Диссертация (1141249), страница 9
Текст из файла (страница 9)
На 100 мл этой смеси добавляют 1 гфенола. Сначала желатин смачивают указанным количеством воды и даютему набухать в течение 2 часов, затем приливают глицерин и фенол.Нагревают и помешивают до тех пор, пока весь желатин равномернонабухнет. Сняв с огня, смесь тотчас фильтруют. Воронку время от времениосторожно нагревают, не давая смеси остыть.
После фильтрованияподготовленную смесь не следует перемешивать, так как образующиесяпузырьки воздуха будутпопадать на препараты, а избавиться от нихпрактически невозможно. При постепенном высыхании смеси со временемпузырьки будут постепенно увеличиваться, что приведет к порчемикропрепаратов.Глицерин - желатиновую смесь плавят на водяной бане.
Предметныеи покровные стекла помещают на край бани (для нагревания). На горячеепредметное стекло капают 2-3 капли расплавленной глицерин-желатиновой смеси, с помощью скальпеля помещают срез и накрываютпокровным стеклом, слегка придавливают и обтирают края ватой,смоченной этанолом. На следующие сутки края покровного стекла55обмазывают парафином для дальнейшего хранения. Перед этим препаратприводят в порядок: скальпелем удаляют из-под покровного стеклавыступающий желатин и протирают вокруг ватой, смоченной теплойводой, а затем сухой марлей.
На хорошо очищенных стеклах обводкахполучается прочная фиксация. Такие препараты могут храниться в течениемногих лет.Предварительно очищенные стекла погружают на 1-2 часа в 10%водный раствор калия бихромата и промывают водой.Глицерин - желатиновой смесью пользуются обычно в тех случаях,когда срезы выгодно оставлять не окрашенными, поскольку обычнонаиболее тонкие структуры в этом случае проявляются резче, чем наокрашенных микропрепаратах.Заливка срезов в глицерин - желатиновую смесь отличаетсяпростотой, но к отрицательным сторонам данного метода следует отнестичастое образование пузырьков воздуха, которые не мешают анализу, ноделают препарат негодным к микрофотографированию.
Препараты,окрашенные большинством красителей, не могут быть занесены вглицерин-желатиновуюсмесь,посколькусрезы,окрашенныеводорастворимыми красителями, быстро бледнеют в желатине. Ккрасителям, пригодным для заключения в глицерин - желатиновую смесь,относятся: насыщенный водный раствор сафронина в смеси 95% этанолом(на одревесневшие ткани дает красный цвет), реактив Шода представляетсобой хризоидин, растворенный в 95% этаноле с добавлением конгокрасного. Данная смесь растворяется в воде со следами аммиака, затемдобавляют тимол.
В данном случае древесина окрашивается в желтыйцвет.563.2. Анатомо-диагностические признаки стебля.Рис. 1. Трава звездчатки средней.Фрагмент эпидермиса стебля с устьицамии простыми волосками. Ув. х 125.Эпидермисстебляпредставленвытянутымиклеткамипрямоугольной, прямоугольно – веретеновидной и веретеновидной формыс прямыми стенками клеток (длиной 170-213 мкм, шириной 6-13 мкм).Устьица овальные аномоцитного типа (длиной 29-39 мкм, шириной 16-21мкм; частота встречаемости 0-57 на 1 мм). Волоски простые головчатые (смногоклеточной ножкой и одноклеточной головкой) расположены однимрядом по всей длине стебля длиной до 1200 мкм.
Нередко стенки клетокволоска спадаются.573.3. Анатомо-диагностические признаки листа.Рис 2. Трава звездчатки срдней.Фрагмент эпидермиса нижнейстороны листа. Ув. х 250.Рис. 3. Трава звездчатки средней.Фрагмент листа с головчатыми волосками.Ув. Х 7058Рис 4. Трава звездчатки средней.Фрагмент паренхимы листа с друзами.Ув. х 250При рассмотрении листа звездчатки средней, с поверхности сверхней стороны у вершины листа обнаруживаются клетки эпидермиса спрямыми и слабо-извилистыми стенками; к середине листа и егооснования – стенки клеток извилисты и сильно извилистые (длиной 113227 мкм; шириной 22-114 мкм). С нижней стороны листа клетки сизвилистыми и сильно извилистыми стенками. Устьица овальныеаномоцитного типа с обеих сторон листа (длиной 33-45 мкм; шириной 2228 мкм – с верхней стороны; длиной 21-30 мкм; шириной 12-18 мкм – снижней стороны), окружены 3-7 околоустьичными клетками.
Частотавстречаемости устьиц с верхней стороны 42-124 на 1 мм2. С нижнейстороны 108-159 на 1 мм2. В паренхиме листа обнаруживаютсямногочисленные друзы оксалата кальция диаметром 8 - 43 мкм. Уоснования листа и вдоль жилки с нижней стороны наблюдаютсяголовчатые волоски длиной до 800 мкм с многоклеточной ножкой иодноклеточной головкой. Жилка представлена закрытым коллатеральнымпучком со спиральными трахеидами.Верхние листья сидячие, черешок имеется у нижних листьев.Структура черешка схожа со структурой стебля.593.4.
