Диссертация (1141249), страница 5

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 5)

Доминирующее положение принадлежитглютаминовой и аспарагиновой кислотам, лейцину, аргинину, валину,аланину, глицину [110].Установлен аминокислотный состав соцветий и корней бархатцевпрямостоячих (Tagetes erecta L.). Определение качественного состава иколичественногосодержанияпроводилипометодикеВЭЖХ,предложенной Штейном и Муром в современной модификации (АОАО29Official Method 994/12 AminoAcidsinFeeds. Acid Hydrolysis Method). Былоопределено 15 аминокислот [69].Анализ водорастворимых фракций цветков, листьев и корневищ скорнями первоцвета лекарственного проводили на аминокислотноманализаторе фирмы «Hitachi» модель 835 по стандартной методике.Выявлено, что в листьях и корневищах с корнями содержится 19аминокислот одного состава. В цветках присутствуют те же аминокислотыза исключением цистина [9].В соке лопуха анализировали свободные и сумму свободных исвязанных аминокислот на аминокислотном анализаторе Biotronic LC –200 (Германия).

Идентифицировано 15 аминокислот, сумма свободныхаминокислот составляет 71,25 мг, связанных аминокислот 177,08 мг.Содержание аминокислот после гидролиза в 2,5 раза выше, чтосвидетельствует о том, что в соке лопуха аминокислоты находятся всвязанном состоянии [40].1.3.4. Методы анализа флавоноидов в сырье и фитопрепаратах.Идентификацию и классификацию флавоноидов осуществляютразличными методами: цветные реакции, хроматография на бумаге и втонкомслоесорбента,методвысокоэффективнойжидкостнойхроматографии, ИК-спектроскопия, хромато-масс-спектрометрия и др.Специфической реакцией на флавоноиды является цианидиноваяпробасконцентрированнойхлористоводороднойкислотойиметаллическим магнием или цинком.

Флавоноиды чувствительны кдействию щелочей за счет наличия гидроксильных групп. С основнымацетатом свинца флавоноиды образуют окрашенные соли или комплексы.Для обнаружения флавоноидов используют реакцию с реактивом Вильсона(борная и лимонная кислоты в безводном ацетоне) [18, 89, 111, 112].30Определение наличия флавоноидов проводят с использованиемхроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента, применяя разныесистемы растворителей: н-бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:5); 2 %уксусная кислота; 15 % уксусная кислота; хлороформ – метанол (9:1) [18,25, 30, 47].Для обнаружения, разделения и идентификации флавоноидовиспользуют спектральные методы, газожидкостную хроматографию,ВЭЖХ, ПМР, ИК – спектрометрию; масс-спектрометрию. С помощьютитриметрических,фотоколориметрических,спектрофотометрических,полярографических, люминисцентных методов проводят определениесодержания флавоноидов в растительном сырье и фитопрепаратах [17, 25,34, 106, 107].Для количественного определения суммы флавоноидов в соцветияхпижмы использован метод УФ-спектрофотометрии в буферном растворерН = 9; метод количественного определения суммы флавоноидов прямымспектрофотометрированиембоярышникаиэтанольныхпрепаратовспектрофотометрическогоизэкстрактов;негоопределения,дляразработанаоснованнаянасырьяметодикареакциикомплексообразования с солью циркония [103].Фотоколориметрический метод по реакции комплексообразования сцинк-уранил-ацетатом или с алюминия хлоридом использовали дляанализа сырья арники, календулы и настоек гомеопатических послегидролиза и без гидролиза после очистки на колонке с полиамиднымсорбентом.Использованиецинк-уранил-ацетататанецелесообразно.Очистка на колонке с полиамидным сорбентом дает воспроизводимыерезультаты [43].При стандартизации сырья пустырника установлено, что прямаяспектрофотометрия дает завышенные результаты на 30 %, поэтому неможет быть использована для анализа сырья пустырника и фитопрепаратов31из него, без предварительной очистки флавоноидов на колонке сполиамидным сорбентом [114].Методдифференциальнойспектрофотометриипореакциисалюминия хлоридом был использован для количественного определенияфлавоноидов в листьях и почках черной смородины.

Содержаниефлавоноидов в почках черной смородины – 1,20 – 1,85 %; в листьях – 1,29– 1,68 % [87].В листьях зимолюбки зонтичной определяли флавоноиды методомдифференциальной спектрофотометрии по реакции с алюминия хлоридом.Среднее содержание фенольных соединений составило арбутина – 10,57%, флавоноидов – 1,0 %, гидроксамовых кислот – 2,52 %, полифенольныхокисляемых соединений – 21,26 % [96].С помощью спектрофотометрического метода по реакции салюминияхлоридомфлавоноидовнаустановленопротяжениитрехнаиболеевысокоесодержаниелетцветкахпустырникавпятилопастного (0,301 – 0,331 %) [73].Разработана методика спектрофотометрического определения суммыфлавоноидов с алюминия хлоридом в траве горца птичьего (спорыша),горцаразнолистного,горцанезамеченного.Максимальнаясуммафлавоноидов наблюдается в период массового цветения растений [88].Анализлистьевземляникисадовойспектрофотометрическимметодом по реакции с алюминия хлоридом показал, что максимальноенакопление флавоноидов происходит в фазу цветения и составляет дляземляники «Фестивальная» - 3,0 %, для «Гигантеллы» - 2,7 % [76].Приведены результаты количественного определения флавоноидов втраве тысячелистника обыкновенного спектрофотометрическим методомпо реакции с алюминия хлоридом.

