Диссертация (1141252), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Выявлены закономерностихроматографического поведения тиозонида при анализе методом ВЭЖХ с массспектрометрическим детектором.Разработанная методика количественного определения тиозонида в плазмекрови человека методом ВЭЖХ с масс-спектрометрическим детектором былауспешно применена в клиническом исследовании по изучению фармакокинетикипрепарата Тиозонид у здоровых добровольцев при однократном приемевозрастающих доз препарата (25мг, 200 мг, 400 мг, 600 мг) (протокол № Тио 21).Полученные результаты фармакокинетического исследования использованы длядальнейшегоизучениялекарственныхпрепаратаТиозонидсредств,(Государственныйэлектронныйреестрресурс-http://grls.rosminzdrav.ru/CiPermitionReg.aspx?DateBeg=&DateEnd=&DateInc=&NumInc=&RegNm=&Statement=&Protocol=&Torg=%d0%a2%d0%b8%d0%be%d0%b7%d0%be%d0%bd%d0%b8%d0%b4&LFDos=&Qualifier=&Producer=&Recearcher=&OrgDocOut=2&Status=1&NotInReg=0&All=0&PageSize=8&order=date_perm&orderType=desc&pagenum=1).ПолученныефармакокинетическиепараметрыпрепаратаТиозониднеобходимы для дальнейшего изучения препарата и последующего внесения винструкцию по медицинскому применению при регистрации препарата.Основные положения, выносимые на защиту:- Разработка биоаналитической методики количественного определениятиозонида в плазме крови методом ВЭЖХ с масс-спектрометрическимдетектированием.- Валидация биоаналитической методики количественного определениятиозонида в плазме крови методом ВЭЖХ с масс-спектрометрическимдетектированиемселективность,последующимлинейность,валидационнымправильность,характеристикам:прецизионность,количественного определения, перенос пробы, стабильность растворов.предел9Результаты-изученияфармакокинетикиинновационногопротивотуберкулезного препарата Тиозонид у здоровых добровольцев приоднократном пероральном приеме возрастающих доз препарата.Методология и методы исследованияМетодология исследования построена на анализе и обобщении литературныхданных, оценке степени разработанности и актуальности темы, существующихподходовкизучениюфармакокинетикилекарственныхсредств.Методологическая основа работы при выборе методов анализа заключалась визучении физико-химических свойств препарата, подборе оптимальных условийхроматографирования, пробоподготовки и фармакокинетических расчетов.В процессе выполнения работы был использован метод ВЭЖХ с массспектрометрическим детектированием, а также метод осаждения белков плазмы сиспользованием ацетонитрила в качестве осаждающего реагента с цельюизолирования определяемого соединения.Степень достоверности результатов исследованияПервичные данные, полученные в результате проведения настоящегоисследования, получены при помощи современных методов анализа, являютсядостоверными и точными, что подтверждено в ходе проведения процедурывалидации.
Использованное в работе оборудование имело действующиесвидетельства о поверке и зарегистрировано в Реестре средств измерений, чтопозволяет считать результаты исследования достоверными. Все результатыобработаны статистически.Апробация работыОсновные положения работы и результаты исследования доложены нанаучном совете НИИ Фармации «Достижения и перспективы молодых ученыхНИИ Фармации» (Москва, 2014 г.), на Международной научно-практическойконференции «Актуальные проблемы фармации и медицины» (Шымкент, 2015 г.),на VII Научно-практической конференции «Актуальные проблемы оценкибезопасности лекарственных средств» (Москва, 2016 г.), на VI Международнойнаучно-методическойконференции«Путииформысовершенствования10фармацевтического образования. Создание новых физиологически активныхвеществ» (Воронеж, 2016 г.), на XII Научно-практической конференции«Биомедицина и биомоделирование» (Москва, 2016 г).
Апробация работыпроведена на Научном совете Научно-исследовательского института фармацииПервого МГМУ им. И.М. Сеченова (21 июня 2016 г.).Личный вклад автораАвтору принадлежит ведущая роль в проведении экспериментальныхисследований, анализе и обобщении полученных результатов.