Анатомо-диагностические признаки цветков.Рис. 5. Трава звездчатки средней. Пыльца.Ув. Х 250.Рис. 6. Трава звездчатки средней.Фрагмент эпидермиса верхнейстороны чашелистика. Ув. Х 25060Рис. 7. Трава звездчатки средней.Фрагмент эпидермиса нижней сторонычашелистика с головчатыми волосками.Ув. х 70.Пыльца округлая шероховатая, и многопоровая диаметром 41-50мкм.Венчик обычно редуцирован. Структура эпидермиса чашелистика вомногом схожа со структурой эпидермиса листа.
Клетки верхней стороны спрямыми, слабоизвилистыми и извилистыми стенками (длиной 79-121мкм, шириной 12-59 мкм), стенки клеток с нижней стороны извилистые исильноизвилистые (длиной 5-113 мкм, шириной 4-12 мкм). Устьицааномоцитного типа длиной 29-42 мкм шириной 24-38 мкм. Волоскипростые многоклеточные и головчатые с одноклеточной головкой имногоклеточной ножкой длиной 910 мкм.Строение плодолистика такое же как и строение чашелистика. Плод– одногнездная коробочка диаметром 930-1250 мкм с центральнымсемяносцем.Эпидермис семени представлен клетками со слабоизвилистыми,извилистыми и сильноизвилистыми стенками длиной 83-128 мкм,шириной 21-99 мкм. Имеются сосочки до 52 мкм высотой.61Выводы к III главе.1.
Стебель травы звездчатки средней имеет следующие анатомодиагностическиепризнаки:вытянутыеклеткипрямоугольной,прямоугольно-веретеновидной и веретеновидной формы с прямымистенками. Устьица овальные аномоцитного типа. Волоски простые иголовчатые расположены одним рядом по всей длине стебля. Нередкостенки клеток волосков спадаются.2. Лист с поверхности с верхней стороны у вершины листа клеткиэпидермиса с прямыми и слабоизвилистыми стенками; к середине листа иего основания – стенки клеток извилистые и сильно извилистые.
С нижнейстороны листа клетки с извилистыми и сильно извилистыми стенками.Устьица овальные аномоцитного типа, с обеих сторон листа окружены 3-7околоустьичными клетками. В паренхиме листа многочисленные друзыоксалата кальция. У основания листа и вдоль жилки с нижней стороныголовчатые волоски с многоклеточной ножкой и одноклеточной головкой.Жилка представлена закрытым коллатеральным пучком со спиральнымитрахеидами.3. Структура эпидермиса чашелистика во многом схожа соструктурой эпидермиса листа.
Клетки с верхней стороны с прямыми,слабоизвилистыми и извилистыми стенками, стенки клеток с нижнейстороны извилистые и сильноизвилистые. Устьица аномоцитного типа.Волоски простые многоклеточные и головчатые с многоклеточной ножкойи одноклеточной головкой.Строение плодолистика такое же как и чашелистика.Плод - одногнездная коробочка с центральным семяносцем.Эпидермиссемянпредставленклеткамисослабоизвилистыми,извилистыми и сильноизвилистыми стенками. Имеются сосочки.62ГЛАВА 4.
ИССЛЕДОВАНИЕ КАЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ИКОЛИЧЕСТВЕННОГО СОДЕРЖАНИЯ ОСНОВНЫХДЕЙСТВУЮЩИХ ВЕЩЕСТВ В ТРАВЕ ЗВЕЗДЧАТКИСРЕДНЕЙ.4.1. Исследование качественного состава звездчатки среднейметодом ВЭЖХ.Согласно данным литературы в траве звездчатки средней содержатсябиологически активные вещества: каротин, следы эфирного масла,синаловую кислоту, аскорбиновую кислоту, витамин Е, тритерпеновыесапонины, флавоноиды, дубильные вещества и высшие алифатическиеспирты [118].Ранее методом ТСХ и с помощью цветных реакций установлено, чтов траве мокрицы содержатся углеводы, аминокислоты, стероидныетритерпеноиды, флавоноиды, дубильные вещества, аскорбиновая кислота.Установленкомпонентныйсоставиколичественноеопределениеуглеводов и аминокислот в траве звездчатки средней.Задачей настоящих исследований было: идентифицировать основныебиологически активные вещества(БАВ) в траве звездчатки средней спомощью ВЭЖХ, что позволяет объективно и достоверно установитькомпонентный состав данного сырья.ПредварительнодляидентификацииБАВтравызвездчаткиприготавливали извлечение на 70 % этаноле в соотношении (сырьеэкстракт) 1:50 (раствор А).При определении оптимальных условий хроматографированияустанавливали длину волны детектирования.
Известно, что существованиеформсоединенийпредопределяетисследованиеспектральныххарактеристик и хроматографических характеристик водно-спиртовыхизвлечений исследуемого объекта. При этом для качественной оценки63достаточно, чтобы спектральные характеристики БАВ, в основном,совпадали со спектром стандартных образцов.Спектры поглощения растворов стандартных образцов представленына рис. 8Спектры галловой-1 и витамин В1-2Спектр аскорбиновой кислотыРутинКсантотоксинOHHOOOHOOOHOOРУТИНОЗАOCH3Рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
