Диссертация (1141249), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Фармакопейными (ГФ ХI, вып. 2) являютсяследующие:на инулин: 1) альфа-нафтол и конц. серная кислота окрашиваеткорни одуванчика в фиолетово-розовый цвет; 2) альфа-нафтол и конц.серная кислота окрашивает корневища и корни девясила. краснофиолетовый цвет, тимол и конц. серная кислота - в оранжево-красныйцвет.на слизь: 1) раствор аммиака (NH3) или едкого натра (NаОН)окрашивает корни алтея в желтый цвет; 2) при смачивании водой цветкилипыослизняются;3)напорошоксемянльнавыполняютгистохимическую реакцию с раствором туши. Полисахариды листьевподорожника большого и слоевищ ламинарии осаждаются из водногоизвлечения 95% спиртом. Образующиеся после кислотного гидролизавосстанавливающие сахара ламинарии дают реакцию с реактивомФелинга, образуется оранжево-красный осадок.
В листьях подорожникабольшого образующаяся после кислотного гидролиза галактуроноваякислота дает реакцию с карбазолом, появляется красно-фиолетовоеокрашивание. При помощи качественных реакций чаще выявляются слизи.Под влиянием раствора NaOH они приобретают лимонно-желтоватыйцвет, пoд воздействием метиленового синего - голубой. На фоне чернойтуши слизь имеет вид бесцветных сгустков. Количественное определениеполисахаридов ГФ ХI, вып. 2 предлагает для листьев подорожникабольшого и слоевищ ламинарии. Метод определения гравиметрический(весовой), основанный на осаждении полисахаридного водного извлечения95% спиртом.
Стадии анализа: 1) экстракция полисахаридов водой; 2)осаждение полисахаридов из водного извлечения 95% спиртом; 3)высушивание осадка и доведение его до постоянной массы. В слоевищахламинарии, кроме того, определяют содержание йода после сжигания24навески бром йодометрическим методом. Там же определяют содержаниепеска (SiO2). В сырье алтея, липы, льна, мать-и-мачехи, подорожникаблошного количественного определения биологически активных веществ иэкстрактивных веществ не проводят [89,111].Приисследованиикачественногоиколичественногосоставауглеводов в плодах бархата амурского было установлено, что в качествесвободных сахаров присутствует фруктоза и глюкоза: содержаниефруктозы колеблется (от 15,7 до 16,1%), глюкозы (от 15,1 до 18,3%).Связанные сахара представлены глюкозой и ксилозой: содержаниеглюкозы от 1,1 до 1,8%, ксилозы от 0,83 до 0,95% [62, 65].В нашей работе определено содержание свободных сахаров в травезвездчатки средней прямофазной ВЭЖХ, а связанных углеводов методомкапиллярного электрофореза.
Установлено, что связанных сахаров больше(8,18%), чем свободных (0,84%). Свободные сахара представленыглюкозой 0,32% и фруктозой 0,52%. Связанные сахара арабинозой 2,10%,ксилозой 0,70%, глюкозой 3,28%, галактозой 2,10% [79].При определении в почках черной смородины свободных сахаровметодом прямофазной ВЭЖХ, связанных сахаров методом капиллярногоэлектрофореза установлено, что связанных сахаров больше (9,55 %), чемсвободных (6,85%).
Связанные сахара представлены арабинозой, глюкозойи галактозой. Свободные сахара – глюкозой и фруктозой [86].В листьях и корневищах с корнями валерианы лекарственнойметодом ВЭЖХ определено, что свободные сахара представленыглюкозой, фруктозой и сахарозой. Связанные сахара – арабинозой,ксилозой, глюкозой и галактозой [38].Исследование качественного и количественного состава углеводов вцветках, листьях, корневищах с корнями первоцвета лекарственногопоказало, что свободные сахара содержатся только в цветках (фруктоза,глюкоза, сахароза).
Общая сумма свободных сахаров 9,24 %. Связанные25сахара содержатся во всех частях растения (арабиноза, ксилоза, глюкоза,галактоза). Наибольшее содержание связанных сахаров в корневищах икорнях первоцвета [10].В листьях и настое крапивы двудомной определены полисахаридыгравиметрическим и спектрофотометрическим методом с применениемраствора пикриновой кислоты. Стандартным раствором служила глюкоза.Содержаниеполисахаридоввлистьяхкрапивыприопределениигравиметрическим методом составляло 5,62%, спектрофотометрическимметодом – 4,07%.
В настое из листьев крапивы полисахаридовгравиметрическим методом найдено 0,21%, а спектрофотометрическимметодом – 0,31% [77].Методом фракционирования полисахариды выделяли из хамерионаузколистного.Количественноесодержаниефракцийопределялигравиметрическим методом. Моносахаридный состав комплексов послегидролиза раствором серной кислоты определяли методом восходящейхроматографии на бумаге в системе растворителей: н-бутанол – пиридин вода (6:4:3); этилацетат – уксусная кислота – муравьиная кислота – вода(8:3:1:4); н-бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:5).
Хроматограммуобрабатывали анилинфталатным реактивом и 1 % раствором резорцина. Всоставемоносахаридовобнаружено17веществ,изкоторыхидентифицированы: арабиноза, ксилоза, глюкоза, сахароза, фруктоза, Dглюкуроновая кислота, рамноза [15].После гидролиза устанавливали качественный углеводный составтравы очанки коротковолосчатой методом распределительной бумажнойхроматографии в системе растворителей: н-бутанол – пиридин – вода(6:4:3)нисходящимспособом.Всоставеуглеводовдоминируютмоносахариды (3,9 %).
