Диссертация (1141345)
Текст из файла
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯПЕРВЫЙ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙУНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ И.М. СЕЧЕНОВА МИНИСТЕРСТВАЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИНа правах рукописиМАРГАЕВАБулгун ЮрьевнаРАЗРАБОТКА МЕТОДИК АНАЛИЗА ДЛЯ СТАНДАРТИЗАЦИИЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХГЕПАРИНОВ – ЭНОКСАПАРИНОВ НАТРИЯ14.04.02 – Фармацевтическая химия, фармакогнозияДиссертацияна соискание ученой степеникандидата фармацевтических наукНаучный руководитель:доктор фармацевтических наук, профессорРаменская Галина ВладиславовнаМосква – 2016СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ________________________________________________________ 4ВВЕДЕНИЕ ____________________________________________________________________ 6ГЛАВА 1.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ _________________________________________________ 61.1 Понятие воспроизведённого биотехнологического ЛС (биоаналога). _____________ 131.2 Определение взаимозаменяемости биотехнологических ЛС. ____________________ 161.3 Законодательное регулирование обращения биотехнологических ЛС ____________ 191.4 Подходы к оценке фармакокинетики биоаналогов. ____________________________ 211.5 Методы количественного определения НМГ в препаратах и биожидкостях.
_______ 251.6 Свойства и определение эноксапарина натрия________________________________ 30ВЫВОДЫ К РАЗДЕЛУ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ _____________________________________ 32ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ____________________________________________ 332.1 Объекты исследования:___________________________________________________ 332.2 Разработка методики определения анти-Ха и анти-IIa активности эноксапаринанатрия в условиях in vitro.
___________________________________________________ 342.2.1 Оборудование___________________________________________________ 342.2.2 Реактивы _______________________________________________________ 352.2.3 Приготовление реагентов: ________________________________________ 352.2.4 Приготовление серии разведений рабочего стандартного образца НМГ. __ 372.2.5 Приготовление серии разведений испытуемого препарата НМГ. ________ 382.2.6 Ход анализа при определении анти-Ха активности НМГ.
______________ 392.2.7 Ход анализа при определении анти-IIа активности НМГ. ______________ 412.3 Разработка методики определения анти-Ха и анти-IIa активности эноксапаринанатрия в условиях in vivo. ____________________________________________________ 432.3.1 Биологический этап _____________________________________________ 432.3.1.1 Нормативные ссылки ______________________________________432.3.1.2 Выбор животных __________________________________________442.3.1.3 Описание исследования ____________________________________442.3.1.4 Дозы и подготовка препарата для введения ____________________462.3.1.5 Тест-система (животные и уход за ними) ____________________ 472.3.1.6 Забор крови для определения концентрации препаратовэноксапарина натрия _____________________________________________502.3.1.7 Статистический анализ ___________________________________ 512.3.1.8 Документация и архивирование ____________________________ 522.3.2.
Аналитический этап _____________________________________________ 522.3.2.1 Нормативная документация _______________________________ 522.3.2.2 Оборудование ___________________________________________ 532.3.2.3 Реактивы _______________________________________________ 532.3.2.4 Принцип метода _________________________________________ 562.3.2.5 Методика определения анти-Ха активности гепарина__________ 582.3.2.5.1 Приготовление реагентов _________________________ 582.3.2.5.2Приготовлениеплазмыконтрольнойиплазм-калибраторов ___________________________________________ 582.3.2.5.3 Построение и использование калибровочного графика _ 592.3.2.5.4 Проведение анализа ______________________________ 602.3.2.6.
Методика определения анти-IIа активности гепарина _________ 612.3.2.6.1. Приготовление реагентов _________________________ 612.3.2.6.2. Построение и использование калибровочного графика 622.3.2.6.3. Проведение анализа _____________________________ 632.3.2.6.4. Программное обеспечение ________________________ 64ВЫВОД К ГЛАВЕ 2 ____________________________________________________________ 64ГЛАВА 3.
