 0-∞,МЕ*ч/млkel, ч-1AUC 0-T,МЕ*ч/млTmax, чCmax,МЕ/мл№кроликанатрия после введения лекарственного средства Эноксапарин натрия.10,440,502,400,112,406,455,680,181,0020,541,002,970,112,976,285,320,181,0030,312,001,610,581,611,203,810,191,0040,371,002,780,092,788,126,140,131,0050,322,001,650,151,654,624,210,191,0060,382,002,870,142,875,015,820,131,0070,441,002,100,182,103,863,550,211,0080,460,502,190,172,194,113,550,211,00Mean0,411,252,320,192,324,964,760,181,00GMean0,401,092,270,162,274,424,650,181,00SD0,080,650,530,160,532,071,090,030,00CV, %19,1352,3722,7984,5622,7941,86 22,9217,110,00Median0,411,002,300,142,304,824,770,191,00Доверит.0,050,380,310,090,311,210,630,02---L-90 %0,360,872,010,102,013,754,120,16---U - 90 %0,451,632,630,282,636,165,390,20---«---» - расчет величины не может быть произведен99Таблица 37.
Усредненные Фармакокинетические параметры эноксапаринаAUC0-T/AUC0-∞Cmax/AUC 0-T,ч-1MRT, чT1/2, чAUC 0-∞,МЕ*ч/млkel, ч-1AUC 0-T,МЕ*ч/млTmax, чCmax,МЕ/мл№кроликанатрия после введения лекарственного средства Клексан.10,391,003,030,083,038,856,080,131,0020,380,502,620,132,625,245,650,141,0030,312,002,000,112,006,324,050,161,0040,371,003,020,113,026,416,020,121,0050,361,002,730,142,734,955,630,131,0060,441,001,980,181,983,773,650,221,0070,361,001,890,191,893,723,740,191,0080,351,001,670,151,674,483,800,211,00Mean0,371,062,370,142,375,474,830,161,00GMean0,371,002,310,132,315,264,710,161,00SD0,040,420,540,040,541,701,110,040,00CV, %10,0139,2722,9327,6322,9331,1422,9123,880,00Median0,371,002,310,142,315,094,840,151,00Доверит.0,020,240,320,020,320,990,640,02---L-90 %0,350,822,050,112,054,484,180,14---U - 90 %0,391,312,680,162,686,465,470,19---«---» - расчет величины не может быть произведен100Таблица 38.Параметры биоэквивалентности препаратов Эноксапарин натрия и Клексан.№доб-цаf'f''Cmax/AUC10,791,121,4121,131,431,2630,811,001,2440,921,001,0950,610,891,4761,450,860,6071,111,221,1081,311,311,00Mean1,021,101,15GMean0,981,091,11SD0,290,200,27CV, %28,0718,4523,92Mediane1,011,061,17Доверит0,170,120,16L-900,850,990,99U-901,181,221,31101Рисунок 5.
Усредненные фармакокинетические профили сравниваемыхпрепаратов-биоаналогов.Рисунок 6. Усредненные фармакокинетические профили сравниваемыхпрепаратов-биоаналогов.102Рисунок 7. Индивидуальные фармакокинетические профили эноксапаринанатрия.Рисунок 8. Индивидуальные фармакокинетические профили референтногопрепарата (Клексан).1031.4 Фармакокинетический и статистический этап доклиническихфармакокинетическихисследованийпрепарата-биоаналогаэноксопарина натрия (анти-IIа)5.4.1. Анализ аналитических цикловВыполнено 2 аналитических цикла. Каждый цикл включал в себякалибровочные пробы (3), нулевую плазму (2), исследуемые образцы плазмычетырех кроликов (1 и 2 этап исследования).Цикл № 1.Состав:калибровочные пробы: 0,15 МЕ/мл, 0,3 МЕ/мл, 0,6 МЕ/мл;нулевая плазма;исследуемые образцы плазмы кроликов №№ 1-4 (1 и 2 этапыисследования).Дата проведения анализа: 05.10.15Калибровочный график, полученный в аналитическом цикле 1, приведен наРисунке 3.0,70,6y = -0,5314x + 0,602R² = 0,99510,50,40,30,20,1000,10,20,30,40,50,60,7Рисунок 3.