Моносахаридными компонентами углеводныхфракций являются: глюкоза, галактоза, арабиноза и ксилоза [8].26Для гравиметрического определения полисахаридов в листьяхподорожника предложена модифицированная фармакопейная методика.Методика использована для анализа листьев подорожника большого,подорожника среднего и подорожника ланцетного. Во всех образцахподорожника содержание полисахаридов составляет от 11 до 22 % [37].В водном комплексе мать-и-мачехи и во всех других фракциях (ПВ)и(Гц,А,В)определялиспектрофотометрическимдобавлениемметодомсульфониловойсодержаниеуроновыхпосреакциикислоты).кислоткарбазоломУстановлено(ссуммарноесодержание полисахаридов и полисахаридов с низким содержаниемуроновых кислот составило 30,8 % [72].1.3.3 Определение аминокислот в сырье и фитопрепаратах.Методы определения аминокислот многочисленны и разнообразны:физические, химические и физико-химические.
Используют цветныереакции (чаще всего с нингидрином), хроматографию в тонком слоесорбента. Методики с применением автоматических аминокислотныханализаторов. [49, 53, 68, 100, 111]Так, качественный и количественный состав 5 видов рододендронаопределяли на аминокислотном анализаторе ААА – 399 (ЧССР) втрадиционных условиях. Листья всех пяти видов содержат в свободномсостоянии: аспарагиновую кислоту, треонин, лизин. В связанном виде:аспарагиновую кислоту, лизин, глютамин, аргинин, треонин [7].Анализ водорастворимых фракций из плодов бархата амурскогоосуществляли на аминокислотном анализаторе фирмы «Hitachi» модель835, на стальной колонке (0,4 х 15 см), заполненной катионообменнойсмолой марки 2619. Установлено, что преобладающими аминокислотами вплодах бархата амурского являются глютаминовая кислота (20,78 %),27аспарагиновая кислота (10,77 %), аргинин (9,15 %) от общего содержанияаминокислот [61].Аминокислотный состав нескольких видов очанки устанавливали нааминокислотном анализаторе ААА – 399 (ЧССР) в стандартных условиях.Аминокислотныйсоставвсехпятивидовочанкинезначительноотличаются и представлен 8 связанными и 7 свободными аминокислотами.Связанных аминокислот 33,31 мг/%, свободных – 7,6 мг/% [104].Анализаминокислотногощетинистого,тысячелистникасоставатравытысячелистникабледно-желтого,тысячелистникаобыкновенного осуществляли на автоматическом анализаторе Т-399(Чехия).
ВВ траве всех видов тысячелистника найдено 17 аминокислот.Качественный состав во всех видах идентичен. Сумма аминокислот в траветысячелистника обыкновенного до 13,2 мг/%, в траве бледно-желтого – до11, 8 мг/%, в траве тысячелистника щетинистого до 11,4 мг/% [52].Аминокислотный состав водорастворимых фракций из почек чернойсмородины анализировали на аминокислотном анализаторе фирмы«Hitachi» модель 835 по традиционной методике.
В почках чернойсмородины определено 19 аминокислот. Преобладающими кислотамиявляются: аспарагиновая кислота (11,23 %), серин (6,06 %), глютаминоваякислота (15,90 %), глицин (6,64 %), лейцин (6,89 %), лизин (6,80 %),аргинин (9,75 %) относительно общего содержания аминокислот в сырье[85].В листьях и плодах голубики анализировали качественный иколичественный состав аминокислот с использованием аминокислотногоанализатора фирмы «Hitachi» модель 835 по традиционной методике.Определено, что в листьях и плодах голубики содержится 19 аминокислот,из них 8 незаменимых и 11 заменимых.
Суммарное содержаниеаминокислот в листьях более чем в 2 раза выше, чем в плодах [105].28На чешском аминокислотном анализаторе марки Amino AcidAnalyzer 332 проверен качественный состав и количественное содержаниеаминокислот зопника колючего, зопника клубненосного, белокудренникачерного, котовника крупноцветкового. Показано, что в подземных органахсодержится 15 аминокислот. Суммарное содержание аминокислот взопнике колючем (в траве 13,20 г/%, в корнях 8,91 г/%), в зопникеклубненосном (в траве 5, 03 г/%, в подземных органах 4,72 г/%), в травебелокудренника черного – 11,82 г/%, в подземных органах котовникакрупноцветкового – 6,85 г/% [45].Побеги, стебли и листья коллизии душистой анализировали нааминокислотном анализаторе фирмы «Hitachi» модель 835 по стандартнойметодике.
Установлено, что содержание аминокислот в побегах почти в 2раза выше, чем в стеблях и листьях [78].Анализ аминокислот на аминокислотном анализаторе ААА – 339(Чехия) показал, что в корневищах и корнях валерианы содержится 7свободных и 9 связанных аминокислот. Состав свободных и связанныхаминокислот корневищ и корней валерианы не идентичен. Связанныхаминокислот больше всего накапливается в корневищах [22].При анализе травы бурачника лекарственного на аминокислотноманализаторе фирмы «Hitachi» модель 835 было установлено, что общееколичество свободных и связанных аминокислот в надземной частибурачника составило 11,33 %.