Автором личнопроведена разработка и валидация методики определения тиозонида в плазмекрови человека, статистическая обработка результатов. Автору принадлежитведущая роль в проведении анализа плазмы крови здоровых добровольцев,принимавших оригинальный препарат Тиозонид в рамках клиническогоисследования с целью изучения фармакокинетики препарата при помощиразработанной методики. Статистический анализ результатов определенияконцентраций тиозонида в плазме крови и параметров фармакокинетикипроводился с использованием статистических программ.
Вклад автора являетсяопределяющим на всех этапах исследования: от постановки задач, ихэкспериментально - теоретической реализации до обсуждения результатов внаучных публикациях, докладах и внедрения в практику.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучные положения диссертации соответствуют формуле специальности14.04.02 «Фармацевтическая химия, фармакогнозия». Результаты проведенногоисследования соответствуют области исследования специальности, конкретнопункту 4 паспорта научных специальностей.ПубликацииПо материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, из них 2 - визданиях из Перечня ВАК, включенных в базу Scopus и Web of Science.11Связь темы исследования с проблемным планом фармацевтическихнаукДиссертационная работа выполнена в рамках комплексной темы НИИФармации ФГБОУ ВО Первого МГМУ имени И.М.
Сеченова МЗ РФ «Разработкасовременных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским ифармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологическихисследований», номер государственной регистрации 01200606352.Структура и объем диссертацииДиссертационная работа изложена на 117 страницах машинописного текста,состоит из введения, 5 глав, содержащих обзор литературных данных поизлагаемой проблеме (1глава), экспериментальной части(собственногоисследования), где описаны: материалы и методы, использованные в ходепроведенияэксперимента(2глава),разработкаивалидацияметодикиопределения тиозонида в плазме крови человека (3 глава), применениеразработаннойметодикидляизученияфармакокинентикиоригинальногопротивотуберкулёзного препарата Тиозонид в клиническом исследовании,статистическаяобработкафармакокинетическихполученныхпараметровпрепаратазначенийпослеиндивидуальныхприемавизучаемыхдозировках (4 глава), обсуждения полученных результатов (глава 5), спискасокращений и условных обозначений и списка литературы.Диссертация включает 19 таблиц и 35 рисунков.
Библиографический списоксодержит 108 источников, из них 43 на иностранных языках.12ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1Туберкулёз. Эпидемиология, новые тенденции в лечении,современные лекарственные препаратыДинамика основных эпидемиологических показателей по туберкулезу вРоссии в течение последнего десятилетия свидетельствует об улучшенииэпидемической ситуации, однако в то же время на фоне снижения заболеваемостии распространенности туберкулеза сохраняются негативные тенденции кдальнейшему росту лекарственно-устойчивых форм туберкулеза, сочетанныхинфекционных поражений ВИЧ-туберкулез [3].В России за период 2004 - 2013 гг. на фоне снижения заболеваемости (с 83,3до 68,1 случаев на 100 тысяч населения) и распространенности туберкулеза (с218,3до157,7случаевна100тысячнаселения),распространенностьлекарственно-устойчивого туберкулеза за тот же период возросла почти в 2 раза(с 14,2 до 24,6 на 100 тысяч населения) [4].
Согласно докладу ВОЗ «О глобальнойборьбе с туберкулезом» за 2012 год в 2011 году было зарегистрировано 8,7миллиона случаев заболевания туберкулезом и 1,4 миллиона случаев смерти отнего среди лиц, не имевших ВИЧ-инфекции, и еще 430 тысяч случаев смерти отВИЧ-ассоциированного туберкулеза [2].Попадаявлегкие,микобактериизахватываютсяальвеолярнымимакрофагами, однако способны к анабиозу и таким образом могут бесконечнодолго и бессимптомно персистировать в человеке, оставаясь недоступными дляиммунной системы [5].Лечение туберкулеза – комплексное и длительное, главным образомбазируетсянаиспользованиихимиотерапии [6, 7].поликомпонентнойпротивотуберкулезной13Согласно классификации, предложенной Международным союзом борьбы стуберкулезом,противотуберкулезныелекарственныепрепараты(ПТП)взависимости от их активности в отношении к МБТ, подразделяют на три группы:1)лекарственныесредствавысокойэффективности-изониазид,рифампицин;2) лекарственные средства средней эффективности - стрептомицинасульфат, канамицина сульфат, флоримицина сульфат, циклосерин, этионамид,этамбутол и др.;3)лекарственныесредстваумepeннойэффективности-парааминосалициловая кислота (ПАСК), тиоацетазон [8].Такжесуществуетещеоднаобщепринятаяклассификация,систематизированная на различиях в активности и токсичности ПТП.