Калибровочный график аналитического цикла 1.104Уравнение калибровочной кривой: y = -0,5314x + 0,602Коэффициент аппроксимации R2 > 0,99.Результаты аналитического цикла были признаны достоверными наосновании коэффициента аппроксимации калибровочной кривой (R2>0,99).Цикл № 2.Состав:калибровочные пробы: 0,15 МЕ/мл, 0,3 МЕ/мл, 0,6 МЕ/мл;нулевая плазма;исследуемые образцы плазмы кроликов №№ 5-8 (1 и 2 этапыисследования).Дата проведения анализа: 06.10.15Калибровочный график, полученный в аналитическом цикле 2, приведен наРисунке 4.0,6y = -0,4819x + 0,564R² = 0,99660,50,40,30,20,1000,10,20,30,40,50,60,7Рисунок 4.
Калибровочный график аналитического цикла 2.Уравнение калибровочной кривой: y = -0,4819x + 0,564Коэффициент аппроксимации R2 > 0,99.105Результаты аналитического цикла были признаны достоверными наосновании коэффициента аппроксимации калибровочной кривой (R2>0,99).5.4.2. Анализ фармакокинетических параметровИндивидуальныепрофилиизменениязначенийактивностей(А)эноксапарина натрия в плазме крови во времени (t), заpегистpиpованныепосле введения препаратов Эноксапарин натрия (Т) и Клексан® (R),хаpактеpизовались максимальной активностью лекарственного вещества(Amax, наибольшее из измеренных значений) и временем ее достижения(Tmax), площадью под кривой «активность – время» в пределах от нуля домомента отбора последней пробы крови (AUC0-t), рассчитанной методомтрапеций, общей AUC0-∞ и соотношением Amax к AUC0-t.Дополнительно определяли следующие фармакокинетические параметры Kel– константа элиминации, T1/2 – период полувыведения, MRT – среднее времяудерживания, AUC0-t / AUC0-..Статистический анализ результатов определения активностей эноксапаринанатрия в плазме крови и параметров фармакокинетики и биодоступностизаключался в расчете среднеарифметических (Mean) и среднегеометрических(GMean) значений, стандартного отклонения (SD), коэффициента вариации(CV, %), медианы (Median) и их интервальной оценки (Доверит, L-90%, U90%).Описательную статистику, расчет фармакокинетических параметров идисперсионный анализ проводили при помощи пакета MS Excel срасширением для проведения фармакокинетического анализа Boomer(разработано Joel I.
Usansky, Ph.D., Atul Desai, M.S. and Diane Tang-Liu, Ph.D.;Department of Pharmacokinetics and Drug Metabolism Allergan, Irvine, CA92606, США). Интервальные значения фармакокинетических параметроврассчитывали по формулам: L-90 = Mean - ΔX; U-90 = Mean + ΔX; где ΔX –доверительныйинтервал.Коэффициентывариациирассчитывалипоформуле: CV = (SD * 100)/Mean.106Для расчета основных фармакокинетических параметров в используемомпрограммном обеспечении были применены следующие расчетные формулы:гдеAUC0-t - площадь под кривой «концентрация – время» в пределах отнуля до момента отбора последней пробы крови (12 ч)Ci – значение активности эноксапарина натрия в момент времени tt – время отбора пробыn – общее количество временных точек отбора пробi – порядковый номер временной точки отбора проб.AUC0- = AUC0-t + Ct/kel , гдеCt - активность в последней временной точке отбора пробT1/2 = ln2/kelИндивидуальные значения активностей (А) эноксапарина натрия в плазмекрови во времени (t), заpегистpиpованные после введения исследуемыхлекарственных средств.Индивидуальныеиусредненныефармакокинетическиепараметрыисследуемых лекарственных средств приведены в Таблицах 39-42.Параметры биоэквивалентности приведены в Таблице 43.5.
4.3. Результаты исследованияХарактер фармакокинетических кривых,полученных послевведенияпрепаратов Эноксапарин натрия (T) и Клексан® (R), в целом сходен, причеминдивидуальная вариабельность значений активностей эноксапарина натрияв обоих случаях примерно одинакова. Различия в уровнях активностиэноксапарина натрия после введения изученных пpепаpатов, не носятсистематического хаpактеpа. Следует отметить значительно более низкие107значения анти-IIа активности исследуемых лекарственных средств посравнению с анти-Ха активностью, что подтверждается литературнымиданными (G.-J.C.M. Sanderink et al.