ВАЛИДАЦИЯ РАЗРАБОТАННЫХ МЕТОДИК ____________________________ 653.1 Специфичность _________________________________________________________ 653.2 Линейность _____________________________________________________________ 66ГЛАВА4АПРОБАЦИЯМЕТОДИКИОПРЕДЕЛЕНИЯАНТИ-ХаиАНТИ-IIaАКТИВНОСТИ ЭНОКСОПАРИНА НАТРИЯ В УСЛОВИЯХ IN VITRO. ________________ 784.1 Результаты и их обсуждение ______________________________________________ 784.2 Определение анти-Ха активности НМГ. _____________________________________ 844.3 Определение антиIIа активности НМГ.______________________________________ 86ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 4 __________________________________________________________ 88ГЛАВА 5.
АПРОБАЦИЯ МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИ-Ха и АНТИ-IIaАКТИВНОСТИ ЭНОКСОПАРИНА НАТРИЯ В УСЛОВИЯХ IN VIVO. _________________ 905.1 Результаты биологического этапа исследования _____________________________ 905.2 Результаты аналитического этапа __________________________________________ 925.3 Фармакокинетический и статистический этап доклинических фармакокинетическихисследований препарата-биоаналога эноксопарина натрия (анти-Ха) _______________ 945.3.1 Анализ фармакокинетических параметров __________________________ 945.3.2 Результаты исследования_________________________________________ 965.4 Фармакокинетический и статистический этап доклинических фармакокинетическихисследований препарата-биоаналога эноксопарина натрия (анти-IIа)_______________ 1045.4.1. Анализ аналитических циклов ___________________________________ 1045.4.2.
Анализ фармакокинетических параметров _________________________ 1065. 4.3. Результаты исследования _______________________________________ 1075.5 Заключение____________________________________________________________ 116ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 5 _________________________________________________________ 1173ОБЩИЕ ВЫВОДЫ ____________________________________________________________ 118СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ________________________________________________________1184СПИСОК СОКРАЩЕНИЙАЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое времяATIII - антитромбин IIIДНК – дезоксирибонуклеиновая кислотаЛП - лекарственный препаратЛС - лекарственное средствоМНН - международное непатентованное наименованиеНМГ- низкомолекулярный гепаринОП - оптическая плотностьРФ – Российская ФедерацияФК - фармакопеяСPMP - Комитет по патентованным лекарственным средствамEMA – European Medicines AgencyFDA (Food and Drug Administration) – Агентство по контролю качествапродуктов питания и лекарственных препаратовME - международная единицарNА - пара-нитроанилинt-PA - Tissue plasminogen activator - тканевый активатор плазминогена5ВВЕДЕНИЕАктуальность темы исследования.
Одной из актуальных задачздравоохранения РФ является своевременное обеспечение производства инадлежащейоценкиэффективностиибезопасностилекарственныхпрепаратов, входящих в список стратегически значимых лекарственныхпрепаратах (ЛП), в соответствии со Стратегией «Фарма-2020». В их числовходят и препараты-биоаналоги низкомолекулярного гепарина (НМГ), аименно эноксапарина натрия, который широко применяется в клиническойпрактике и производство которого должно быть налажено в стране в рамкахгосударственного проекта (Список стратегически значимых лекарственныхсредств,2011).Сцельюстандартизациипрепаратов-биоаналоговэноксапарина натрия рекомендуется проводить сравнительную оценкуактивности in vitro (антифакторная активность к факторам свертывания кровиII и Х: анти-Ха и анти-IIa; Миронов А.Н., 2014) и фармакокинетики вусловиях in vivo относительно препарата сравнения, в качестве которого, какправило, используется оригинальный препарат – Клексан®.
В случаеподтверждения сопоставимой активности исследуемого и оригинальногопрепарата эноксапарина натрия возможно сделать предположение об ихвзаимозаменяемостиибиоаналогичности[ЕвропейскоеМедицинскоеАгентство, 2009; Федеральный закон № 61-ФЗ (поправки), 2015]. Следуетотметить,чтоанализнизкомолекулярныхгепаринов,втомчислеэноксапарина натрия в сложных матрицах, таких как плазма крови, затруднениз-за неоднородности соединения, молекулярной массы и распределения вней заряда дисперсии (Арианова Е.А., 2010), в связи с чем их количественноеопределение проводят косвенно – на основании антифакторной активности.Таким образом, разработка и валидация аналитических методик,позволяющих проводить определение активности анти-Ха и анти-IIaнизкомолекулярных гепаринов в условиях in vitro (препараты) и in vivo6(плазма крови) является важной задачей, необходимой для сравнительнойоценки препаратов эноксапарина при их разработке и стандартизации.Степень разработанности темы исследования.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