Содержание флавоноидов от 1,62 до2,08 % [39].32В сырье полыни горькой установлено количественное содержаниефлавоноидов методом спектрофотометрии по реакции с алюминияхлоридом. Содержание флавоноидов колеблется от 0,67 % до 0,92 % [33].Определено содержание флавоноидов в траве ярутки полевой ипастушьей сумки спектрофотометрическим методом по реакции салюминия хлоридом. Содержание флавоноидов в траве ярутки полевой –1,38 %, в траве пастушьей сумки – 1,51 % [42].Методом дифференциальной спектрофотометрии по реакции салюминия хлоридом определена сумма флавоноидов в траве манжетки.Содержание суммы флавоноидов в траве манжетки колеблется от 2,24 до4,05 % [28].Спектрофотометрическимметодомпореакциисалюминияхлоридом установлено содержание флавоноидов в листьях некоторыхвидовРододендрона.Установлено,чтонаибольшеесодержаниефлавоноидов в листьях Рододендрона Agamea [24].Сравнительноеисследованиесодержанияфлавоноидовипроантоцианидинов в листьях 13 видов ив, произрастающих в Белоруссии.Флавоноидыопределеныиспользованиемреакцииспектрофотометрическимсалюминияхлоридом.методомсМаксимальноесодержание флавоноидов обнаружено в листьях ивы пятитычиночной [46].Разработана методика количественного определения флавоноидов вразличных органах первоцвета лекарственного.

С использованием методадифференциальной спектрофотометрии по реакции с алюминия хлоридом.Установлено содержание флавоноидов в цветках: 4,15 – 4,67 %; в листьях:1,02 – 1,57 %. Методом ВЭЖХ из цветков и листьев первоцветалекарственного выделено 9 флавоноидных соединений, с помощью массспектрометрииустановленоиххимическоестроение.Вцветкахпервоцвета содержится 4 флавоноида – производных кверцетина и одинфлавоноид–производноекемпферола:кверцетин-3-О-β-D-33глюкопиранозид, 3-О-β-D-глюкопиранозид кверцетина; кверцетин-3-О-αL-маннопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозид;кверцетин-3-О-α-L-маннопиранозил-(1→6)-маннопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозид;кверцетин-3-О-{6-О-[3-(2,4-диметоксифенил)-2-бутеноил]-α-Lманнопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозид}.Производное кемпферола–кемпферол-3-О-α-L-маннопиранозил-(1→6)-α-L-маннопиранозил-(1→6).В листьях первоцвета лекарственного найдены те же производныекверцетина и кемпферола и определено еще дополнительно 4 соединения –производных кемпферола: кемпферол-3-О-β-D-глюкопиранозид, 3-О-β-Dглюкопиранозидкемпферола;кемпферол-3-О-α-L-маннопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозид; кемпферол-3-О-α-L-рамнопиранозил-(1→6)β-D-глюкопиранозид;кемпферол-3-О-α-L-маннопиранозил-(1→6)-α-L–маннопиранозил-(1→6)-β-D–глюкопиранозид [11, 12].Методом ВЭЖХ из травы звездчатки средней впервые выделено 3неизвестных ранеефлавоноидных соединения, с помощью МС установленоиххимическоестроение:4,5,7-тригидрокси-8-(β-D–глюкопиранозил-(1→6)-β-D–глюкопиранозил-(1→6)-3-О-метил-β-D-глюкопиранозил)флавон;4,5,7-ригидрокси-8-(β-D-глюкопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозил) флавон; 4,5,7-тригидрокси8-(β-D-глюкопиранозил-(1→6)-β-Dглюкопиранозил) флавон.Подтверждено присутствие флавоноида витексина в траве звездчаткисредней; также можно предположить, что содержится изомер витексина –сапонаретин, так как при фрагментации ионов пиков с временамиудерживания 1, 43 и 1,76 получается практически одно и то же вещество[57].В ходе исследования установлено, что в почках черной смородинысодержится 4 флавоноида, из них 2 производных кверцетина и 2производныхмирицетина:кверцетин-3-О-[6-О-малонил-β-D-глюкопиранозид] (I), кверцетин-3-О-D-галактопиранозид или гиперозид34(II), мирицетин-3-О-[6-О-малоноил-β-D-глюкопиранозид] (III), мирицетин3-О-β-D-глюкуронид (IV).В листьях черной смородины содержатся 2 производных кверцетинаи2производныхкемпферола:кверцетин-3-О-[6-О-малонил-β-D-глюкопиранозид] (I), кверцетин-3-О-D-галактопиранозид или гиперозид(II), кемферол-3-О-[6-О-малоноил-β-D-глюкопиранозид] (V), кемферол-3О-D-галактопиранозид (VI).Флавоноиды, производные кверцетина, выделенные из почек илистьев черной смородины, по химическому строению совпадают [83,133].1.3.5.

Характеристики

Список файлов диссертации