Согласноданной классификации ПТП делятся на:- препараты I ряда (основные): изонизид, рифампицин, пиразинамид,этамбутол и стрептомицин;- препараты II ряда (резервные): этионамид, канамицин (амикацин),капреомицин,циклосерин,ПАСКифторхинолоны(ципрофлоксацин,офлоксацин), рифабутин, тиацетозон [9, 10].Препараты I ряда сочетают высокую активность против МБТ, умереннуютоксичность и применяются для лечения пациентов с впервые выявленнымтуберкулёзом, их действие направлено на прекращение размножения иуменьшение количества МБТ [10, 11].Препараты II ряда характеризуются и/или меньшей активностью, и/илиболее высокой токсичностью, применяются при неэффективности или плохойпереносимостиосновныхпрепаратов,обладаютпреимущественнобактериостатическим механизмом действия.ВсовременномарсеналеПТПестьрядкомбинированныхпротивотуберкулезных средств, которые представляют собой сочетания восновном препаратов I ряда, такие как рифинаг (рирфампицин+изониазид),рифатер(изониазид+пиразинамид+рифампицин),майрин14(изониазид+рифампицин+этамбутол),майринП(изониазид+пиразинамид+рифампицин+этамбутол),(изониазид+этамбутол),фтизопирамфтизоэтам(изониазид+пиразинамид).Такиелекарственные препараты имеют ряд преимуществ: наиболее удобная формаприема для пациента, обеспечение на этой основе более высокой комплаентности[9, 12, 13].Выбор ПТП и длительность их применения зависят от формы туберкулеза,чувствительности МБТ, переносимости ПТП, клинического течения и характерапредыдущего лечения.Туберкулезостаетсяведущийпричинойсмертисредиизлечимыхинфекционных заболеваний, несмотря на тенденции к улучшению ряда целевыхпоказателей (снижение заболеваемости и смертности от туберкулеза).
Одной изглавных проблем в борьбе с туберкулезом является лекарственная устойчивостьМБТ [14-17]. Устойчивость (резистентность) определяется как снижениечувствительности до такой степени, что данный штамм микобактерий способенразмножаться при воздействии на него препарата в критической или болеевысокой концентрации [18].В структуре лекарственной устойчивости микобактерий туберкулёзаразличают:монорезистентность-устойчивостькодномуизпротивотуберкулёзных препаратов, чувствительность к другим препаратамсохранена; полирезистентность - устойчивость к двум и более препаратам;множественную лекарственную устойчивость (МЛУ) - устойчивость к изониазидуи рифампицину одновременно (независимо от наличия устойчивости к другимпрепаратам); суперустойчивость или широкая лекарственная устойчивость(ШЛУ) - МЛУ в сочетании с устойчивостью к фторхинолонам и к одному изинъекционных препаратов (канамицин, амикацин, капреомицин) - за рубежомпринято обозначать этот вариант МЛУ как XDR (Extreme drug resistance);перекрёстную устойчивость – возникновение устойчивости к одному препаратувлечет за собой устойчивость к другим препаратам [19-21].15Кроме первичной (наблюдается у больных, которые никогда ранее неполучали противотуберкулезных препаратов более 1 месяца, эти больныепервоначально инфицируются лекарственно-устойчивым штаммом МБТ) ивторичной (приобретенной, развивается во время лечения в результатенеправильного ведения больного или невыполнения больным врачебныхрекомендацийи/илипрерываниялечения),атакжемоно-,поли-имультирезистентности существуют такие понятия, как «истинная», «ложная»,«скрытая» и «полная» лекарственная устойчивость (встречается довольно редко)[18, 22].Внастоящеевремядляопределениялекарственнойустойчивостимикобактерий к ПТП в международной практике используются следующиеметоды:-метод пропорций на среде Левенштейна-Йенсена или на среде Миддлбрука7Н10;-метод абсолютных концентраций на плотной яичной среде ЛевенштейнаЙенсена;-метод коэффициента резистентности;-радиометрический метод Bactec 460.Выбор того или иного метода определяется традиционно используемыми вданной стране подходами.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