/ Thrombosis Research 105 (2002) 225–231),вкоторыхфармакокинетикиуказано,чтопрепаратованти-IIaэноксапаринаактивностьнатрияприизучениипрактическинеобнаруживается, либо обнаруживается на низких уровнях.Интервальные значения основных фармакокинетических параметров (Аmax,AUC0-t, Аmax/AUC0-t) для Эноксапарин натрия составили, соответственно0,409 – 0,529 МЕ/мл; 1,892 – 2,497 МЕ*ч/мл; 0,196 – 0,236 ч-1.Интервальные значения основных фармакокинетических параметров (Amax,AUC0-t, Amax/AUC0-t) для препарата Клексан® составили, соответственно0,398-0,480 МЕ/мл; 1,845-2,621 МЕ*ч/мл; 0,181-0,230 ч-1.Коэффициенты вариации основных фармакокинетических параметров (Amax,AUC0-t,Amax/AUC0-t)дляпрепаратаЭноксапариннатриясоставили,соответственно 21,91 %, 23,70 % и 15,69 %.Коэффициенты вариации основных фармакокинетических параметров (Amax,AUC0-t, Amax/AUC0-t) для препарата Клексан® составили, соответственно16,16 %, 29,84 % и 20,35 %.Сопоставление значений AUC0-t с общим AUC0-∞ (их отношение составлялозначительно больше 80 %) свидетельствовало о том, что длительностьнаблюдения являлась достаточной.Фармакокинетика лекарственных средств считается эквивалентной, еслиграницы оцененного доверительного интервала для AUC0-t находятся впределах 0,8 – 1,25.
Для показателей Amax и Amax/AUC0-t, характеризующихсябольшей вариабельностью, эти пределы составляют 0,75 – 1,33.Интервальные значения отношений относительной степени всасыванияэноксапарина натрия (f’), максимальных значений активностей эноксапаринанатрия (f’’) и Amax/AUC0-t (T/R) после введения исследуемого препарата ипрепарата сравнения незначительно отличались от единицы (f’ = 0,907 –1081,102 f’’ = 0,942– 1,216; Amax/AUC0-t (T/R) = 0,940 – 1,230) и укладывались внорму.Коэффициенты вариабельности (общая вариация, CV, %) параметровбиоэквивалентности составили 16,67 %, 21,85 % и 22,96 %, соответственно.Таким образом, в соответствии с Методическими указаниями «Оценкабиоэквивалентности лекарственных средств», 2008 г., фармакокинетикаисследуемых препаратов эквивалентна (для анти-IIа активности).Таблица 39Индивидуальные значения анти-IIа активностей эноксапарина натрияпосле введения лекарственного средства Эноксапарин натрия, МЕ/млВремя, ч№ кролика00,51234681024100,0000,2290,1910,4230,3860,2120,0000,000 0,000200,2190,3110,4150,5110,3480,2560,1590,000 0,000300,3950,3650,4160,2680,1710,1390,1050,000 0,000400,3870,4400,3610,3360,3070,1570,0000,000 0,000500,4340,5330,4630,3680,2470,0330,0000,000 0,000600,3960,4380,4450,5710,3800,2670,1840,000 0,000700,2430,2600,2270,2740,1800,1430,0000,000 0,000800,3350,5860,4120,3140,2880,1640,0000,000 0,000Mean0,000 0,3010,3950,3660,3830,2880,1710,0560,000 0,000GMean------0,3770,3510,3700,2770,149---------SD---0,1440,1270,1020,1110,0840,0750,080------CV---47,7732,1827,7928,9229,0443,63143,22 ------Median---0,3610,4020,4130,3520,2980,1610,000------Доверит---0,0840,0740,0590,0640,0490,0440,047------L-90 %---0,2170,3210,3070,3190,2400,1280,009------U - 90 %---0,3850,4690,4260,4470,3370,2150,103------0,00-менее предела количественного определения«---» - расчет величины не может быть произведен109Таблица 40Индивидуальные значения анти-IIа активностей эноксапарина натрия послевведения лекарственного средства Клексан®, МЕ/млВремя, ч№ кролика 00,51234681024100,0000,3090,2420,2400,1950,1370,0000,000 0,000200,2270,3600,3150,3350,4680,1870,1530,000 0,000300,3430,4750,4410,3480,2250,1380,0960,000 0,000400,3360,4390,4040,2500,1930,1680,0000,000 0,000500,2310,4300,5350,2870,2140,1120,0000,000 0,000600,3270,3600,3100,4720,4920,3620,4120,000 0,000700,3050,3810,3330,2340,1630,0870,0000,000 0,000800,3500,3380,2880,4140,3120,2740,1510,000 0,000Mean0,000 0,2650,3860,3580,3220,2830,1830,1010,000 0,000GMean------0,3830,3480,3130,2600,166---------SD---0,1170,0570,0950,0870,1290,0920,143------CV---44,3214,6326,5526,9345,8150,15140,73 ------Median---0,3160,3710,3240,3110,2200,1530,048------Доверит---0,0680,0330,0550,0500,0750,0530,083------L-90 %---0,1960,3540,3030,2720,2070,1300,018------U - 90 %---0,3330,4190,4140,3730,3580,2360,184------0,00 -менее предела количественного определения«---» - расчет величины не может быть произведен110Таблица 41Фармакокинетические параметры эноксапарина натрия (анти-IIа) послеAUC0-∞AUC 0-T/ч-10-T,Cmax/AUCMRT, чT1/2, чМЕ*ч/млAUC 0-∞,kel, ч-1МЕ*ч/млAUC 0-T,Tmax, чМЕ/млАmax,кролика№введения лекарственного средства Эноксапарин натрия10,42331,9750,2621,9792,6464,3230,2140,99820,51132,7070,2612,7112,6584,2160,1890,99930,41621,9880,2441,9922,8353,7530,2090,99840,44012,1850,2152,1893,2243,5600,2010,99850,53311,9140,2421,9142,8602,4490,2781,00060,57133,1030,2663,1072,6024,0350,1840,99970,27431,4020,2421,4032,8603,2770,1951,00080,58612,2790,2152,2843,2243,4510,2570,998Mean0,4692,1252,1940,2442,1972,8643,6330,2160,999GMean0,4581,8892,1410,2432,1442,8553,5840,2140,999SD0,1030,9910,5200,0200,5210,2440,6050,0340,001CV, %21,9146,6423,708,2023,718,5416,6415,690,08Median0,4762,5002,0860,2432,0912,8483,6560,2050,998Доверит.0,0600,5760,3020,0120,3030,1420,3520,0200,000L-90 %0,4091,5491,8920,2321,8942,7213,2810,1960,998U - 90 %0,5292,7012,4970,2552,5003,0063,9850,2360,999«---» - расчет величины не может быть произведен111Таблица 42Фармакокинетические параметры эноксапарина натрия (анти-IIа) послеCmax/AUC 0-T, ч-11,4660,2151,4713,2244,1790,2110,99720,46842,5030,2592,5072,6754,2050,1870,99830,47512,2080,2412,2122,8803,6110,2150,99840,43911,9620,2151,9673,2243,5790,2240,99850,53521,9920,2151,9973,2243,4260,2690,99860,49243,5880,2983,5912,3244,8260,1370,99970,38111,6100,2151,6143,2243,5000,2370,99780,41432,5360,2592,5402,6804,2580,1630,998Mean0,4392,1252,2330,2402,2372,9323,9480,2050,998GMean0,4341,7692,1540,2382,1592,9133,9220,2010,998SD0,0711,3560,6660,0310,6660,3470,4940,0420,001CV, %16,1663,8229,8412,8229,7711,8312,5220,350,07Median0,4531,5002,1000,2282,1043,0523,8950,2130,998Доверит.0,0410,7890,3880,0180,3870,2020,2870,0240,000L-90 %0,3981,3361,8450,2221,8502,7303,6610,1810,997U - 90 %0,4802,9142,6210,2572,6243,1334,2350,2300,998AUC0-T/AUC0-∞1MRT, чAUC0-∞,МЕ*ч/млT1/2, чkel, ч-10,309Tmax, ч1№кроликаAUC0-T,МЕ*ч/млAmax,МЕ/млвведения лекарственного средства Клексан®«---» - расчет величины не может быть произведен112Таблица 43Параметры биоэквивалентности (анти-IIа) препаратов Эноксапарин натрия иКлексан®№ доб-цаf'f''Amax/AUC11,3471,3691,01621,0821,0931,01030,9010,8750,97241,1141,0040,90150,9610,9961,03760,8651,1611,34270,8710,7180,82580,8991,4171,576Mean1,0051,0791,085GMean0,9941,0561,063SD0,1680,2360,249CV, %16,6721,8522,96Mediane0,9311,0481,013Доверит0,0970,1370,145L-900,9070,9420,940U-901,1021,2161,230113Рисунок 9.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
